Proposal PKL Bagus Hendrawan B1J013184 edit ahs 10042016.doc

7/26/2019 Proposal PKL Bagus Hendrawan B1J013184 edit ahs 10042016.doc

http://slidepdf.com/reader/full/proposal-pkl-bagus-hendrawan-b1j013184-edit-ahs-10042016doc 1/25

DETEKSI KASUS RUBELLA DENGAN UJI SEROLOGI MENGGUNAKAN

METODE ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA)

Bagus Hendrawan

B1J011!"

#RO#OSAL #RAKTIK KERJA LA#ANGAN

KEMENTERIAN RISET$ TEKNOLOGI$ DAN #ENDIDIKAN TINGGIDAN

KEBUDA%AAN

UNI&ERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN

'AKULTAS BIOLOGI

#UROKERTO



01*



DETEKSI KASUS RUBELLA DENGAN UJI SEROLOGI MENGGUNAKAN

METODE ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA)

Bagus Hendrawan

B1J011!"

Untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar sarjana sains

pada Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman

Purwokerto

Disetujui dan disahkan

pada tanggal…….April !"#

Pem$im$ing Pem$im$ing %apangan & Pem$im$ing %apangan &&

Drs. Agus 'ery Susanto( ).S. dr. )ursinah Sp.)* Su$angkit( ).Biomed.

+&P ",-,!"/ ",#!0 " !!/ +&P ",11!1! !! !" !"/ +&P ",!01 !!0 " "!!

)engetahui(

2akil Dekan Bidang Akademik Fakultas Biologi

Universitas Jenderal Soedirman

Dr. 'endro Pramono ( ).S.

+&P ",-,!1 ",#!" " !!"

#RAKATA



Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat 3uhan 4ang )aha 5sa yang telah

melimpahkan rahmat serta hidayah6+ya sehingga penulis dapat menyelesaikan

penyusunan proposal praktik kerja lapangan 7P*%8 mengenai deteksi kasus ru$ella

dengan uji serologi menggunakan metode enzyme-linked immunosorbent assay

75%&SA8. Proposal P*% ini disusun se$agai persyaratan memperoleh gelar sarjana sains

di Fakultas Biologi Unsoed.

Dengan selesainya penyusunan proposal P*% ini( penulis menyampaikan terima

kasih kepada

". Dr. 'endro Pramono( ).S. selaku 2akil Dekan Bidang Akademik Fakultas Biologi

yang telah mem$erikan i9in untuk pelaksanaan P*%(

. Drs. Agus 'ery Susanto( ).S. selaku pem$im$ing P*% atas $im$ingan dan arahan

dalam penyusunan proposal P*% ini(0. dr. )ursinah selaku pem$im$ing lapangan P*%(

/. Su$angkit( ).Biomed. selaku pem$im$ing lapangan P*%(

-. Drs. Bam$ang 'eriyanto( ).*es. selaku *oordinator %a$oratorium Penelitian

Penyakit &n:eksi Pro:. Dr. Sri ;emijati yang telah mem$erikan i9in penulis untuk

melakukan P*% pada lokasi terse$ut(

#. Dr. dr. <ivi Setiawaty( ).Biomed. selaku *epala %a$oratorium <irologi(

1. Pretty )ultihartina( Ph.D. selaku *epala Pusat Biomedis dan 3eknologi Dasar

*esehatan

. Semua pihak yang telah mem$antu di dalam penyelesaian usulan P*%.

Penulis menyadari $ahwa di dalam penyusunan proposal P*% ini masih terdapat

kekurangan. ;leh karena itu( saran dan kritik yang mem$angun sangat penulis harapkan

untuk per$aikan proposal P*% ini. Semoga proposal P*% ini dapat mem$erikan

man:aat $agi pihak6pihak yang memerlukan in:ormasi tentang deteksi kasus ru$ella(

khususnya menggunakan metode 5%&SA.

Purwokerto( April !"#

Penulis

DA'TAR ISI

%em$ar Pengesahan................................................................................................. i

Prakata.................................................................................................................... ii

Da:tar &si................................................................................................................ iii

Da:tar 3a$el........................................................................................................... iv

Da:tar =am$ar....................................................................................................... v



&. Pendahuluan..................................................................................................... "

&&. )ateri dan >ara *erja...................................................................................... "!

&&&. 5valuasi 'asil *erja........................................................................................ "/

Da:tar ?e:erensi..................................................................................................... 0"

%ampiran................................................................................................................ 00

DA'TAR TABEL

3a$el 0.". 'asil pengukuran nilai Optical Density untuk strip " dan …….…… 1

3a$el 0.. 'asil pengukuran nilai Optical Density untuk strip 0 dan /…….…… 1

3a$el 0.0. 'asil pengukuran nilai Optical Density untuk strip - dan #…….……

3a$el 0./. 'asil pengukuran nilai Optical Density untuk strip 1 dan …….……

3a$el 0.-. 'asil pengukuran nilai Optical Density untuk strip , dan "!…….…..

3a$el 0.#. 'asil pengukuran nilai Optical Density untuk strip "" dan "…….…



DA'TAR GAMBAR

=am$ar ".". Struktur <irus ?u$ella …………………………………………………………. "

=am$ar 0.".". =edung Utama Pusat Biomedis dan 3eknologi Dasar *esehatan …….. "/

=am$ar 0.".. =edung %a$oratorium Penelitian Penyakit &n:eksi +asional Pro:. Dr.

Sri ;emijati %a$nas8…………………………………………………………………... "-

=am$ar 0..". Skema koding protein nonstruktural pada ujung -@6 Open Reading

Frames dan protein struktural pada ujung 0@6 Open Reading Frames ……….............. "

=am$ar 0... Skema siklus hidup virus ru$ella 7?+A8…………………………........ !



=am$ar 0..0. Diagram hasil deteksi ru$ella menggunakan metode Indirect Enzyme

Linked-Immunosorbent Assay...…………………………………........…….................. ,

=am$ar 0../. 'asil akhir pengujian serum menggunakan metode Indirect Enzyme

Linked-Immunosorbent Assay se$elum penam$ahan top olution............................... ,

=am$ar 0..-. 'asil akhir pengujian serum menggunakan metode Indirect Enzyme

Linked-Immunosorbent Assay setelah penam$ahan top olution................................. 0!

I+ #ENDAHULUAN

1+1 La,ar Be-a.ang<irus ?r u$ella merupakan virus ?+A dengan polaritas6 positi:( memiliki untai

?+A tunggal( dan merupakan anggota dari genus ?u$ivirus( :amili 3ogaviridae

7A$ernathy et al.( !"08. <irus ini memiliki $entuk s:erik ( yang $erukuran #-61! nm

dengan kapsid $er$entuk ikosahedral 7>ong et al.! !""8. Selu$ung luar virus ini

tersusun dariatas lipid yang kompleks dengan memiliki 0 $uah glikoprotein( masing6

masingyaitu dua di $agian selu$ung dan satu di $agian inti. <irus ini memiliki

sStruktur nya yang terdiri atasdari dua su$unit $esar ( satu su$unit $erkaitan dengan



en"elope virus dan su$unit yang lain $erikatan dengan nucleoprotein core 7*adek

Darmadi( !!18. )anusia merupakan inang $agi <virus ru$ella memiliki inang $erupa

manusia 7>ong et al.! !""8.

?u$ella merupakan penyakit pandemi yang terjadi se$elum ditemukannya

vaksin anti ru$ella. *asus ini menCapai punCak pada wa$ah ter$esar yang terjadi pada

tahun ",#/",#- dimana ada "(- juta kasus ru$ella yang munCul. Setelah penemuan

vaksin ru$ella pada tahun ",#, jumlah kasus yang dilaporkan dari ru$ella di menurun

seCara drastis hingga "E "!.!!!.!!! penduduk. Panel independen internasional pada

tahun !!/ sepakat $ahwa ru$ella dieliminasi dari da:tar wa$ah di Amerika Serikat

7)C%ean et al.( !"a8.Penyakit ini kemudian menjadi penyakit endemik di $er$agai $elahan dunia.

Berdasarkan survei dari negara anggota #orld $ealt% Organization 72';8( jumlah

negara yang telah masuk rubella-containing "accines se$agai program imunisasi rutin

nasional meningkat dari 0 negara 7"0 dari kelompok kelahiran8 pada tahun ",,#

menjadi "0! negara 7/! dari kelompok kelahiran8 pada tahun !"! 7)C%ean et al.(

!"a8.

<irus ru$ella masuk ke dalam sel inang melalui proses endositosis setelah terjadi

proses penempelan glikoprotein viral pada reseptor yang terdapat pada permukaan sel.

Selu$ung viral kemudian $er:usi dengan mem$ran endosoma dan terjadi pelepasan

selu$ung viral( yang disertai dengan masuknya genom viral ke dalam sitoplasma sel

inang. Setelah genom viral $ereplikasi( terjadi proses transkripsi dan translasi hingga

ter$entuk protein viral di dalam sitoplasma. <irion kemudian keluar dari dalam sel

inang melalui proses budding pada mem$ran sel inang setelah terjadi perakitan

nukleokapsid 7?adji( !"!8.

=am$ar "." Struktur <virus ?r u$ella 7*adek Darmadi( !!18



Penyakit yang dise$a$kan oleh virus ?r u$ella dikenal dengan istilah Campak

Jerman. Penyakit ini terdistri$usi luas dan sering tim$ul pada musim dingin atau musim

semi. =ejala utamanya yang terjadi aki$at virus ini adalah adanya peradangan kelenjar

getah $ening yang terjadi -61 hari se$elum tim$ulnya ruam 72';( !!18.

&n:eksi klinis ru$ella $iasanya ringan( ditandai dengan gejala umum seperti ruam

makulopapular 7ruam yang ditandai dengan( area merah datar pada kulit yang ditutupi

dengan $enjolan kon:luen keCil8( lim:adenopati( dan demam. &n:eksi su$klinis dapat

menCapai hingga -!. =ejala tidak spesi:ik( ru$ella sering salah didiagnosa se$agai

in:eksi ruam lain seperti Campak 7measles8( demam $erdarah( parvovirus( adenovirus(

enteroviruses atau virus herpes virus pada manusia 7BaydaCk > 5ns( !"-8.

<irus ru$ella masuk ke dalam sel inang melalui proses endositosis setelah proses

penempelan glikoprotein viral pada reseptor yang terdapat pada permukaan sel.

Selu$ung viral kemudian $er:usi dengan mem$ran endosome dan terjadi pelepasan

selu$ung viral dimana kapsid dan genom viral masuk ke dalam sitoplasma sel inang.

Setelah replikasi genom viral( terjadi proses transkripsi menjadi m?+A dan translasi

protein viral yang terjadi di dalam sitoplasma. <irion kemudian keluar dari dalam sel

melalui proses budding dari mem$ran sel inang setelah perakitan nukleokapsid 7?adji(

!"!8.

Penyakit ru$ella dapat menular melalui perCikan Cairan tu$uh &droplet' atau

melalui kontak langsung dengan Cairan naso:aring atau urin. Penularan lain dapat terjadimelalui aliran darah dari i$u kepada janin 7?adji( !"!8. >aCat $awaan 7congenital

de(ect 8 yang paling sering dijumpai aki$at virus ru$ella adalah gangguan pendengaran

sensoneural ( katarak pada mata( gangguan kardiovaskular( dan keter$elakangan mental

7*adek Darmadi( !!18.

)enurut Su$rata 7!"08( $e$erapa :aktor yang mendukung terjadinya penyakit

ru$ella adalah umur( status imunisasi( riwayat kontak dengan penderita ru$ella( dan gi9i.

3ujuan dilakukannya pengawasan ru$ella dan program eliminasi adalah untuk

pengurangan atau penghapusan congenital rubella sindrom 7>?S8 yang terjadi pada

,! dari $ayi yang i$unya terin:eksi ru$ella pada trimester pertama 7A$ernathy et al.(

!"08.

Penyakit ru$ella pada umumnya memiliki masa inku$asi selama "/6" hari( akan

tetapi dapat juga selama$erkisar "60 hari sesuai dengan kondisi keke$alan tu$uh

inangnya 7Sari et al.! !"/8. Fase predromal pada anak sangat jarang terjadi dan

$iasanya hanya dapat dideteksi dari ruam yang munCul( sedangkan pada remaja dan

orang dewasa $iasanya terjadi satu hinggasampai lima hari :ase predromal dengan



demam ringan( kelesuan( lim:adenopati( dan gejala perna:asan atas se$elum mengawali

ruam. Fase ruam dimulai dengan munCulnya ruam dari wajah dan dalam /61 jam

menye$ar ke seluruh tu$uh dalam kisaran waktu hari. &n:eksi pada orang dewasa

sering diikuti dengan arthralgia atau arthritis yang $ersi:at sementara( terutama pada

wanita dewasa. *omplikasi seperti kekurangan trom$osit 7t%rombocytopenic purpura8

dan radang otak 7encep%alitis8 masih jarang terjadi( tapi dapat munCul 7BaydaCk >

5ns( !"-8. Fase konvalesensi ditandai dengan $erkurangnya adalah :ase dimana erupsi

ruam $erkurang yang meninggalkan $ekas yang $erwarna le$ih tua 7hiperpigmentasi8

yang lama6kelamaan akan menghilang sendiri. Selain hiperpigmentasi pada anak

&ndonesia sering ditemukan pula kulit yang $ersisik. Selanjutnya( suhu menurun

hinggasampai menjadi normal( keCuali $ila ada komplikasi 7Fe$ri( !"8.

Penyakit ru$ella $isa menular melalui perCikan Cairan tu$uh 7droplet8 ataumelalui kontak langsung dengan Cairan naso:aring atau urin. Penularan lain dapat

melalui aliran darah dari seorang i$u kepada janin yang sedang dikandungnya 7?adji(

!"!8. >aCat $awaan 7)ongenital de(ect 8 yang paling sering dijumpai aki$at virus

ru$ella adalah gangguan pendengaran sensoneural ( katarak pada mata( gangguan

kardiovaskular( dan keter$elakangan mental 7*adek Darmadi( !!18. )enurut

Su$rata 7!"08( $e$erapa :aktor yang mendukung terjadinya penyakit ru$ella yaitu

umur( status imunisasi( riwayat kontak dengan penderita ru$ella( dan gi9i. 3ujuan

adanya pengawasan ru$ella dan program eliminasi adalah untuk pengurangan atau

penghapusan congenital rubella sindrom 7>?S8 yang terjadi pada ,! dari $ayi yang

i$unya terin:eksi ru$ella pada trimester pertama 7A$ernathy et al.( !"08.

)enurut )C%ean et al. 7!"$8( pada tahun !"" 2'; merekomendasikan

semua negara yang menyediakan dua dosis vaksin Campak dan $elum memperkenalkan

vaksin ru$ella( untuk masukkan vaksin ru$ella dalam program imunisasi nasional

mereka. )ongenital rubella syndrome 7>?S8 merupakan penyakit yang dise$a$kan oleh

in:eksi virus ru$ella ketika masa kehamilan. &n:eksi ini dapat menye$a$kan keguguran(

kematian pada $ayi yang $aru lahir( dan CaCat parah pada $ayi yang dilahirkan.

=angguan pendengaran merupakan kasus CaCat yang paling sering terjadi 7)C%ean et

al.( !"$8. &ndonesia merupakan salah satu negara yang terga$ung dalam 2'; dan

merupakan salah satu negara dengan kasus >?S dan ru$ella yang meningkat setiap

tahunnya. Pendataan kasus ru$ella seCara rutin diperlukan se$agai dasar pem$erian

vaksin ru$ella dalam program imunisasi nasional se$agai upaya penCegahan penyakit



yang dise$a$kan oleh virus ru$ella di &ndonesia.DISIM#AN DULU UNTUK

#EMBAHASAN DI LA#ORAN

?eaksi humoral dan imunitas $erkem$ang mengikuti adanya in:eksi ru$ella

72';( !!18. Anti$odi yang $erhu$ungan dengan ru$ella adalah anti$odi &g) dan

&g=. Anti$odi &g) spesi:ik dapat dideteksi pada "! hari setelah terjadinya in:eksi

7Ag$ede( !""8. Anti$odi $erupa &g=( &gA( &gD( dan &g5 $aru akan munCul pada

minggu ke60 setelah terjadinya in:eksi oleh virus ru$ella. )enurut ;lajide et al. 7!"/8(

anti$odi &g) setelah dua $ulan akan $erkurang dan tidak terdeteksi lagi( sedangkan

anti$odi &g= akan tetap $ertahan. >airan tu$uh dari pasien yang dapat digunakan

se$agai sampel untuk menguji ke$eradaan virus ru$ella dalam tu$uh seseorang(

diantaranya darah( urin( ulasan tenggorok( serta Cairan cerebrospinal 7Figueredo( !"8.

&n:eksi klinis ru$ella $iasanya ringan( ditandai dengan gejala umum seperti ruammakulopapular 7ruam yang ditandai dengan area merah datar pada kulit yang ditutupi

dengan $enjolan kon:luen keCil8( lim:adenopati( dan demam. &n:eksi su$klinis dapat

menCapai hingga -!. =ejala klinisnya tidak spesi:ik sehingga sering salah didiagnosis

se$agai in:eksi ruam lain( seperti Campak &measles'( demam $erdarah( parvovirus(

adenovirus( enterovirus( atau herpes pada manusia 7BaydaCk > 5ns( !"-8.

)enurut pendapat )C%ean et al. 7!"a8( diagnosis klinis ru$ella saja tidak

dapat diandalkan karena gejala klinis in:eksi virus ru$ella yang tidak spesi:ik mirip

dengan gejala in:eksi virus Campak 7measles8( oleh karena itu( mendorong

diperlukannyakasus harus dikon:irmasi di melalui deteksi la$oratorium. Deteksi virus

dan pengujian serologis dapat digunakan untuk mengkon:irmasi in:eksi ru$ella akut

atau in:eksi ru$ella $aru. Deteksi virus ru$ella dapat dilakukan mengunakan $e$erapa

Cara( misalnya isolasi virus menggunakan teknik kultur sel( deteksi asam nukleat

menggunakan teknik polymerase c%ain reaction 7P>?8( dan uji serologi 7 serological

test 8 untuk mendeteksi adanya reaksi hemaglutinasi dan antigen6anti$odi.

&solasi virus ru$ella dapat dilakukan dengan Cara menanamkan virus pada sel

<ero menggunakan teknik kultur sel. Sel <ero yang digunakan adalah yaitu sel A(rican

green monkey kidney 7A=)*8 atau dengan ?*6"0. <irus ru$ella yang telah ditu$uhkan

dalam sel <ero dapat dilihat dengan adanya )ytop%atic e((ects 7>P58 7*adek

Darmadi( !!18. Sementara itu( P>? merupakan teknik penggandaan molekul D+A

seCara en9imatis melalui mekanisme peru$ahan suhu. 3eknik ini umumnya digunakan

untuk mendeteksi virus ?+A. 3eknik Re"erse transcriptase P>? 7?36P>?8 memiliki



sensitivitas hingga 1"!! untuk menemukan ?+A ru$ella dalam Cairan 73erry et al.(

",,!8.

)enurut 3erry et al. 7",,!8( *olymerase )%ain Reaction 7P>?8 merupakan

teknik penggandaan molekul D+A seCara en9imatis melalui mekanisme peru$ahan

suhu. 3eknik ini umumnya digunakan untuk mendeteksi virus ?+A. Re"erse

transcriptase P>? 7?36P>?8 memiliki sensitivitas hingga 1"!! untuk menemukan

?+A ru$ella dalam Cairan. Sedangkan( loop isot%ermal mediated ampli(ication

7%A)P8( merupakan metode untuk menguatkan sekuens asam nukleat spesi:ik

menggunakan /6# set primer yang unik. Ampli:ikasi dapat dideteksi dari pengendapan

magnesium piro:os:at atau dengan :luoresensi di $awah sinar ultraviolet. )enurut

<inCent et al. 7!!/8( reaksi yang dilakukan dengan waktu "-#! menit pada temparatur

konstan 7#! 6 #-G>8 akan menghasilkan produk amp:li:ikasi menCapai "!,6"!"! kali.

Uji serologi 7erologic test 8 yang dapat digunakan untuk mendeteksi adanya

virus ru$ella( di antaranya adalah menggunakan metode hemaglutinasi 7'A8( metode

in%ibitory hemaglutinasi 7'&8( dan metode enzyme linked-immunosorbent assay

75%&SA8. <irus ru$ella pada metode hemaglutinasi 7'A8 memiliki se$uah hemaglutinin

yang $erkaitan dengan pem$ungkus virus dan dapat $ereaksi dengan sel darah merah

anak ayam yang $aru lahir( kam$ing( dan $urung merpati pada suhu /!> dan -!>(

$ukan pada suhu 01

!

> 7*adek Darmadi( !!18. Sedangkan metode in%ibitoryhemaglutinasi 7'&8( uji ham$atan aglutinasi ini digunakan untuk mendeteksi ke$eradaan

antigen yang larut. 'asil positi: $er$eda dengan uji hemaglutinasi 7'A8( yaitu hasil

akan positi: apa$ila tidak terjadi aglutinasi 7?adji( !"!8. )etode 5%&SA merupakan

teknik yang paling $anyak digunakan di antara kelompok enzyme immunoassay 75&A8

7?adji( !"!8. )etode ini merupakan suatu teknik serologi kualitati: yang pada

prinsipnya meli$atkan adanya ikatan antigen6anti$odi yang dapat mengaki$atkan

terjadinya peru$ahan intensitas warna pada larutan 7*holis( !"8. )enurut Burgess

7",,-8( warna yang ditim$ulkan oleh indikator dapat ditentukan seCara kualitati:

menggunakan mata atau dapat pula seCara kuantitati: melalui pem$aCaan nilai

a$sor$ansi atau optical density 7;D8 pada 5%&SA reader .

Antigen akan $ereaksi hanya dengan anti$odi yang khas untuk antigen terse$ut(

oleh karena spesi:itas yang tinggi( reaksi antara antigen dan anti$odi dapat digunakan

untuk mengidenti:ikasi ke$eradaan salah satu diantara antigen dan anti$odi dengan

anti$odi atau antigen pasangannya. Spesi:itas ini merupakan dasar reaksi serologis.

?eaksi silang yang mungkin terjadi antara antigen yang $erhu$ungan dapat mem$atasi



spesi:itas tes. ?eaksi antigen6anti$odi digunakan untuk mengidenti:ikasi komponen

spesi:ik dalam ga$ungan dari salah satu antigen maupun anti$odi terse$ut.

)ikroorganisme dan sel lain memiliki antigen $eragam( oleh karena itu dapat $ereaksi

dengan $anyak anti$odi yang $er$eda 7Brahmana( ","8.

Anti$odi monoklonal merupakan sarana yang sangat $aik untuk identi:ikasi

antigen karena mempunyai spesi:itas tunggal yang diketahui dan homogen. Antiserum

yang dihasilkan se$agai $agian dari respon imun mengandung kompleks Campuran

anti$odi( oleh karena antiserum $ersi:at heterogen. 'al ini mengaki$atkan antiserum

kurang $erman:aat untuk uji spesi:isitas. &munoassay merupakan salah satu teknik

imunodiagnostik yang paling $anyak digunakan. 3eknik ini didasarkan atas reaksi kimia

antara dua jenis analit 7antigen dan anti$odi8 yang dapat rnem$eri hasil $ervariasi

tergantung indikatornya 7Brahmana( ","8.DISIM#AN DULU UNTUK

#EMBAHASAN DI LA#ORAN

)etode Enzyme linked-immunosorbent assay 75%&SA8 merupakan teknik yang

paling luas yang digunakan dari kelompok enzyme immunoassay 75&A8 7?adji( !"!8.

5%&SA merupakan suatu teknik serologi seCara kualitati: yang umumnya digunakan

dalam $idang imunologi untuk mendeteksi kehadiran anti$odi atau antigen dalam suatu

sampel. Prinsipnya adalah adanya ikatan antigen6anti$odi yang akan di$aCa dengan

reaksi en9imatis yang dapat mengaki$atkan terjadinya peru$ahan intensitas warna padalarutan 7*holis( !"8. )enurut pendapat Burgess 7",,-8( warna yang ditim$ulkan oleh

indikator dapat ditentukan seCara kualitati: dengan menggunakan mata atau dapat pula

seCara kuantitati: diukur dengan pem$aCaan nilai a$sor$ansi atau optical density 7;D8

pada 5%&SA reader .

5%&SA adalah se$uah metode diagnostik Cepat dan ser$aguna yang mampu

dikom$inasikan dengan $e$erapa uji. >iri khas dari deteksi 5%&SA didasarkan atas

spesi:isitas pemilihan antigen yang ditangkap 7Hi et al.( !"/8. Ada dua Cara yang

paling umum digunakan dalam metode 5%&SA( yaitu 5%&SA seCara langsung 7direct

ELIA8 dan 5%&SA seCara tidak langsung 7indirect ELIA8. 5%&SA seCara langsung yang

$ertujuan mendeteksi ke$eradaan antigen( sedangkan 5%&SA seCara tidak langsung

7indirect ELIA8 yang dapat $ertujuan mendeteksi ke$eradaan anti$odi. Anti$odi yang

digunakan untuk melaCak suatu antigen pun harus spesi:ik sesuai dengan antigen yang

akan dideteksi 7?adji( !"!8.

)etode 5%&SA seCara langsung 7direct ELIA8 merupakan teknik 5%&SA yang

paling sederhana. 3eknik ini umumnya digunakan untuk mendeteksi dan mengukur



konsentrasi antigen pada sampel 5%&SA direct menggunakan suatu anti$odi spesi:ik

7monoklonal8 untuk mendetaksi ke$eradaan antigen yang diinginkan pada sampel yang

diuji. 3ahapan pada 5%&SA direct yang pertama adalah mikrotiter diisi dengan sampel

yang mengandung antigen( sehingga antigen menempel pada $agian dinding6dinding

lu$ang mikrotiter( mikrotiter kemudian di$ilas untuk mem$uang antigen yang tidak

menempel pada dinding mikrotiter. Anti$odi yang telah ditautkan dengan en9im signal

lalu dimasukkan ke dalam lu$ang6lu$ang mikrotiter sehingga dapat $erinteraksi dengan

antigen yang diinginkan( mikrotiter di$ilas agar anti$odi tertaut en9im sinyal yang tidak

$erinteraksi dengan antigen dapat di$uang. Su$strat yang dapat $ereaksi dengan en9im

sinyal kemudian ditam$ahkan ke dalam lu$ang mikrotiter( sehingga en9im yang tertaut

anti$odi yang $erinteraksi dengan antigen( akan $erinteraksi dengan su$strat dan

menim$ulkan sinyal yang dapat dideteksi. Pendeteksian interaksi antara anti$odi dan

antigen terse$ut selanjutnya dapat dihitung dengan kolorimetri( c%emiluminescent ( atau

(luorescent end-point 7Brahmana( ","8.

*ele$ihan dari 5%&SA direct ( diantaranya yaitu memiliki proses metodologi

yang Cepat karena hanya menggunakan " jenis anti$odi( dan kemungkinan terjadinya

kegagalan dalam uji 5%&SA aki$at reaksi silang dengan anti$odi lain 7anti$odi

sekunder8 dapat diminimalisasi. Selain kele$ihan metode direct ELIA juga memiliki

$e$erapa kelemahan( diantaranya yaitu immunoreakti:itas anti$odi kemungkinan akan $erkurang aki$at $ertaut dengan en9im( penautan en9im sinyal ke setiap anti$odi

mengha$iskan waktu dan mahal( :leksi$ilitas dalam pemilihan tautan en9im 7la$el8 dari

anti$odi pada perCo$aan yang $er$eda tidak ada( ampli:ikasi sinyal hanya sedikit( dan

larutan yang mengandung antigen yang diinginkan harus dimurnikan terle$ih dahulu

se$elum digunakan untuk uji 5%&SA direct 7Brahmana( ","8.

)etode 5%&SA seCara tidak langsung 7indirect ELIA8 pada dasarnya juga

merupakan teknik 5%&SA yang paling sederhana( hanya saja dalam teknik 5%&SA

indireCt yang dideteksi dan diukur konsentrasinya merupakan anti$odi. 5%&SA indirect

menggunakan suatu antigen spesi:ik 7monoklonal8 serta anti$odi sekunder spesi:ik

tertaut en9im sinyal untuk mendeteksi ke$eradaan anti$odi yang diinginkan pada

sampel yang diuji. Bproses ini $iasanya $erlangsung le$ih lama di$andingkan dengan

direct ELIA 7Brahmana( ","8.

3ahap umum yang digunakan dalam indirect ELIA untuk mengetahui

konsentrasi anti$odi dalam serum dimulai dengan penempelan antigen yang sudah

dikenal dan diketahui konsentrasinya pada dinding plate mikrotiter. Antigen akan



menempel pada permukaan plastik( dan sampel dari konsentrasi antigen ini akan

menetapkan kurva standar yang digunakan untuk mengalkulasi konsentrasi antigen dari

sampel yang akan diuji. %arutan pekat dari protein non-interacting ( seperti bo"ine

serum albumin 7BSA8 atau kasein kemudian ditam$ahkan dalam semua lu$ang plate

mikrotiter. 3ahap ini dikenal se$agai blocking ( karena protein serum akan mem$lok

adsorpsi dari protein non6spesi:ik lain ke plate. %u$ang plate mikrotiter atau permukaan

lain kemudian dilapisi sampel serum dari antigen yang tidak diketahui( dilarutkan dalam

$u::er yang sama dengan yang digunakan untuk antigen standar. *onsentrasi protein

total harus sama dengan antigen standar( karena imo$ilisasi antigen dalam tahap ini

terjadi aki$at adsorpsi non6spesi:ik 7Brahmana( ","8.

*late kemudian diCuCi( dan anti$odi pendeteksi spesi:ik untuk antigen yang diuji

dimasukkan dalam lu$ang. Anti$odi ini hanya akan mengikat antigen terimo$ilisasi

pada permukaan lu$ang. Anti$odi sekunder( yang akan mengikat sem$arang anti$odi

pendeteksi kemudian ditam$ahkan dalam lu$ang( :ungsinya agar $erkonjugasi menjadi

en9im dengan su$strat spesi:ik. *late kemudian diCuCi untuk mem$uang konjugat

en9im6anti$odi yang tidak terikat. Su$strat yang akan diu$ah oleh en9im kemudian

dimasukkan untuk mendapatkan sinyal kromogenik atau :luorogenik. 'asil kemudian

dikuanti:ikasi dengan ELIA reader 7Brahmana( ","8.

*erugian utama dari metode indirect ELIA adalah metode imo$ilisasiantigennya non6spesi:ik( sehingga setiap protein pada sampel akan menempel pada

lu$ang plate mikrotiter. *onsentrasi analit yang keCil dalam sampel harus $erkompetisi

dengan protein serum lain saat pengikatan pada permukaan lu$ang. 5%&SA indireCt juga

mem$utuhkan waktu pengujian le$ih lama karena mem$utuhkan kali waktu inku$asi(

yaitu pada saat terjadi interaksi antara antigen spesi:ik dengan anti$odi yang dinginkan

dan antara anti$odi yang diinginkan dengan anti$odi sekunder tertaut en9im sinyal(

sedangkan pada 5%&SA direct hanya mem$utuhkan " kali waktu inku$asi pada saat

terjadi interaksi antara antigen yang diinginkan dengan anti$odi spesi:ik tertaut en9im

sinyal 7Brahmana( ","8.

*ele$ihan dari 5%&SA indirect menurut Brahmana 7","8( antara lain memiliki

$anyak variasi anti$odi sekunder yang dijual seCara komersial immunoreakti:itas

anti$odi yang diinginkan 7target8 tidak terpengaruh oleh penautan en9im sinyal ke

anti$odi sekunder( karena penautan dilakukan pada tempat $er$eda dan tingkat

sensitivitas meningkat karena setiap anti$odi yang diinginkan memiliki $e$erapa epitop

yang $isa $erinteraksi dengan anti$odi sekunder. Berdasarkan in:ormasi yang telah



didapat( maka metode 5%&SA merupakan salah satu uji serologi yang paling e:ekti:

untuk mendeteksi virus ru$ella( karena menggunakan waktu yang le$ih e:isien dan

indirect ELIA merupakan metode 5%&SA yang le$ih e:ekti: ! karena memiliki

kekurangan yang le$ih sedikit di$andingkan menggunakan metode direct ELIA. ;leh

se$a$ itu( dilakukan pengujian menggunakan metode 5%&SA Indirect terhadap /-

sampel serum yang diperoleh dari kasus ru$ella dari "1 provinsi di &ndonesia pada $ulan

Fe$ruari !"#. DISIM#AN DULU UNTUK #EMBAHASAN DI LA#ORAN

Anti$odi yang $erhu$ungan dengan ru$ella adalah anti$odi &g) dan &g=.

Anti$odi &g) spesi:ik dapat dideteksi pada "! hari setelah terjadinya in:eksi. Sementara

itu( anti$odi &g=( &gA( &gD( dan &g5 $aru akan munCul pada minggu ke60 setelah

terjadinya in:eksi oleh virus ru$ella 7Ag$ede( !""8. Anti$odi &g) setelah dua $ulan

akan $erkurang dan tidak terdeteksi lagi( sedangkan anti$odi &g= akan tetap $ertahan

7;lajide et al.( !"/8. >airan tu$uh dari pasien yang dapat digunakan se$agai sampel

untuk menguji ke$eradaan virus ru$ella dalam tu$uh seseorang antara lain darah( urin(

ulasan tenggorok( serta Cairan cerebrospinal 7Figueredo( !"8.

1+ Tu/uan

3ujuan dilaksanakannya praktik kerja lapangan 7P*%8 ini adalah se$agai $erikutE

". )mendeteksi anti$odi &g) dalam serum pada pasien dengan demam dan ruam dari

kasus ru$ella pada $ulan Januari !"#.

. )mengon:irmasi kasus ru$ella dari "1 Pprovinsi di &ndonesia pada $ulan Januari

!"#.

1+ Manaa,

)an:aat yang dapat di perolehCapai dari pelaksanaan praktik kerja lapangan

7P*%8 ini adalah se$agai $erikut.E

1. Bagi mahasiswa

)ahasiswa )memperoleh pengalaman kerja( terampil menggunakan peralatan(

la$oratorium( khususnya dalamdapat melakukan uji serologi( serta memperoleh

in:ormasi mengenai kondisi penye$aran penyakit ru$ella terkini di &ndonesia . Selain itu(

mahasiswa juga dapat memperoleh inspirasi dan( serta se$agai sum$er re:erensi untuk

penelitian tugas akhir .

. Bagi pemerintah

Diperoleh Se$agai rujukan in:ormasi dan re:erensi $agi pemerintah dalam

upaya pengam$ilan ke$ijakan mengenai pem$erian vaksin ru$ella dalam program

imunisasi rutin nasional.



II+ MATERI DAN ARA KERJA

+1 a.,u #e-a.sanaan #ra.,2. Ker/a La3angan

Praktik kerja lapangan 7P*%8 ini dilaksanakan selama "# hari kerja( sejak

tanggal - Januari !"# hingga "# Fe$ruari !"#.

+ Te43a, #e-a.sanaan #ra.,2. Ker/a La3angan

%okasi P*% adalah raktik *erja %apangan ini dilakukan di %a$oratorium

<irologi( %a$oratorium Penelitian Penyakit &n:eksi Pro:. Dr. Sri ;emijati( Pusat

Biomedis dan 3eknologi Dasar *esehatan Badan Penelitian dan Pengem$angan*esehatan( Jakarta.

+ Ma,er2

Alat yang digunakan untuk uji 5%&SA virus ?r u$ella adalah 5%&SA +as%er (

5%&SA reader ( inku$ator( s%aker ( mikropipet 7! Il "!! Il "!!! Il8( ta$ung nunc

7nunc tube' "( ml( blue tip! yello+ tip( ,-c%anneled pipette! pipette "! ml( gun pipetor (

la$u erlenmeyer "!!! ml( mikrotiter tube( wadah mikrotiter( $asin( timer ( glo"es(



masker ( tissue( re"co( (reezer ( rak mikropipet( kotak sampel( rak ta$ung nunc! sprayer!

tempat sampah( tras%bag bio%azard ( komputer( dan printer .

Bahan yang digunakan untuk uji 5%&SA virus ?r u$ella adalah /- sampel serum

pasien dari "1 provinsi di &ndonesia alkohol 1- akuatrides dan *k it 5%&SA dengan

nomor %ot. //-!( meliputi 5n9ygnost Anti6?u$ella <irus&g) 7 Enzygnost Anti-

Rubella irus/Ig0 test plate( Anti-$uman Ig0/*OD )onu1ugate( )on1ugate 2u((er

0icrobiol ( Anti-Rubella Re(erence PP( Anti-Rubella Re(erence P+( sample 2bu((er

P;D( dan ?F Absorbent 8( dan upplementary Reagents (or 5n9ygnost3)B

7#as%P;D( 2lue )olor ( ubstrate3)B( )%romogen/ 3)B( top( dan Empty ial

)%rom S;%8.

+" Me,5de

>ara kerja yang digunakan dalam pengujian sampel kasus ru$ella pada P*% ini

mengikutimenggunakan metode indirect ELIA( yang terdiri atasdari $e$erapa tahapan

se$agai $erikut.E

1. Ta6a3 #3re3aras2 Ssa43e-

a. Data sampel $erupa serum diCatat dalam log book sesuai dengan nomor

la$oratorium.

$. 3ube volume "( ml disiapkan sesuai dengan jumlah yang di$utuhkan( lalu

di $eritempel dengan la$el yang $ertuliskan nomor la$oratorium.C. Sampel $erupa serum dipindahkan ke dalam tube yang telah di$eri nomor

la$oratorium menggunakan mikropipet.

d. Sampel kemudian langsung diuji atau dapat disimpan dalam (reezer atau

re"co.

2. Ta6a3 #3e47ua,an L-aru,an Wwasher

a. %arutan #as% P;D diCampur dengan akuatrides dengan per$andingan " E ",

dalam la$u erlenmeyer "!!! ml menggunakan pipette "! ml.

$. %arutan yang telah dihomogenkan dimasukkan ke dalam $otol 5%&SA +as%er

dan ditempatkan sesuai dengan posisinya.

3. #engu/2an sa43e- seru4 4engguna.an 4e,5de indirect ELISA

a. Dipersiapkan Persiapan alat( sampel serum yang akan diuji( dan mikrotiter

tube yang terdiri atasdari ,# mikrotiter 7 $aris( " kolom8.

$. %arutan 5n9ygnost " ml diCampurkan dengan blue color solution "!-! μl

pada $asin. Se$anyak !! μl larutan blue color kemudian dimasukkan pada

masing6masing mikrotiter sesuai dengan jumlah strip yang akan digunakan



7misalnya strip8 7Per$andingan larutan blue color dengan larutan 5n9ygnost

adalah "E!8.

C. %arutan RF absorbant !! μl dengan per$andingan "E" dimasukkan ke dalam

masing6masing lu$ang mikrotiter yang masih kosong 7dimulai dari kolom ke61

sampai dengan kolom ke6" dan dari $aris ke6" sampai dengan

menggunakan ,-c%anneled pipette !! μl8. Dua lu$ang pada $aris pertama

dari kolom nomor 1 dan satu lu$ang pada $aris terakhir dari kolom nomor "

dikosongkan.

d. Sampel $erupa serum dimasukkan ke dalam mikrotiter yang telah $erisi

larutan pengenCer blue color 7pada kolom ke6" sampai dengan kolom ke6# dan

$aris ke6" sampai dengan menggunakan ,-c%anneled pipette !! μl8

se$anyak ! μl sesuai dengan template yang di$uat.

e. Sampel yang telah dihomogenkan dengan larutan pengenCer kemudian

dipindahkan pada mikrotiter 7kolom ke61 sampai dengan " dan dari $aris ke6

" sampai dengan menggunakan ,-c%anneled pipette !! μl8 yang $erisi ?F

absorbent se$anyak !! μl.

:. Untuk mikrotiter k* olom 1 $aris " dan kolom " $aris diisi dengan reagen

re:er PP( sedangkan pada kolom 1 $aris diisi dengan dengan regen re:er

P+.

g. Sampel yang telah dihomogenkan dan telah di$eri ?F absorbent kemudian

diinku$asi selama "- menit pada suhu ruang.h. Setelah diinku$asi( larutan kemudian dipindahkan ke dalam 5nygnost Anti6

?u$ella <irus&g) test plate atau +ell plate se$anyak "-! μl pada masing6

masing sumuran menggunakan ,-c%anneled pipette 7pemindahan larutan

dimulai dari kolom kontrol dan kemudian kolom uji pada setiap strip8. %arutan

sampel kemudian diiku$asi kem$ali selama " jam pada suhu 01o>.

i. Setelah proses inku$asi kemudian dilakukan penCuCian +ell plate 7+as%ing 8

se$anyak /K menggunakan ELIA +as%er .

j. #ell plate yang akan diCuCi diletakkan pada tempat +as%er ( kemudian tekantom$ol P?&)5 ditekan dan di $iarkan hinggasampai lampu mati. 3ekan

t3om$ol angka ditekan sesuai dengan jumlah strip +ell plate yang $erisi

sampel uji( kemudian tekan tom$ol S3A?3 ditekan.

k. Se$anyak "(- ml larutan microbiol dan -! μl larutan con1ugate

diCampurkan dalam $asin( dan dimasukkan se$anyak "!! μl pada masing6

masing sumuran yang telah melalui proses penCuCian se$elumnya

7Pper$andingan con1ugate dengan microbiol adalah "E!8.

l. Dilakukan proses inku$asi kem$ali selama " jam pada suhu 01!

>.



m. Setelah diinku$asi dilakukan proses penCuCian +ell plate &+as%ing 8 se$anyak

/K sesuai dengan prosedur +as%ing yang telah dilakukan se$elumnya.

n. Se$anyak "!! μl larutan c%romogen 3)B kemudian diCampur dengan "! ml

su$strat 3)B pada $asin. %arutan 3)B "!! μl kemudian dimasukkan ke

dalam plate yang telah melalui proses +as%ing dan diinku$asi gelap selama 0!

menit pada suhu ruang.

o. Setelah proses inku$asi kemudian se$anyak "!! μl larutan stop ditam$ahkan

ke dalam plate.

p. Setelah penam$ahan larutan stop kemudian dilakukan pem$aCaan plate

menggunakan alat 5%&SA reader dengan panjang gelom$ang /-! nm dan

panjang gelom$ang re:erensi #0! nm.

L. *late kemudian dimasukkan ke dalam 5%&SA reader yang telah dinyalakan

selama "- menit dan dihu$ungkan dengan komputer dan printer.r. +ilai Oo ptical density 7;D8 pada plate kemudian diukur menggunakan ELIA

reader. 'asilnya kemudian di e4port ke dalam 0s.e4cel dan diCetak.



III+ RENANA KERJA HARIAN

Judul E Deteksi kasus ru$ella dengan uji serologi menggunakan

metode enzyme-linked immunosorbent assay 75%&SA8

%okasi E %a$oratorium Penelitian Penyakit &n:eksi Pro:. D?. Sri

;emijati( Badan Penelitian dan Pengem$angan *esehatan(

Jakarta.

2aktu E - Januari s.d. "# Fe$ruari !"#

Pem$im$ing P*% E Drs. Agus 'ery Susanto( ).S.

Pem$im$ing %apangan E dr. )ursinah Sp. )*

Su$angkit( ). Biomed.

Ta7e- +1 #r535sa- Keg2a,an Har2an #ra.,2. Ker/a La3angan

N5 Har28Tangga- Ke,erangan Tanda Tangan

" Senin( - Januari !"#

3raining Biosa:ety dan BioseCurity

Pem$agian topik P*%( pem$im$inglapangan( dan pengenalan la$oratorium

Pengamatan metode 5%&SA untuk menguji

serum

)elakukan pooling in%ouse untuk serum

ru$ella tahun !"

Selasa( # Januari !"#

)elakukan pooling in%ouse untuk serum

ru$ella tahun !!,

Filtrasi hasil pooling in%ouse untuk serum

ru$ella tahun !!, dan !"

Pendataan hasil )ase 2ased 0easles

ur"eillance 7>B)S8 untuk kasus Campak

dan ru$ella tahun !"-

0 ?a$u( 1 Januari !"-

Pendataan hasil )ase 2ased 0easles


dan ru$ella tahun !"- dan !"#

/ *amis( Januari !"# Pendataan hasil )ase 2ased 0easles


dan ru$ella tahun !"#



)endeteksi serum ru$ella menggunakan

metode 5%&SA

Pem$uatan medium ))

)elakukan aliLuot hasil pooling dan :iltrasi

serum ru$ella

- Jumat( , Januari !"# )elakukan pemetaan ?5<>;

# Senin( " Fe$ruari !"#

)endeteksi serum ru$ella menggunakan

metode 5%&SA


serum Campak

)elakukan pem$uatan anti$odi uji'emaglutinasi &nhi$isi 7'&8 dengan ?D5

1 Selasa( Fe$ruari !"#

Pem$ekalan materi mengenai 5uality

assurance

Pem$ekalan materi mengenai 5uality

impro"ement

Pem$ekalan materi mengenai 5%&SA

S&5)5+S


serum Campak dan ru$ella

?a$u( 0 Fe$ruari !"#

%atihan teknik presentasi


serum ru$ella

, *amis( / Fe$ruari !"#

)elakukan uji 'emaglutinasi 7'A8 dan

'emaglutinasi &nhi$isi 7'&8 untuk 0# sampel

serum '-+"

)elakukan uji 'emaglutinasi 7'A8 untuk !

sampel In(luenza Like Illness 7&%&8


serum ru$ella

"! Jumat( - Fe$ruari !"# )elakukan pemetaan ?5<>;

"" Selasa( , Fe$ruari !"#)endeteksi serum Campak menggunakan

metode 5%&SA

" ?a$u( "! Fe$ruari !"# )elakukan uji 'emaglutinasi 7'A8 untuk -"

sampel In(luenza Like Illness 7&%&8



)elakukan deteksi Campak dari sampel urin

"0 *amis( "" Fe$ruari !"#)endeteksi serum Campak dan ru$ella

menggunakan metode 5%&SA

"/ Jumat( " Fe$ruari !"#%atihan teknik presentasi dengan

pem$im$ing lapangan

"- Senin( "- Fe$ruari !"# Presentasi hasil praktik kerja lapangan

"# Selasa( "# Fe$ruari !"#

*ro(iciency 3est dari 2'; untuk kasus

>ampak dan ?u$ella

?egistrasi $iaya praktik kerja lapangan

DA'TAR RE'ERENSI

A$ernathy 5( > )in6hsin( B Jayati( S Susmita( * 5wen( M Hi( B 2illiam dan & Joseph.

!"0. Analysis o: 2hole =enome SeLuenCes o: "# Strains ;: ?u$ella <irus

:rom 3he United States( ",#"!!,. irology 1ournal . 10(1) 33E0.

Ag$ede ;;( Adeyemi ;;( A2; ;latinwo( 3J Salisu( dan ;) *olawole. !"". Sero6

PrevalenCe o: Antenatal ?u$ella in U&3'. 3%e Open *ublic $ealt% 6ournal . "(1)

33E"!"#.



BaydaCk ?( dan > 5ns. !"-. ?eE ?u$ella and >ongenital ?u$ella Syndrome&n:eCtion

?eporting and >ase &nvestigation. 0anitoba )ommunicable Disease )ontrol

2ranc%( 1(1) 33E""".

Brahmana *. ",". &mmunologi( Serologi dan 3ata *erja %a$oratorium. )edan.

Burgess =2. ",,-. *rinsip Dasar ELIA dan ariasi 7on(igurasinya! 3eknologi ELIA

dalam Diagnosis dan *enelitian. =.2. Burgess 75d.8 2ayan 3 Ariana

7terjemahan8. 4ogyakartaE =adjah )ada University Press. 33E -!#.

>ong '( J 4ue( dan Po 3. !"". &denti:iCation o: the )yelin ;ligodendroCyte

=lyCoprotein as a >ellular ?eCeptor :or ?u$ella <irus. 6ournal o( irology. !9

(1) 33E""!0""!/1.

Fe$ri ??. !". Faktor6Faktor yang Berhu$ungan dengan Pem$erian &munisasi >ampak

pada Batita di 2ilayah *erja Puskesmas %areh Sago 'ala$an *a$upaten -!

*ota 3ahun !". kripsi. )edanE Universitas Sumatera Utara.

Figueredo >A( )& ;liveira( SP >urti( A:onso( A)S Frugis( %A% Araujo( DB ;liveira(

dan 5% Durigon. !". 5pidemiologiCal and )oleCular >haraCteri9ation o:

?u$ella <irus &solated in SaNo Paulo( Bra9il during ",,1!!/. 6ournal o(

0edical irology. !"(1) 33E"0""0.

*adek dan S Darmadi. !!1. =ejala ?u$ela Bawaan 7*ongenital8 $erdasarkan

Pemeriksaan Serologis dan ?+A <irus. Indonesian 6ournal o( )linical

*at%ology and 0edical Laboratory( 1() 33E#01".

*holis 5. !". 3eknik Analisa Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. SemarangE%a$.Biologi F)&PA U++5S.

)C%ean '( S ?edd( 5 A$ernathy( J &Cenogle( dan = 2allaCe. !"a. >hapter "/E

?u$ella. *D ur"eillance 0anual 8t% Edition( 1"(1) ppE""".

)C%ean '( S ?edd( 5 A$ernathy( J &Cenogle( dan = 2allaCe. !"$. >hapter "-E

>ongenital ?u$ella Syndrome. *D ur"eillance 0anual 8t% Edition( 19(1) 33E

"1.

;lajide ;( ) Aminu( JA ?andawa( dan DS Adejo. !"/. Sero PrevalenCe o: &g)

anti$ody to ?u$ella <irus in pregnant women in Maria( +igeria. Arc%i"e o(

0edical 2iomed . 1(") 33E","0.

Hi J( J 'an( = +iu( M %iu( O 2ang( dan 4 %iu. !"/. 3he Development o: 5%&SA *it

deteCting >ikungunya <irus used SynthetiC Polypeptide( 6ournal o( Applied

irology. () 33E0"60.

?adji )aksum. !"!. Imunologi irologi. JakartaE P3 &SF&.

Sari 2P( )) 'apsari( dan P 'adi. !"/. 'u$ungan A$normalitas 'asil >36SCan

dengan Developmental Delayed pada Pasien Suspek &n:eksi >ytomegalovirus

*ongenital. *ublic $ealt% and *re"enti"e 0edicine Arc%i"e. (") 33E"".



Su$rata &*( ASS Anak( dan +2 Dewa. !"0. ?iwayat *ontak Dan Umur Se$agai

Determinan *ejadian ?u$ela Pada Anak Di *a$upaten Badung 3ahun !".

*ublic $ealt% and *re"enti"e 0edicine Arc%i"e. 1(1) 33E".

3erry( %inda 'o.( 3erry( =eorge ). dan %ondes$orough( Philip. ",,!. Diagnosis o: Foetal ?u$ella <irus &n:eCtion $y Polymerase >hain. 6ournal o( 9eneral

irology. :1(1) 33E"#!16"#"".

<inCent( ).( Ou( 4. and *ong( '. !!/. 'eliCase6Dependent &sothermal D+A

Ampli:iCation. E02O Reproduction. 9(1) 33E 1,-!!.

2';. !!1. )anual :or the %a$oratory Diagnosis o: )easles and ?u$ella <irus

&n:eCtion. 6ournal. "(::) 33E"/1.

Proposal PKL Bagus Hendrawan B1J013184 edit ahs 10042016.doc

Documents

Transcript of Proposal PKL Bagus Hendrawan B1J013184 edit ahs 10042016.doc