PPT Uji aktivitas antihiperkolesterol jamur tiram putih fajar santoso uhamka

UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN

LARUT ALKALI JAMUR TIRAM PUTIH Pleurotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm.) PADA HAMSTER

HIPERKOLESTEROLEMIA

Pembimbing :Drs. H. Priyo Wahyudi, M.si.Elly Wardani, M.farm., Apt

Fajar Santoso0904015090

LATAR BELAKANG

JAMUR TIRAM PUTIH(Pleurotus ostreatus)HIPERKOLESTEROLEMIA

β-GLUKANPleuran

ANTIHIPERKOLESTEROL

Pada penelitian sebelumnya, bahwa pemberian ekstrak β-glukan Termitomyces eurrhizus 72 mg/200 g

BB pada tikus, menunjukkan hasil penurunan kadar LDL sebesar 28,55% dan kolesterol total sebesar

11,2%Pleurotus ostreatus

HIPERKOLESTEROLEMIAHiperkolesterolimia adalah suatu gangguan metabolisme yang ditandai keadaan naiknya kadar kolesterol dalam darah. Kondisi ini terjadi pada saat konsentrasi kolesterol total serum melebihi normal 200 mg/dl.

JAMUR TIRAM PUTIHJamur tiram putih (Pleurotus ostreatus) merupakan jamur kayu dengan nilai gizi tinggi. Mudah dibudidayakan yang secara luas dimanfaatkan sebagai sumber pangan. Salah satu kandungannya yaitu β-glukan

BETA-GLUKANBeta-glukan jamur tiram disebut pleuran, merupakan polisakarida salah satu komponen penyusun dinding sel jamur, mempunyai aktivitas sebagai antihiperkolesterol

ANTIHIPERKOLESTEROLMekanisme penurunan kolesterol oleh β-glukan yaitu berikatan dengan asam empedu sehingga mencegah reabsorpsi kolesterol dalam usus dan akhirnya diekskresikan.

IDENTIFIKASI MASALAH

Bagaimana efektivitas ekstrak alkali jamur tiram putih dalam menurunkan kadar kolesterol dibandingkan dengan kolestiramin?

Apakah pemberian ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih (Pleurotus ostreatus) mempunyai aktivitas antihiperkolesterol dalam menurunkan kadar kolesterol total dan

LDL pada hamster hiperkolesterolemia ?

Pada dosis berapakah ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih (Pleurotus ostreatus) dapat berkhasiat sebagai antihiperkolesterol secara optimum?

Apakah pemberian ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih mempunyai aktivitas antihiperkolesterol dalam menurunkan kadar kolesterol total dan LDL pada hamster hiperkolesterolemia ?

PERUMUSAN MASALAH

TUJUAN & MANFAAT PENELITIAN

Tujuan penelitan adalah untuk membuktikan aktivitas ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih sebagai antihiperkolesterol

Manfaat penelitian adalah memberikan informasi tentang ekstrak alkali beta-glukan jamur tiram putih dapat menurunkan kadar kolesterol total dan LDL, dan memberikan pengetahuan kepada masyarakat serta menjadi acuan dalam penelitian selanjutnya.

HIPOTESIS

Ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih Pleurotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm.) mempunyai aktivitas sebagai

antihiperkolesterol pada hamster hiperkolesterolemia

tempat

bahan

waktu

Tempat & Waktu.

Alat & Bahan.

April- Juli 2013

Laboratorium PUSPIPTEK Serpong dan Laboratorium Farmakologi dan Patologi Klinik FFS UHAMKA

kertas saring, neraca analitik, botol timbang, blender, liofilisator, timbangan, sonde, alat suntik steril, pipet mikro, mikrotube, spektrophotometer clinical, centrifuge, alat-alat glass,dll

Serbuk kering jamur tiram putih Pakan kolesterol Obat pembanding klestiramin Bahan kimia : etanol 80%, reagen kit kolesterol, NaOH

hewan uji

alat

Hamster syrian jantan

TEMPAT & WAKTU, ALAT & BAHAN PENELITIAN

Ekstraksi β-glukanLarut alkali

Ekstrak kering β-glukan

ORGANOLEPTIS

KadarAbu

PerhitunganRendemen

Penyiapan Alat & Bahan

Pemeriksaan mutu ekstrak

KadarAir

UjiKualitatif

POLA PENELITIAN

DETERMINASI Jamur tiram putih

Analisis DataUji Antihiperkolesterol

METODE EKSTRAKSI.

2 kg serbuk jamur

Akuades3x volume

+Dipanaskan ad mendidih

±3 jam, disaring

FILTRAT

RESIDU

Residu + etanol 80%3x volume,

diaduk & disaring

Residu + NaOH 1N 5x volume, disaring

FILTRAT

RESIDU

Asam Asetat 2 M(Netralisasi)

+

Centrifuge

4000 rpm, 20 menit

Endapan

cuci dengan akuades,

etanol,akuadesLalu Freezedrying

FILTRAT

RESIDU

Serbuk alkaliβ-glukan

HASIL EKSTRAKSINo. Bahan Hasil

1 Jamur tiram kering 2000 g

2 Serbuk jamur tiram 1920 g

3 Ekstrak kering 188,8

4 % Rendemen 9,83%

RendemenSerbuk simplisia kering = 1920 gramEkstrak kering = 188,8 gram% Rendemen = X 100%

= X 100%= 9,83 %

No. Berat sampel (g) % DC Kadar air (%)

1 1,804 90,76 9,24

2 1,802 95,12 6,39

3 1,814 90,34 9.66

RATA-RATA 8,43

KADAR AIR

No. Berat krusibel kosong (g)

Berat krusibel + ekstrak kering (g)W1

Berat krusibel + ekstrak kering konstan (g)W2

Kadar abu (%)

1 22,4294

2 22,2268 24,2268 22,4290 10,13

3 22,4294

KADAR ABU

PEMBUATAN INDUKSI HIPERKOLESTEROL

Kuning telur ayam55% x 1kg = 550 g

Pakan standar( pelet hamster), digerus

ad 100% = 400 g

Lemak kambing dipanaskan ad mencair

5% x 1kg = 50 g

Campur semua bahan,Bentuk adonan menjadi pelet

Dosis Ekstarak β-glukan larut alkali jamur tiram putih :

Dosis 1 : ½ x 25,2 mg/hari/50 g BB = 12,6 mg/hari/50 g BB Dosis 2 : 1 x 25,2 mg/hari/50 g BB = 25,2 mg/hari/50 g BB Dosis 3 : 2 x 25,2 mg/hari/50 g BB= 50,4 mg/hari/50 g BB

Dosis Kolestiramin : Dosis kolestiramin untuk manusia (70 kg) adalah 4 g. Dosis Hamster (50 g) = 0,026 g/50 g BB

PENETAPAN DOSIS

TABEL PERLAKUAN HEWAN UJIKelompok Aklimatisasi

7 hariInduksi pakan hiperkolesterol

28 hariHari

Ke-36Tahap perlakuan

14 HARIHari

Ke-51

Normal

Pakan standard

Pakan standar

PENGAMBILAN

DARAH

Pakan standar + Na CMC 0,5%

PENGAMBILAN

DARAH

Negatif

Pakan hiperkolesterol

+ Na-CMC

Pakan standar + Na CMC 0,5%

Positif Pakan standar + Na CMC 0,5% + kolestiramin

Dosis 1

Pakan standar + ekstrak alkali β-glukan dosis 1

Dosis 2


Dosis 3


SKEMA PENGAMBILAN DARAH

Hamster dibius dengan Eter

Tusuk pada bagian

sudut mata (vena sinus orbitalis)

Tampung pada tabung eppendorf

Centrifuge4000 rpm15 menit

Serum darah

ETER

Pipa kapiler

1.

2. 3.

4.

SKEMA PROSES STANDARDISASI

10 μl larutan standar +1000 μl reagen enzim (kit) Vortex

Inkubasi20-25oC, 20 menit

Baca kadar denganSpektrofotometer klinikal

SERUM 10 μl + REAGEN ENZIM (KIT)1000 μl VORTEX

BACA KADAR dengan SPEKTROFOTOMETER KLINIKAL INKUBASI

37oC, 5 menit

SERUM 100 μl+ 1000 μl

PEREAKSI PENGENDAP(Heparin & Natrium sitrat)

VORTEX

INKUBASI 37oC, 5 menit

Centrifuge4000 rpm15 menit

Ambil SUPERNATAN 100 μl

+ REAGEN ENZIM (KIT )1000 μl VORTEX BACA KADAR dengan

SPEKTROFOTOMETER KLINIKAL

ANALISIS DATA

Data persentase penurunan kadar kolesterol dan LDL yang diperoleh diuji kenormalan dan homogenitasnya. Jika data normal dan homogenitas, diolah secara parametrik Anova satu arah untuk melihat pengaruh dari perlakuan. Untuk mengetahui apakah ada perbedaan antara kelompok perlakuan dilakukan uji LSD

NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS 1 DOSIS 2 DOSIS 30

100

200

300

400

500

600

103

470

288

208

379

510

142.07

217.18 230.19

139.3167.34 166.04

SEBELUM SESUDAH

perlakuan

kada

r ko

lest

erol

tota

l (m

g/dl

)

Grafik batang rerata kadar kolesterol total sebelum dan sesudah perlakuan

KELOMPOK NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS 1 DOSIS 2 DOSIS 3

1 -87,41 44,60 23,53 36,46 67,59 59,32

2 3,59 44,13 2,15 53,39 53,34 74,54

3 -10,47 68,63 34,82 8,17 42,77 50,64

4 -48,73 48,40 -34,30 15,83 54,45 79,86

RERATA -35,75 51,44 6,55 28,46 54,54 66,09

SD 40,92 11,62 30,42 20,47 10,17 13,49

Tabel persentase penurunan kolesterol total

Grafik batang rerata kadar LDL sebelum dan sesudah perlakuan

NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS 1 DOSIS 2 DOSIS 30

50

100

150

200

250

300

350

051

269

175

123

219

286

065

104

143

054

077087

SEBELUM SESUDAH

perlakuan

kada

r LD

L (m

g/dl

)

KELOMPOK NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS 1 DOSIS 2 DOSIS 3

1 -74,80 47,50 20,08 68,40 68,55 64,61

2 33,80 48,90 14,53 47,53 53,15 61,20

3 -44,50 81,14 24,20 49,84 6,77 70,41

4 -32,75 63,14 -13,78 49,60 70,03 85,17

RERATA -29,56 60,17 11,26 53,84 49,62 70,35

SD 45,80 15,66 17,16 9,76 29,57 10,59

Tabel persentase penurunan LDL

UJI STATTISTIK PERSEN PENURUNAN KADAR KOLESTEROL

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

Delta_Kolesterol_total

N 20

Normal Parametersa,,b Mean 41.4160

Std. Deviation 27.48460

Most Extreme Differences Absolute .170

Positive .081

Negative -.170

Kolmogorov-Smirnov Z .759

Asymp. Sig. (2-tailed) .613

UJI NORMALITASNilai Asymp. Sig. = 0,613)> α (0,05)

sehingga data terdistristribusi normal.

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.2.115 4 15 .129

UJI HOMOGENITASNilai Sig. 0.129>α (0,05) sehingga data

bervariansi homogen.

ANOVA

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 9059.567 4 2264.892 6.418 .003

Within Groups 5293.095 15 352.873 Total 14352.662 19

ANOVANilai Sig. (0.003) < α (0,05) sehingga

terdapat perbedaaan bermakna antar kelompok perlakuan

UJI STATTISTIK PERSEN PENURUNAN KADAR KOLESTEROL

KESIMPULAN:Kontrol positif berbeda bermakna dengan kontrol negatif.Kontrol negatif berbeda bermakna dengan kontrol positif, dosis II dan dosis III.Dosis I berbeda bermakna dengan dosis III.Dosis II berbeda bermakna dengan kontrol negatif.Dosis III berbeda bermakna dengan kontrol negatif dan dosis I


Delta_LDLN 20




Positive .107

Negative -.226

Kolmogorov-Smirnov Z 1.012


a. Test distribution is Normal.

b. Calculated from data.

UJI STATTISTIK PERSEN PENURUNAN LDL


Delta_LDLN 20




Positive .107

Negative -.226

Kolmogorov-Smirnov Z 1.012


a. Test distribution is Normal.

b. Calculated from data.

UJI NORMALITASNilai Asymp. Sig. = 0,257)> α (0,05)

sehingga data terdistristribusi normal.

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.1.421 4 15 .275

UJI HOMOGENITASNilai Sig. 0.275>α (0,05) sehinggan

data bervariansi homogen.

ANOVA

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 8115.239 4 2028.810 6.256 .004

Within Groups 4864.624 15 324.308 Total 12979.862 19

ANOVANilai Sig. (0.004) < α (0,05) sehingga

terdapat perbedaaan bermakna antar kelompok perlakuan.

UJI STATTISTIK PERSEN PENURUNAN LDL

KESIMPULAN:Kontrol positif berbeda bermakna dengan kontrol negatif.Kontrol negatif berbeda bermakna dengan kontrol positif, dosis I, dosis II dan dosis III.Dosis I berbeda bermakna dengan kontrol negatif.Dosis II berbeda bermakna dengan kontrol negatif.Dosis III berbeda bermakna dengan kontrol negatif.

KESIMPULAN

Ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih (Pluerotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm.) mempunyai aktivitas sebagai antihiperkolesterol. Semakin besar konsentrasi dosis

ekstrak, makan semakin besar pula penurunan kadar kolesterol total dan LDL.

SARAN

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut hingga didapatkan dosis toksik dari ekstrak β-glukan larut alkali jamur tiram putih.

TE

RI MA

KASIH

Data kadar kolesterol total

Data kadar LDL

PPT Uji aktivitas antihiperkolesterol jamur tiram putih fajar santoso uhamka

Education

Transcript of PPT Uji aktivitas antihiperkolesterol jamur tiram putih fajar santoso uhamka