i

PENGARUH PEMBERIAN FRAKSI TERPENOID

DAUN KATUK (Sauropus androgynus (L.) Merr)

TERHADAP PROFIL LIPID TIKUS PUTIH JANTAN

GALUR WISTAR YANG DIINDUKSI

PAKAN KAYA LEMAK

Skripsi

KOMANG AYU PARAMITA WIDHIASTUTI

1108505024

JURUSAN FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS UDAYANA

2015

ii

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa karena

atas berkat rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan Tugas Akhir II (Skripsi)

yang berjudul “Pengaruh Pemberian Fraksi Terpenoid Daun Katuk

(Sauropus Androgynus (L.) Merr) terhadap Profil Lipid Tikus Putih Jantan

Galur Wistar yang Diinduksi Pakan Kaya Lemak” tepat pada waktunya,

sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm) di

Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas

Udayana.

Penyusunan Tugas Akhir II ini tidak terlepas dari dukungan, saran, dan

bimbingan dari berbagai pihak. Maka dari itu, pada kesempatan ini penulis ingin

mengucapkan terima kasih kepada:

1. Bapak Ir. Anak Agung Gede Raka Dalem, M.Sc. (Hons). selaku Dekan

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.

2. Bapak Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku

Ketua Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Udayana

3. Ibu Ni Kadek Warditiani, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing I

yang telah meluangkan waktu, tenaga dan pikiran dalam membimbing

penyusunan Tugas Akhir II ini.

4. Ibu Ni Made Pitri Susanti, S.Farm., M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing

II yang telah meluangkan waktu, tenaga dan pikiran dalam membimbing

penyusunan Tugas Akhir II ini.

5. Ibu Dr. Sagung Chandra Yowani, S.Si., M.Si., Apt.; Bapak Eka Indra

Setyawan, S.Farm., M.Sc., Apt.; Ibu Ni Putu Linda Laksmiani S.Farm,

M.Sc., Apt. selaku dosen penguji Tugas Akhir II yang telah memberi

bimbingan dan dukungan pada penulis dalam penyusunan Tugas Akhir II

ini.

6. Ibu Ni Ketut Widyani Astuti, S.Si., M.Biomed., Apt. selaku pembimbing

akademik yang telah membimbing penulis selama perkuliahan.

iv

7. Seluruh dosen dan staf pegawai di Jurusan Farmasi yang telah

memberikan bantuan dan bimbingan kepada penulis selama penyusunan

Tugas Akhir II ini.

8. Orang tua tercinta Ir. Ketut Sumadiasa dan Ir. Hestin Yuswanti, M.P.,

kakak tercinta Gede Bagus Premana Mahatvayudha, S.P. dan Made Agung

Prebawa Parama Artha, S.Kom., serta seluruh keluarga besar yang selalu

memberikan semangat dan motivasi dalam penyusunan Tugas Akhir II ini.

9. Sahabat-sahabat dan teman-teman seperjuangan (Aditya, Mila, Cheristien,

Putri, Gung Sinta, dan Dayu Tu, Andre, Fatwa, Redika) yang selalu ada

disaat susah dan senang, yang telah membantu dan memberi dukungan

semangat, serta kritik dan saran selama penyusunan Tugas Akhir II ini.

10. Teman-teman "Bahan Alam 2011", teman-teman angkatan 2011 "LOV",

serta teman-teman KKN-PPM Universitas Udayana Periode X di Desa

Belumbang, Kecamatan Kerambitan, Kabupaten Tabanan yang telah

membantu dan selalu memberikan semangat selama penyusunan Tugas

Akhir II ini.

11. Laboran Lab. Fitokimia Kak anggi, Lab. Analisis Mbok Dwik serta Lab.

Nonsteril Kak Pasek atas bantuan serta bimbingan yang diberikan dalam

penyelesaian Tugas Akhir II ini.

12. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan

Tugas Akhir II ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu.

Penulis menyadari bahwa penyusunan Tugas Akhir II ini masih jauh dari

sempurna. Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak

yang bersifat membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih

baik. Penulis berharap semoga Tugas Akhir II ini dapat bermanfaat bagi semua

pihak.

Bukit Jimbaran, Juni 2015

Penulis

v

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ............................................................................................ i

LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................. ii

KATA PENGANTAR .......................................................................................... iii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... v

DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH ............................................................ viii

DAFTAR TABEL ................................................................................................. x

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xi

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii

ABSTRAK ............................................................................................................ xiii

ABSTRACT .......................................................................................................... xiv

BAB I PENDAHULUAN .................................................................................. 1

1.1 Latar Belakang............................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ......................................................................... 3

1.3 Tujuan ............................................................................................ 3

1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 5

2.1 Katuk (Sauropus androgynous (L.) Merr)..................................... 5

2.1.1 Klasifikasi Tanaman .......................................................... 5

2.1.2 Deskripsi Tanaman ............................................................ 5

2.1.3 Kandungan Kimia .............................................................. 6

2.1.4 Kegunaan dan Bioaktivitas ................................................ 6

2.2 Terpenoid ....................................................................................... 7

2.3 Ekstraksi dengan Metode Maserasi ............................................... 9

2.4 Fraksinasi dengan Metode Kromatografi Kolom .......................... 9

2.5 Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ................................................... 11

2.6 Lipid .............................................................................................. 11

2.7 Dislipidemia .................................................................................. 14

2.8 Hewan Uji ...................................................................................... 15

vi

2.9 Terapi Dislipidemia ....................................................................... 15

2.9.1 Terapi Non Farmakologi.................................................... 15

2.9.2 Terapi Farmakologi ........................................................... 16

2.10 Metode Induksi .............................................................................. 17

BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 18

3.1 Rancangan Penelitian .................................................................... 18

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ......................................................... 21

3.3 Objek Penelitian ............................................................................ 21

3.4 Bahan Penelitian ............................................................................ 21

3.5 Alat Penelitian ............................................................................... 22

3.6 Prosedur Penelitian ........................................................................ 23

3.6.1 Determinasi Tanaman ........................................................ 23

3.6.2 Penetapan Kadar Air Serbuk Daun Katuk ......................... 23

3.6.3 Ekstraksi Daun Katuk ........................................................ 23

3.6.4 Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol 90% Daun Katuk .... 24

3.6.5 Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom ........................... 24

3.6.6 Kromatografi Lapis Tipis Hasil Fraksinasi........................ 25

3.6.7 Skrining Fitokimia ............................................................. 26

3.6.8 Uji Residu Pelarut .............................................................. 28

3.6.9 Pembuatan Pakan Kaya Lemak ......................................... 29

3.6.10 Pembuatan CMC Na 0,1% ................................................. 29

3.6.11 Pembuatan Larutan Uji ...................................................... 29

3.6.12 Induksi dan Perlakuan Hewan Uji ..................................... 30

3.6.13 Preparasi Serum ................................................................. 31

3.6.14 Pengukuran Kadar Lipid Serum ........................................ 31

3.7 Analisis Data ................................................................................. 33

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 34

4.1 Determinasi Tanaman .................................................................... 34

4.2 Penetapan Kadar Air Serbuk Daun Katuk ..................................... 34

4.3 Ekstraksi Daun Katuk .................................................................... 35

4.4 Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol 90% Daun Katuk ................ 35

vii

4.5 Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom ....................................... 36

4.6 Kromatografi Lapis Tipis Hasil Fraksinasi ................................... 37

4.7 Skrining Fitokimia ......................................................................... 39

4.8 Residu Metanol Fraksi Terpenoid ................................................. 40

4.9 Uji Aktivitas Antidislipidemia ...................................................... 41

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................ 46

5.1 Kesimpulan .................................................................................... 46

5.2 Saran .............................................................................................. 46

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 47

LAMPIRAN ......................................................................................................... 52

viii

DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH

Ad libitum : Memberikan makanan dan minuman kepada hewan uji hingga

kondisi kenyang.

ANOVA : Analysis of Variance

Aterosklerosis : Radang akibat pengumpulan lemak di sepanjang dinding

arteri.

BB : Berat Badan

BR-1 : Pakan tikus dengan komposisi yang dapat dilihat pada

lampiran 10.

CHOD-PAP : Cholesterol oxidase - phenol aminophenazone

CMC Na : Carboksimetilselulosa Natrium

Degradasi : Penurunan

GPO-PAP : Glycerol-3-phosphate oxidase - phenol aminophenazone

HDL : High-Density Lipoprotein

IDL : Intermediate-Density Lipoprotein

Katabolisme : Lintasan metabolisme yang merombak suatu substrat kompleks

molekul organik menjadi komponen-komponen penyusunnya.

Kolesterol ester : Produk dari reaksi antara asam lemak dan kolesterol.

LCAT : Lecithin Cholesterol Acylterase

LDL : Low-Density Lipoprotein

Lemak jenuh : Lemak kaya kolesterol, mempunyai ikatan tunggal.

Lipid ampifatik : Lipid yang mengandung bagian yang hidrofobik dan hidrofilik

Lipoprotein : Kompleks antara lipid dengan protein yang berfungsi sebagai

pengangkut lipid di dalam darah.

LSD : Least Significant Difference

Metabolisme : Proses reaksi biokimiawi yang terjadi di dalam sel tubuh

makhluk hidup meliputi anabolisme (penyusunan) dan

katabolisme (penguraian).

p.o. : Per oral

PKL : Pakan Kaya Lemak

ix

Perifer : Terletak di tepi, jauh dari pusat

Sentrifugasi : Proses menggunakan sentrifuge untuk memisahkan padatan

dari cairan, terutama digunakan dalam uji klinis untuk

memproses sampel darah.

Serum : Plasma darah yang dipisahkan dari fibrinogen dan faktor

pembekuan darah lainnya dengan cara memutar darah dalam

sentrifuge.

Simplisia : Bagian tanaman yang belum mengalami pengolahan apapun

kecuali pengeringan.

Sinus orbitalis : Sudut mata

SPSS : Statistical Product and Service Solutions

UV-vis : Ultra Violet-visible

VLDL : Very Low-Density Lipoprotein

WFI : Water for Injection

WHO : World Health Organization

x

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 2.1 Golongan terpenoid berdasarkan jumlah atom karbon .................... 7

Tabel 2.2 Klasifikasi kolesterol total, LDL, HDL, dan trigliserida tikus ........ 15

Tabel 4.1 Kadar air serbuk daun katuk (Sauropus androgynus (L.) Merr) .... 34

Tabel 4.2 Kadar air ekstrak etanol 90% daun katuk (Sauropus androgynus

(L.) Merr) ......................................................................................... 36

Tabel 4.3 Hasil skrining fitokimia fraksi-fraksi hasil pemisahan ekstrak

etanol 90% daun katuk .................................................................. 39

Tabel 4.4 Kadar rata-rata lipid tikus sebelum diberikan perlakuan dan

setelah diberikan perlakuan ............................................................. 42

xi

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Tanaman katuk (a) dan daun katuk (b) ............................................ 7

Gambar 3.1 Skema umum penelitian uji aktivitas antidislipidemia fraksi

terpenoid hasil pemisahan ekstrak etanol 90% daun katuk

(Sauropus androgynous (L.) Merr) .................................................. 19

Gambar 3.2 Skema kerja uji aktivitas antidislipidemia fraksi terpenoid daun

katuk (Sauropus androgynous (L.) Merr) ........................................ 20

Gambar 4.1 Pengamatan profil KLT fraksi secara visual setelah disemprot

H2SO4 10% (a) Pengamatan profil KLT secara visual setelah

disemprot vanilin-asam sulfat (b) .................................................... 38

xii

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1 Hasil Determinasi Tanaman Katuk (Sauropus androgynus (L.)

Merr) .............................................................................................. 52

Lampiran 2 Hasil Skrining Fitokimia Fraksi Hasil Pemisahan Ekstrak Etanol

90% Daun Katuk (Sauropus androgynous (L.) Merr)................... 53

Lampiran 3 Hasil Kromatogram Uji Residu Metanol dalam Fraksi Terpenoid

dengan Metode Kromatografi Gas ................................................ 56

Lampiran 4 Hasil Evaluasi Kelayakan Etik (Ethical Clearance) Hewan Uji ... 60

Lampiran 5 Output Uji Shapiro-Wilk dan Uji Lavene untuk Uji Distribusi

Normal dan Homogenitas .............................................................. 61

Lampiran 6 Output Uji Kruskal-Wallis ............................................................. 64

Lampiran 7 Output Uji Mann-Withney ............................................................. 65

Lampiran 8 Output Uji Mann-Withney Selisih Kadar Lipid ............................. 70

Lampiran 9 Perhitungan Dosis Simvastatin ...................................................... 72

Lampiran 10 Komposisi Pakan BR-1 ................................................................. 73

xiii

ABSTRAK

Daun katuk (Sauropus androgynus (L.) Merr) diketahui memiliki aktivitas

sebagai antidislipidemia. Senyawa kimia yang terkandung dalam ekstrak etanol

90% yaitu alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, dan terpenoid. Salah satu

kandungan kimia yang diduga memiliki aktivitas sebagai antidislipidemia yaitu

terpenoid. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui pengaruh pemberian

fraksi terpenoid daun katuk (Sauropus androgynus (L.) Merr) terhadap profil lipid

darah tikus putih jantan galur wistar yang diinduksi pakan kaya lemak.

Penelitian ini meliputi beberapa tahap yaitu: ekstraksi, fraksinasi dengan

kromatografi kolom lambat dengan pelarut campur kloroform:metanol (9:1-1:9

v/v), identifikasi kandungan kimia dengan KLT, skrining fitokimia, dan induksi

pakan kaya lemak selama 30 hari sebelum perlakuan. Kelompok penelitian dibagi

menjadi 5 kelompok yang terdiri dari kontrol negatif (CMC Na 0,1%), kontrol

positif (simvastatin 1,8 mg/kgBB), dan perlakuan yang diberikan dua variasi dosis

fraksi terpenoid daun katuk yaitu 50 mg/kgBB dan 100 mg/kgBB selama 21 hari

dengan pembawa CMC Na 0,1%. Pengambilan darah dilakukan sebelum dan

setelah perlakuan. Pengukuran kadar kolesterol total, trigliserida, LDL, dan HDL

menggunakan reaksi enzimatis. Data yang diperoleh diolah secara statistik.

Hasil pemisahan menggunakan metode kromatografi kolom lambat

didapatkan 7 fraksi terpenoid. Fraksi terpenoid daun katuk pada dosis 50mg/kgBB

dan 100mg/kgBB memiliki pengaruh yang baik terhadap profil lipid dalam

menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida, dan LDL serta meningkatkan

kadar HDL (p<0,05).

Kata kunci: Sauropus androgynus (L.) Merr, terpenoid, kromatografi kolom

lambat, profil lipid

xiv

ABSTRACT

Katuk leaves (Sauropus androgynus (L.) Merr) is known to have activity as

antidislipidemia. Chemical constituent that contained in the 90% ethanol extract

of katuk leaves such as alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, dan terpenoid. One of

the chemical constituents are thought to have activity as antidislipidemia is

terpenoid. The study was aimed to determine the effect of terpenoid fraction of

katuk leaves (Sauropus androgynus (L.) Merr) on blood lipid profile of wistar

strain male rats which induced high-fat rat food.

This study includes several stages: extraction, fractionation by column

chromatography with mobile phase gradient system solvent mixture

chloroform:methanol (9:1-1:9 v/v), identification chemical constituent with KLT,

phytochemical screening, and high-fat rat food induction for 30 days before

treatment. Research groups were divided into 5 groups consisted of negative

group (CMC Na 0,1%), positive control (simvastatin 1,8 mg/kgBB), and treatment

with 2 dosages variation of terpenoid fraction katuk leaves which were 50

mg/kgBB and 100 mg/kgBB for 21 days with CMC Na 0,1% as the carrier. Blood

sampling was done before and after the treatment. Measurement of total

cholesterol level, triglyceride, LDL, and HDL were using enzymatic reaction. The

obtained data were processed statistically.

Result of separation using column chromatography obtained 7 fractions.

Terpenoid fraction of katuk leaves in a dose 50 mg/kgBB and 100 mg/kgBB have

good effect in reducing total cholesterol level, triglycerides, LDL, and also

increased HDL level (p < 0,05).

Keyword: Sauropus androgynus (L.) Merr, terpenoid, column chromatography,

lipid profiles