Malaria adalah penyakit menular yang merusak yang disebabkan oleh parasit protozoa Plasmodium.

Empat spesies Plasmodium diketahui menginfeksi manusia: P. vivax, P. malariae, P. ovale, dan P. falciparum,

yang terakhir merupakan yang paling mematikan

penyakit ini masih tersebar luas di Afrika, Amerika Tengah dan Selatan, dan Asia Tenggara.

Malaria terus mempengaruhi 200-500 juta orang dan menyebabkan 1-2 juta orang diantaranya meninggal dunia tiap tahun.

Akibatnya, malaria telah menghasilkan kehancuran beban sosial dan ekonomi di negara yang paling terkena dampak.

Pengembangan senyawa antimalaria terus menjadi fokus utama dari banyak laboratorium

berbagai senyawa telah dieksplorasi untuk pengobatan penyakit ini

Beberapa penemuan senyawa antimalaria : quinine (1), merupakan senyawa antimalaria

yang telah diakui sejak tahun 1600. quinacrine (2), merupakan agen sintetis

pertama antimalaria. Quinacrine dilengkapi dengan klorokuin (3), dengan berbagai variasi substtisi lainnya termasuk mefloquine (4)

Klorokuin terbukti sangat efektif terhadap semua empat jenis Plasmodium yang menginfeksi manusia dan produksinya yang murah dengan cepat menjadi pengobatan standar untuk malaria.

Sayangnya, selama beberapa dekade ini telah menghasilkan perkembangan strain resisten terhadap klorokuin dari Plasmodium, khususnya P. falciparum.

8 quinolines diganti, termasuk mefloquine (4), telah berkhasiat terhadap resisten klorokuin P. falciparum -(CRPF), tetapi obat ini juga terkait dengan berbagai efek samping neuropsikiatri.

Dalam konteks menjelajahi perancah 9-aminoacridine dari kuinakrin (3) untuk menargetkan penyebaran prion , kami menjadi tertarik untuk mengevaluasi kembali kelas molekul ini untuk aktivitas anti-malaria, terutama terhadap CRPF. Di sini kami melaporkan strategi sintetis paralel untuk menghasilkan perpustakaan 9-aminoacridines berdasarkan struktur umum kuinakrin, bersama dengan hasil skrining in vitro berbasis sel terhadap sensitifitas obat dan resistansi obat P. falciparum.

turunan dari asam salisilat tersubstitusi Chemset 5 dipasangkan anilin chemset 6 untuk menghasilkan 9-chloroacridine chemset7,

Untuk pendekatan amina Sidechain, 1,3-diaminopropane (8) adalah fungsi ganda untuk menghasilkan sebuah perpustakaan building blok diamina chemset 9. Akhirnya, kopling paralel dari 9-chloroacridines dengan diamina dilakukan untuk menghasilkan 9-aminoacridine yang diinginkan chemset 10.

Fitur penting dari strategi ini adalah bahwa hal itu memungkinkan akses cepat ke berbagai trisiklik heterosiklik acridine dan amina Sidechain, yang akan memungkinkan pemeriksaan kooperatititas dari fitur struktural keduanya.

Sintesis heterocycles 9-chloroacridine diilustrasikan dalam Skema 1.

asam salisilat CHEMSET (5) dimetilasi dan kemudian diaktifkan untuk kopling silang sebagai aril triflat yang sesuai CHEMSET (11), biasanya dalam pendekatan kuantitatif menghasilkan senyawa yang memberikan kemurnian tinggi.

Spesies ini telah digabungkan/dipasangkan anilin tersubstitusi CHEMSET 6 untuk menghasilkan diarylamine CHEMSET 12

Kemudian, hidrolisis kelompok/gugus metil ester dilakukan menggunakan kondisi non-air dirancang untuk sintesis paralel, 27 diikuti oleh siklisasi Friedel-Crafts dengan POCl 3 untuk menghasilkan 9-chloroacridine CHEMSET (7)

Produk 9-chloroacridine (7) diisolasi dengan hasil yang diterima dan kemurnian >95% setelah pemurnian flash kolom otomatis menggunakan sistem CombiFlash (ISCO).

- Suatu larutan asam salisilat tersubstitusi 5 (11,7 mmol) dalam DMF (100 ml)

- diperlakukan dengan Cs2CO3 (0,5 equiv) dan iodomethane(1,05 equiv.)

- larutan Diaduk selama 1,5 jam, diambil di/dalam Et2O/EtOAc (2:1) ( 100 ml),

- dicuci dengan H2O (50 ml), NaHCO3 (10% aq, 50 ml), dan NaCl (aq satd/larutan garam) (25 ml).

- Lapisan produk organik - dikeringkan selama/over MgSO4 dan

terkonsentrasi/concertated pada kondisi vakum untuk menghasilkan metil ester dalam kemurnian yang sangat baik (hasil 80-100 %).

- Metil ester (5,5 mmol)- dilarutkan dalam CH2Cl2 (50 ml)- didinginkan sampai 78 C dan diaduk dibawah argon.- treatment dengan Et3N (2 equiv) diikuti dengan penambahan

tetes anhidrida trifluorometanasulfonat (1.1 equiv). - Campuran diaduk pada 78 C selama 30 menit dan kemudian

dipanaskan- setelah KLT menunjukkan konversi kuantitatif- larutan diambil oleh/in Et2O (100 ml) dan dicuci dengan HCl (1 M

aq) (25 ml). - Lapisan air diekstraksi kembali dengan tambahan Et2O (25 ml)

dan lapisan produk gabungan organik dicuci dengan NaCl (satd ae) (25 ml)

- dikeringkan atas/over MgSO4 dan terkonsentrasi/concentrated (dipekatkan) di bawah vakum untuk menghasilkan salisilat triflat CHEMSET ( 11) dalam kemurnian yang sangat baik (100% hasil 95)

- Radleys 12-place carrousel- sarat dengan larutan salisilat triflat chemset 11 (0,728

mmol) dalam toluena (7 ml). - masing-masing kemudian ditreat dengan anilin (6) (1.2

equiv), Cs2CO3 (1,4 equiv), rac-2 ,2’-bis (diphenylphosphino) - 1.1’ - binaphthalene (BINAP) (0,08 equiv), diikuti oleh Pd (OAc)2 (equiv 0,05.)

- carrousel itu dipanaskan pada 120 C selama 16 jam,- setelah TLC reaksi campuran biasanya menunjukkan

konversi lengkap untuk produk diarylamine (12).- Produk terkonsentrasi/dipekatkan di vakum menggunakan

sistem penguapan paralel Genevac HT - 4, dan kemudian digunakan secara langsung pada tahap berikutnya tanpa pemurnian atau evaluasi/work up.

- diarylamines kasar (12) (ca. 0,728 mmol),- dimuat/loaded ke vessel/bejana dari 12-tempat Radley

carrousel (radleys 12-place carrousel), yang dilarutkan kembali dalam metanol (7 ml) dan ditreat dengan barium hidroksida octahydrate (1,5 equiv).

- carrousel dipanaskan sampai 90 C semalaman,- setelah yang KLT ditunjukkan hidrolisis ester yang

lengkap. - jenis asam karboksilat kasar dipekatkan dalam ruang

vakum menggunakan Systems Penguapan Paralel Genevac dan digunakan secara langsung pada langkah berikutnya tanpa pemurnian atau pemeriksaan.

- efek siklisasi, spesies ditreat dengan POCl3 (ml 7) dan dipanaskan sampai 120 C di bawah udara selama 2 jam.

- penghapusan parallel (parallel removal) POCl 3 dicapai dengan memanaskan Carousel Radley di 160 C,

- sedangkan air (60 C)dipompa melalui atas Radley/radley upper jaket air dengan menggunakan sebuah circulator Air Julabo MB-5 panas, dan ketika vakum rumah/house vaccum diaplikasikan pada carrousel (dengan perangkap garis vakum es kering / ethanol).

- Setelah pengangkatan/removel POCl 3, 9-chloroacridines crudes yang dikeringkan azeotropically dengan EtOAc dan kemudian kering-load ke silika untuk kromatografi Flash kolom.

- pemurnian kolom flash otomatis menggunakan sistem CombiFlash oleh ISCO dibuat untuk menghasilkan produk 9-chloroacridine (7) dengan kemurnian tinggi, sebagaimana ditentukan oleh spectrum heteerogen 1H NMR.

- Sebuah pelarut umum bergradien untuk senyawa kelas ini dirancang: 5:95-55:45 etil asetat / heksan (2% Et3N) selama 25 menit.

- 1,3-Diaminopropane (236 ml, 2807 mmol) didinginkan sampai 0 C di bawah argon, dan kemudian larutan 2-nitrobenzenesulfonyl klorida (62,2 g, 280,7 mmol) dalam CH2Cl2 (ml 2400) secara perlahan ditambahkan dengan tekanan-menyamakan menjatuhkan corong/pressure-equalizing dropping funnel, selama periode ca. 2 h. Campuran reaksi diaduk semalam dan kemudian dibagi menjadi dua bagian yang sama untuk pemeriksaan. Setiap bagian didinginkan sampai 0 C, diikuti dengan penambahan H2O menjatuhkan corongdropping funnel addition (300 ml) dan HCl (concd aq) (150 ml) (Perhatian:! penambahan keDuanya merupakan proses eksotermik). lapisan CH2Cl2 diekstraksi dan dibuang. lapisan berair kemudian didinginkan sampai 0 C, diperlakukan secara langsung dengan padatan NaOH sampai campuran terlihat heterogen, dan kemudian diekstraksi dengan CH2Cl2 (6 x 500 ml). lapisan organik Gabungan dikeringkan lebih/over Na2SO4 dan dipekatkan pada untuk menghasilkan senyawa judul (13) (60,27 g, rendemen 83%), yang juga dapat dibeli secara komersial (TCI Amerika).

- Suatu larutan N-(3-aminopropil)-2-nitrobenzenesulfonamide (13) (31,0 g, 120 mmol) dalam THF (400 ml) diaduk pada 25 C di argon dalam waterbath ambien dan diperlakukan/treated dengan piridin (11 ml, 131 mmol, 1.1equiv) diikuti oleh reagen karboksilat anhidrida (14) (1,2 equiv). larutan diaduk pada 25 C selama 1,5 jam, setelah analisis RP-HPLC menunjukkan konversi kuantitatif amida tersebut. Campuran reaksi tersebut dipadamkan/quenched dengan amonium hidroksida (30% aq) (70 ml, 598 mmol, 5 equiv), diaduk dengan penambahan15 menit dan kemudian dipekatkan di dalam vakum. Residu ditreat dengan amonium klorida (satd aq): NaCl (satd aq) (2: 1, 300 ml), diasamkan dengan HCl (1 M aq) pada pH 1, kemudian produk tersebut diekstraksi dengan Et2O/EtOAc (1: 1) (2 x 200 ml). Lapisan organik dicuci dengan HCl (1 M aq):NaCl (satd aq) (1: 1, 100 ml), dikeringkan over Na2SO4 dan dipekatkan dalam vakum untuk menghasilkan crude amida intermediet yang digunakan pada langkah berikutnya tanpa pemurnian lebih lanjut.

- Langkah berikutnya reduksi borana-methylsulfide membutuhkan perangkat untuk menghilangkan oleh dimethylsulfide melalui distilasi: 34 reaksi dilakukan dalam suatu tabung bawah bulat (labu didih/labu distilasi) 2000 ml singleneck terhubung ke adaptor Claisen 2-Way. Adaptor ini dilengkapi dengan septum karet untuk penambahan reagen dan kepala distilasi vakum dengan perangkap dimethylsulfide distilat/distilasi. Sistem ini diisi dengan larutan crude amida (ca. 120 mmol) dalam THF anhidrat (400 ml), diaduk pada 25 C di argon dan ditreat dengan drop/tetes demi tetes kompleks borana-dimethylsulfide (46 ml, 478 mmol, 4 equiv.) larutan dipanaskan dalam penangas minyak pada suhu 60 C selama 30 menit dengan distilasi bersamaan dimethylsulfide dari campuran reaksi. analisis RP-HPLC menunjukkan reaksi lengkap. Kepala destilasi digantikan oleh kondensor, dan H2O perlahan-lahan dan hati-hati ditambah selama 20 menit, sampai gelembung utama berhenti. Kemudian, HCl (1 M aq, 100 ml) ditambahkan dan larutan dipanaskan sampai 60 C selama 45 menit. larutan didinginkan sampai 0 C dan ditreat dengan Et2O (500 ml) dan diekstraksi dengan HCl (1 M aq, 2 · 300 ml). Lapisan-lapisan berair gabungan dicuci dengan Et2O (200 ml), didinginkan sampai 0 C, diperlakukan secara langsung dengan NaOH padat sampai campuran itu tampak heterogen, kemudian diekstraksi dengan EtOAc (3 x 200 ml ), kering atas/over Na2SO4 dan dipekatkan dalam vakum untuk menghasilkan amina sekunder yang diinginkan (15) kemurnian tinggi (yield 50-71%).

- amina sekunder (14) yang dihasilkan pada langkah sebelumnya masukan ke dalam vessel/bejana Radley 12-place reaksi carrousel sebagai larutan stok 0,3 M dalam THF (12 ml masing-masing, 3,5 mmol), diikuti oleh aldehid (16) (1,5 equiv), dan natrium triacetoxyborohydride (1,5 equiv). vessel telah dibersihkan di bawah argon dan kemudian diganggu dengan menempatkannya dalam penangas air Fisher Scientific FS20 sonicating selama 30-60 menit, setelah RP-HPLC menunjukkan reaksi reduktif secara kuantitatif .. paralel pelarut penghapusan dalam kondisi vakum telah dicapai dengan menggunakan sebuah instrumen GeneVac HT-4. pemeriksaan paralel oleh SPE: awalnya kolom (Teledyne ISCO Inc, # 69-3873-146) yang sarat/loaded dengan resin pertukaran ion Dowex 50WX2-400 (15 g), dan resin itu kemudian pra-kondisi dengan MeOH (1% CF3CO2H ) (50 ml). Konsentrat Campuran reaksi dalam/pada MeOH (5% CF3CO2H) (50 ml) dan dimuat ke kolom. Resin dicuci dengan MeOH dan kemudian produk dielusi dengan MeOH (10% Et3N) (50 ml). Akhirnya, produk-produk dari reduktif aminasi diperoleh setelah menghilangkan pelarut paralel dalam vakum menggunakan instrumen GeneVac HT-4. hasil Alternatif berair: campuran reaksi mentah/crude dalam THF hati-hati dipadamkan/quenched dengan HCl (1 M aq) (25 ml), ditreat/direaksikan dengan Et2O (150 ml), dan lapisan air diekstraksi diikuti oleh ekstraksi berair tambahan dengan HCl (1 M aq) (25 ml). lapisan berair digabungkan dan dicuci dengan Et2O (2 · 50 ml), basified dengan NaOH (1 Maq.) Sampai terlihat heterogen, dan produk-produk tersebut diekstraksi dengan Et2O (3 x 30 ml). Lapisan organik dikeringkan over Na2SO4 dan dipekatkan dalam vakum untuk menghasilkan produk.

- Produk kasar amina tersier (ca. 3,5 mmol) dilarutkan dalam CH3CN (35 ml) dan dimuat/loaded ke dalam vessel/bejana Radley 6-place reaksi carousel-. Vessel/bejana itu dibersihkan dari udara dengan menerapkan tiga iterasi dari rumah vakum diikuti dengan tekanan positif argon. Setiap vessel ditreat dengan Cs2CO3 (equiv 2,5) diikuti oleh benzenethiol (5.0 equiv), dan kemudian vessel itu diaduk vigorously/dengan penuh semangat di bawah argon selama 1 jam, setelah RP-HPLC menunjukkan konversi mendekati kuantitatif (> 80%). benzenethiol berLebih (5.0 equiv) ditambahkan, dan vessel diaduk selama 1 jam, lalu analisis RP-HPLC menunjukkan reaksi yang lengkap. SPE Sebuah identik dengan hasil yang dijelaskan di atas untuk reduktif aminasi dilakukan. Hasil pemeriksaan berair Alternatif: reaksi campuran mentah di CH3CN diambil pada EtOAc (150 ml) dan diekstraksi dengan HCl (1 M aq) (2 · 50 ml). Lapisan berair dicuci dengan EtOAc (50 ml), basified dengan NaOH (1 M aq) sampai pH 14 dan diekstraksi dengan EtOAc (3 x 30 ml). lapisan organik Gabungan dikeringkan over Na2SO4, dan untuk produk diamina alkylsubstituted yang mudah menguap, CF3CO2H (2 equiv) ditambahkan. Akhirnya, produk yang diperoleh setelah konsentrasi dalam vakum.

- larutan stok DMSO 9-chloroacridines (7), diamin (9) dan fenol disusun/prepared 0077, 0,60 dan 2,9 M, respectfully. 2 ml vessel polypropylene posisi 48-Bohdan MiniBlock yang dimuat dengan 9-chloroacridines (7) (250 µl stok DMSO, 19,3 µl mol), fenol (100 µl stok DMSO, 288 µmol, 15 equiv ) Cs2CO3 (5 mg, 19,3 µmol, satu ekuivalen) dan 3 A ˚ saringan molekul (ca. 0,010 g). Dua yang terakhir ditambahkan secara paralel melalui Bohdan Resin Dispenser accessory. Blok ini bersamaan/secara simultan dipanaskan sampai 100 C dan diaduk pada 600 rpm, menggunakan Bohdan MiniBlock getaran Kapasitas Tinggi dan mencuci stasiun selama 2 h. RPLCMS biasanya menunjukkan konversi kuantitatif 9-phenoxyacridine CHEMSET (17). Kemudian, diamin (9) ditambahkan (125 µLstock DMSO, 4 equiv) dan blok dipanaskan lagi sampai 100 C, 600 rpm selama 4 jam. analisis RP-LCMS menunjukkan adanya sejumlah produk 9-aminoacridine (10) dan bervariasi 9-acridone (17). amina primer tidak bereaksi yang memulung/scavanged dengan perlakuan oleh resin metil polystyrene isosianat (NovaBiochem, 1,40 mmol / loading g, 8 equiv) diikuti agitasi pada 600 rpm semalam pada suhu kamar. pemeriksaan paralel oleh SPE: pra-dikemas kolom SPE (SCX Bohdan # 13511218) dikondisikan dengan H2O (1% CF3CO2H). Campuran reaksi (dalam DMSO) treated dengan H2O (1% CF3CO2H) (1 ml) dan dimuat/loaded ke kolom. Resin dicuci secara berurutan dengan H2O (1% CF3CO2H) (2 ml), MeOH (2 ml), dan MeOH (1% piridin) (8 ml), diikuti dengan elusi produk dengan EtOAc (10% Et3N) (3 ml). 9-aminoacridine yang diinginkan chemset (10) akhirnya diperoleh setelah penghapusan/penghilangan pelarut paralel dalam vakum menggunakan instrumen GeneVac HT-4.