Pengenalan Parasit Malaria

5/10/2018 Pengenalan Parasit Malaria - slidepdf.com

http://slidepdf.com/reader/full/pengenalan-parasit-malaria 1/32

PARASITOLOGI



PENGENALAN PARASIT

MALARIA

Human plasmodia:

Plasmodium falciparum : malaria tropika

P. vivax : malaria tertiana

P. malariae : malaria quartana P. ovale : jarang ditemui di Ind.

Dijumpai di Afrika & Pasifik Barat



SIKLUS HIDUP PARASITMALARIA

SEKSUAL : DI TUBUH NYAMUK

(SPOROGONI)

ASEKSUAL : DI TUBUH MANUSIA

(SCHIZOGONI)



Gambar siklus hidup P. falciparum



Gambar siklus hidup P. vivax



Proses perkembanganparasit dalam darah :

Stadium tropozoit → parasit ada dalam proses

pertumbuhan

zon → paras a am proses pem a an

Gametosit → parasit dalam proses pembentukan

sel kelamin.



Tabel Karakteristik Spesies Plasmodium

P. falciparum P. vivax P. ovale P. malariae

Siklus eksoeritrositik (hari) 5-7 8 9 14-15

Siklus aseksual dalam darah

(jam)

48 48 50 72

Masa prepaten (hari) 9-10 11-13 10-14 15-16

Masa inkubasi (hari) 9-14 12-17 16-18

Dpt lbh

lm

18-40

Dpt lbh lm

Keluarnya gametosit (hari) 8-15 5 5 5-23

Jumlah merozoit persizon

jaringan

30-40.000 10.000 15.000 15.000

Siklus sporogoni dalam

nyamuk (hari)

9-22 8-16 12-14 16-35



Tabel perbedaan morfologis parasit

pada stadium perkembangan parasit dari spesies Plasmodium manusia.

Spesies

Stadium P. falciparum P. malariae P. vivax P. ovale

Tropozoit Cincin halus, Cincin tebal, Cincin tebal, Cincin tebal,

muda infeksi mulripel,kromatin kecil 1-2

titik

kromatin 1 titik tidak teratur,kromatin 1

titik

kromatin 1titik

Tropozoit

tua

Cincin membesar,

agar tidak teratur

Bulat, kromatin

di tengah, pita

pigmen jelas

Tidak teratur,

amoeboid

Bulat, kompak

Skizon Berisi 8-23

merozoit

8-10 merozoit,

tersusun roset,

pigmen di

tengah

12-18

merozoit

susunan tidak

teratur

8-14 merozoit,

susunan tidak

teratur



Tabel Perbedaan morfologis (lanjutan)

S p e s i e s

Stadium P. falciparum P. malariae P. vivax P. ovale

Gametosit Bentuk bulan sabit;

jantan agak kemerahan, kromatin

difus; betina kebiru-

biruan, kromatin

Lonjong atau;

bulat bentuk jantan

kromatin

difus

Lonjong atau

bulat jantankromatin

difus

Lonjong atau

bulat jantankromatin difus

padatBesar

eritrosit

tepat Tetap atau

mengecil

Membesar Membesar

Bentuk

eritrosit

Kadang berubah Tidak

berubah

Tidak

berubah

Tidak teratur,

ujungbergerigi

Titik - titik Maurer’s cleft Titik Zieman

(jarang)

Titik

Schuffner

Titik

Schuffner

(selalu ada)



Pembuatan Sediaan Darah

Menyiapkan kaca sediaan

Syarat – syarat Kaca Sediaan

Persiapan KS : - baru

-

Mencuci KS

Menyimpan KS

Mengirim KS



Gambar 8

Gambar

langkah – langkah

menyiapkan

sediaan darah



ASAL SD

ACD PCD

MS, MFS, MBS



Macam Sediaan Darah

1 la isan sdm

Sediaan Darah tipis :

Volume sedikit

Fiksasi dengan metanol, sebelum pewarnaan

Kemungkinan ketemu parasit <<<



SD Tebal :

Tumpukan sdm Hemolisa sebelum pewarnaan

Dinding sel sebagian & sitoplasma hancur→

tamp an t a utu . Volume darah banyak → kemungkinan

ketemu parasit >>

Penegakan diagnosis malaria



Gambar

stadium morfologi

Plasmodium vivax



Kualitas SD

SD bersih Vol 0,5 ml = 2-3 tetes

Ketebalan baik (transparan, leukosit 10-20 per lp)

Darah tidak terfiksasi→ hitam / pekat

Hemolisa sempurna → tidak sempurna dapat

tumpukan sdm tidak

hancur



Faktor – faktor Penentu Mutu SD

Kualitas & kebersihan KS. Pengambilan darah di tempat aman, bebas dari

debu, lalat & sinar matahari langsung.

Darah kering udara.

Pengamanan SD sebelum pewarnaan.

Pengambilan darah secara benar.



Gambar 9



PEWARNAAN SD

Kriteria pewarnaan yang baik :

a) Makroskopis : - SD jernih & transparan- Kombinasi warna merah, ungu, dan biru

b) Mikroskopis :

- Latar belakang jernih, biru pucat, pucat kemerahan- Benda-benda sel warna kontras

- Sebagian besar leukosit, dindingd- sel & sitoplasma

dapat dilihat.- Bersih dari partikel – partikel tepung zat warna giemsa



Faktor – faktor penentu mutu

pewarnaan SD1. Kualitas Giemsa

- Stok

- Zat warna Giemsa (eosin, metilin blue, metilin azur) aktif

- Merk Giemsa

2. Kualitas air en encer Giemsa

- Tidak tercemar- pH ideal (7,2)

3. Kepekatan larutan Giemsa

4. Lama reaksi pewarnaan (waktu tertentu)5. Kualitas SD

SD lama → hemolisa→ fiksasi

6. Kebersihan SD



SIFAT-SIFAT GIEMSA

Tepung zat warna terdiri dari : Eosin → warna merah pada sdm

Metilin azur → warna merah ada inti arasit

Metilin biru→ warna biru pada sitoplasma sel

Pelarut → alkohol / metanol + glyserin.

Stok Giemsa tidak boleh tercemar air.



Pedoman Pemakaian Giemsa

Giemsa stok diencerkan dengan aquades, buffer, air sebelumdigunakan.

Pengenceran secukupnya.

Gunakan pipet khusus untuk Giemsa stok, tutup rapat. Untuk keperluan harian gunakan Giemsa di botol tetes.

Pewarnaan lambat→ hasil baik→Giemsa 5%.

.

permukaan KS tertutup cairan 1 cc

Takaran pewarnaan

Untuk PCD : Giemsa 1 tetes + pengencer 10 tetes 15-20 menit atau

1 tetes 7 tetes, 10-15 menit.

Untuk ACD/MS: Giemsa 1 tetes + pengencer 1 cc, 45-60 menit.

Golden scum & endapan zat warna diguyur pada akhir pewarnaan.

Pengencer dengan pH 6,8 – 7,2.



Menguji mutu Giemsa Pewarnaan 1-2 SD→ periksa dimikroskop→ apakah hasil

sesuai dengan kriteria ?

Test dengan kertas whatman no. 2 & metanol.

- Teteskan Giemsa (1-2)

- -

- Terbentuk

- Lingkaran biru→metilin blue

- Ungu (metilin azur)

- Merah(eosin)

Air Buffer : Na2HPO4

KH2PO4

Aquadest

Atau tablet Buffer (1 tab + 100 cc ag)



Cara pewarnaan :

1. Pewarnaan individu / cepat: Letakkan SD pd rak/tmpat datar, darah di bag atas.

Encerkan Giemsa sesuai dg takaran

Tuang lrt Giemsa, menutup seluruh permukaan Catat waktu pewarnaan

Bilas KS dengan air mengalir.

Tegakkan KS dan biarkan kering Pemeriksaan SD



2. PEWARNAAN MASAL / LAMBAT:

Hitung SD yg akan diwarnai scr masal

Hitung vol Giemsa 5 % (1 cc untuk 1 SD)

Susun KS pd rak, darah di bag atas

Siapkan lrt Giemsa 5 % sebanyak yg diperlukan

Teteskan lrt Giemsa pd SD scr teratur dr satu arahscr cepat.

Waktu pewarnaan 45 menit

Bilas KS dg air mengalir Tegakkan KS dan biarkan kering udara.

Bungkus SD agar tdk tercemar slm menunggupemeriksaan



Hemolisa dan Fiksasi

SD tebal : fiksasi hrs dihindari Umur SD < 2 hr pewarnaan langsung, hemolisa

akan terjadi oleh lrt. Giemsa

Umur SD > 2 hr tapi < 5 hr, hemolisa dd carameneteskan aquades pd SD sampai hemoglobin

melarut (sblm pewarnaan)

Umur SD > 1 mgg bila diwarnai hasil tdk dijaminbaik



PEMERIKSAAN PARASIT

MALARIAPEMERIKSAAN PARASIT MALARIA YG BAIK:

Sistem cross check: pemeriksaan ulang SD oleh

mikroskopis di lab tkt rendah oleh mikroskopis dilab. Tkt lebih tinggi.

o o u ur:

– Kesalahan positif (pemrksn I +, pmrksn ulang -)

– Kesalahan negatif (pmrksn I -, pmrksn ulang +)

– Jenis spesies berubah

– Kecepatan pemeriksn SD (10 SD/jam atau 40-50SD/hr)



Kepadatan parasit:Tolok ukur:

Juml parasit (stadium parasit/ juml lp yg diperiksa)

Juml parasit (stadium parasit/ juml leukosit) – SD neg = prst nol/100 lp atau nol/1500 leukosit.

Chance factor: k dtn arasit < 5/100 l .

Kecepatan menetapkan diagnosa (SD neg dlm wkt5 mnt)

Pemrksn pertama +, lanjutkan sampai 20 lp utk

mencari kemungkinan infeksi campuran.



MENDIAGNOSA PARASIT: Kesimpulan hasil pemeriksaan:

– SD neg : 100 lp

– SD pos : 20 lp

Cara pelaporan (dg simbol), mis: – F : pos P. falciparum

– F + : os P. falci arum rin dan ametosit

– Fg : pos P. falciparum gametosit

– V : pos P. vivax (tropozoit amuboit)

– M : pos P. malariae

–

Mix : infeksi campuran Pf dan Pv – Neg : tdk ditemukan parasit

– SD rusak: tetap hrs diperiksa



Gambar stadium

morfologi

P. palcifarum



Gambar stadium

morfologi

P. malarie



Gambar stadium

morfologi

P. ovale

Pengenalan Parasit Malaria

Documents

Transcript of Pengenalan Parasit Malaria