Pemeriksaan Laboratorium Parasit

63
PEMERIKSAAN LABORATORIUM DALAM PENEGAKAN DIAGNOSA PENYAKIT PARASITIK DR. BETTA KURNIAWAN, S.KED, M.KES

Transcript of Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Page 1: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

PEMERIKSAAN LABORATORIUM

DALAM PENEGAKAN DIAGNOSA

PENYAKIT PARASITIK

DR. BETTA KURNIAWAN, S.KED, M.KES

Page 2: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

TEKNIK PEMERIKSAAN

PARASIT PROTOZOA

Page 3: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MATERI MATERI

� METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA USUS- Pemeriksaan secara natif- Modifikasi Mertiolat-Iod-Formalin (MIF)

� METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA DARAH- Sediaan darah apus dengan pewarnaan Giemsa- Tetes darah tebal dengan pewarnaan Giemsa

� PEMERIKSAAN Trichomonas vaginalis� CARA PEMBUATAN PREPARAT PERMANEN (FIXED

PREPARAT)- Parasit darah- Trichomonas vaginalis- Ameba dengan pewarnaan menurut metoda Heidenhein

� PEMBUATAN LARUTAN-LARUTAN

� METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA USUS- Pemeriksaan secara natif- Modifikasi Mertiolat-Iod-Formalin (MIF)

� METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA DARAH- Sediaan darah apus dengan pewarnaan Giemsa- Tetes darah tebal dengan pewarnaan Giemsa

� PEMERIKSAAN Trichomonas vaginalis� CARA PEMBUATAN PREPARAT PERMANEN (FIXED

PREPARAT)- Parasit darah- Trichomonas vaginalis- Ameba dengan pewarnaan menurut metoda Heidenhein

� PEMBUATAN LARUTAN-LARUTAN

Page 4: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

BAHAN DAN C

ARA MELAKSANAKAN

PEMERIKSAAN

BAHAN DAN C

ARA MELAKSANAKAN

PEMERIKSAAN

(1). Pemeriksaan secara natif(1). Pemeriksaan secara natif

Kegunaan :

Melakukan pemeriksaan secara cepatKegunaan :

Melakukan pemeriksaan secara cepat

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA USUSMETODA PEMERIKSAAN PROTOZOA USUS

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

- Bentuk trofozoit ameba, menggunakan larutan eosin 2%- Bentuk trofozoit ameba, menggunakan larutan eosin 2%

- Bentuk kista dan inti ameba dengan larutan lugol

(2% larutan Iodium + 3% larutan Iodkali)- Bentuk kista dan inti ameba dengan larutan lugol

(2% larutan Iodium + 3% larutan Iodkali)

Page 5: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

• Dengan sebuah lidi, ambil tinja sebesar biji kacang polong, taruh di atas gelas obyek

• Bubuhi larutan NaCl physiologis/lugol/ larutan eosin 2% di atasnya

Cara membuat preparat :

• Dengan lidi tadi, ratakan dahulu sebelum diberi gelas penutup

• Periksa di bawah mikroskop

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA USUSMETODA PEMERIKSAAN PROTOZOA USUS

(1). Pemeriksaan secara natif

Page 6: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Zat yang dipergunakan :Larutan dasar (1) :– 250 ml aquadest

– 200 ml tinctur of merthiolate– 25 ml formaldehyde

Larutan dasar (2) : – lugol 5 % (tidak boleh disimpan > 3 minggu)

Kedua larutan disimpan dalam botol berwarna coklat

(2). Modifikasi Metoda Mertiolat-Iod-Formalin (MIF)

Kegunaan :Baik untuk diagnosa Ameba dan Giardia dalam tinja

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA USUS

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 7: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Cara membuat preparat MIF

5 ml larutan dasar (1) + 0,5 ml larutan dasar (2)

5 ml LarutanDasar (1)

0,5 ml Larutan Dasar (2)

5 gr tinja

Masukkan 0,5 gr tinja, diaduk sampai homogen

larutan tinja

disaring

Tabungsetrifuge

Saring dengan dua lapis kain gas ke dalam tabung sentrifuge.

+ 7 ml eter40 C

Tambah 7 ml ether (temperatur 4o C)

ditutup+ kocok

• Tabung tutup rapat dengan sumbat karet, kocok keras-keras, campuran benar-benar homogen.

tutupdibuka

• Sumbat dibuka dan dibiarkan selama 2 menit.

Disetrifusi1menit

• Disentrifusi 1 menit (1.500 - 3.000) putaran/menit• Cairan dibuang, endapan diambil dengan pipet,

taruh di atas gelas obyek, tutup gelas penutup

Page 8: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

• Bersifat asam (acid)

• Bau busuk (foul smelling)

• Lendir lebih sedikit daripada disentri basiler dan tidak begitu lengket

• Darah atau tanpa darah (darah mungkin didapat bersamaan dengan tinja yang padat)

• Pada beberapa kasus terdapat pengeluaran mukosa usus

• Bersifat asam (acid)

• Bau busuk (foul smelling)

• Lendir lebih sedikit daripada disentri basiler dan tidak begitu lengket

• Darah atau tanpa darah (darah mungkin didapat bersamaan dengan tinja yang padat)

• Pada beberapa kasus terdapat pengeluaran mukosa usus

CIRI TINJA MENGANDUNG AMEBA MAKROSKOPIS

Sumber :A Colour Atlas of Clinical Parasitology. Tomio Yamaguchi. Alih Bahasa : Lesmana Padmasutra, dkk.

Tinja penderita disentri ameba, banyak ditemukan trofozoit

Sumber : Color Atlas of Medicine and Parasitology. 1977. W. Peters & H.M. Gillers

Tinja penderita disentri ameba, longgar, berisi lendir dan darah bercampur tinja,harus dibedakan dengan tinja disentri basiler

Page 9: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

CIRI TINJA MENGANDUNG AMEBA MIKROSKOPIS

Kristal Charcot-Leyden(Kristal hasil penguraian eosinofil)

Kristal Charcot-LeydenSumber : Atlas of Medical Parasitology. Prayong Radomyos, dkk.Sumber : Atlas Parasitologi Kedokteran, Zaman P.

Alih Bahasa : Anwar C.; Mursal Y.

• Bakteri cukup banyak

• Entamoeba histolytica (+) mengandung eritrosit

• Eritrosit terdapat dalam bentuk reuleaux

• Kristal Charcot Leyden (tidak spesifik untuk disentri ameba karena terlihat pada parasit lain misalnya Strongyloides stercoralis) - hasil penguraian eosinofil

• Nanah lebih sedikit daripada disentri basiler, tanpa adanya infeksi sekunder

• Makrofag dalam disentri basiler menyerupai Entamoeba histolytica tetapi inti dan pseudopodi berbeda

• Kista dalam karier dan kasus ringan

• Bakteri cukup banyak

• Entamoeba histolytica (+) mengandung eritrosit

• Eritrosit terdapat dalam bentuk reuleaux

• Kristal Charcot Leyden (tidak spesifik untuk disentri ameba karena terlihat pada parasit lain misalnya Strongyloides stercoralis) - hasil penguraian eosinofil

• Nanah lebih sedikit daripada disentri basiler, tanpa adanya infeksi sekunder

• Makrofag dalam disentri basiler menyerupai Entamoeba histolytica tetapi inti dan pseudopodi berbeda

• Kista dalam karier dan kasus ringan

Page 10: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Preparat apus darah pewarnaan GIEMSA

Kegunaan :Untuk memeriksa protozoa darah, misal : Plasmodium,

Trypanosoma, Babesia dan lain-lain

Dilakukan dua tahap :(1). Membuat apus darah

(2). Melakukan pewarnaan

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA DARAH

Page 11: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

• Permukaan kulit hapus dengan kapas alkohol 70%• Tusuk dengan vaccinostyle steril• Ambillah tetes darah kedua pada sebuah gelas obyek

• Bagian tepi gelas obyek lain tempelkan pada tetes darah• Diamkan, tetes darah melebar sepanjang tepi gelas obyek• Geserkan dengan cepat preparat gelas obyek (sudut � 45o)

sepanjang permukaan gelas obyek pertama, terbentuk lapisan darah tipis. Makin kecil sudutnya, darah apus makin tipis.

• Preparat diberdirikan, biarkan kering, jaga jangan kena debu atau dimakan insek dan lain-lain.

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA DARAH

Preparat apus darah pewarnaan GIEMSA

(1). Pembuatan apus darah

Page 12: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA DARAH

Preparat apus darah pewarnaan GIEMSA

(2). Melakukan pewarnaan

Fiksir metil alkohol (3-5)

menit

Warnai dengan standar Giemsa 45 menit

Cuci air ledengperlahan

KERINGKAN

Page 13: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA DARAH

Preparat tetes darah tebal denganpewarnaan GIEMSA

Kegunaan :Pemeriksaan protozoa darah secara cepat

(dapat dilakukan pada pemeriksaan masal)

Dilakukan dua tahap :(1). Membuat tetes tebal

(2). Melakukan pewarnaan

Page 14: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA DARAH

(1). Pembuatan tetes tebal

Preparat tetes darah tebal denganpewarnaan GIEMSA

Pengambilan darah sama dengan pembuatan apus darah (1-2) tetes darah teteskan pada sebuah gelas obyek Tetes darah lebarkan, membentuk lingkaran dengan

diameter 1 - 1,5 cm Biarkan kering, jaga jangan kena debu atau insek

Page 15: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA DARAH

(2). Melakukan pewarnaan

KERINGKAN

Warnai dengan standar Giemsa 45 menit

Cuci air ledengperlahan

TIDAK DIFIKSASI !!!

Preparat tetes darah tebal denganpewarnaan GIEMSA

TIDAK DIFIKSASI !!!TIDAK DIFIKSASI !!!TIDAK DIFIKSASI !!!TIDAK DIFIKSASI !!!TIDAK DIFIKSASI !!!TIDAK DIFIKSASI !!!TIDAK DIFIKSASI !!!TIDAK DIFIKSASI !!!

Page 16: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

� APUS DARAH– Plasmodium sp. morfologi dan stadium jelas– Eritrosit utuh (difiksasi)– Pembuatan preparat tidak dapat cepat– Untuk infeksi sedang dan berat

� TETES DARAH TEBAL– Plasmodium sp. morfologi tidak jelas– Eritrosit lisis (tidak difiksasi), terlihat stroma-stroma dari eri

yang lisis– Pembuatan preparat cepat (dapat untuk pemeriksaan masal)– Dapat dipakai pada infeksi ringan

KELEBIHAN DAN KELEMAHAN APUS DARAHDAN TETES DARAH TEBAL

METODA PEMERIKSAAN PROTOZOA DARAH

Page 17: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

PEMERIKSAAN Trichomonas vaginalisPEMERIKSAAN Trichomonas vaginalis

Ada 2 cara :(1). Pemeriksaan langsung

(2). Kultur

Ada 2 cara :(1). Pemeriksaan langsung

(2). Kultur

Pemeriksaan langsung ada 2 cara :(1). Sediaan basah

(2). Diberi pewarnaan

Bahan Pemeriksaan :(1). Wanita : sekret vagina, sekret urethra

(menggunakan vaginal spikulum)(2). Pria : sekret urethra, sekret prostat, urin

disentrifusi

Page 18: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

PEMERIKSAAN LANGSUNG

Alat yang dipergunakan :- Tabung reaksi berisi glukosa 5% dalam

garam fisiologis- Lidi kapas

Lidi kapas

Glukosa 5%

PEMERIKSAAN Trichomonas vaginalisPEMERIKSAAN Trichomonas vaginalis

Page 19: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

PEMBUATAN PREPARAT PERMANENPEMBUATAN PREPARAT PERMANEN

Dibicarakan :(1). Preparat permanen pada parasit darah

(2). Preparat permanen pada T. vaginalis

(3). Preparat permanen pada ameba

(metoda Heidenhein)

Page 20: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

(1). Preparat permanen pada parasit darah

Merupakan kelanjutan dari pembuatan preparat

protozoa darah, dilanjutkan sebagai berikut :

Sesudah diwarnai, lanjutkan dengan

memberi canada balsam

akhirnya ditutup dengan kaca penutup

PEMBUATAN PREPARAT PERMANENPEMBUATAN PREPARAT PERMANEN

Page 21: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

KulturT. vaginalis

BIARKAN 30 MENIT

6 tetesOSO4 2%

5 ml medium

(2). Preparat permanen pada T. vaginalis

1-2 tetesserum drh

Tabungsentrifuge

SENTRIFUSI 3000 RPM(5-10 MENIT)

CUCI DENGANLAR. RINGER

(2-3) x

1 tetessuspensi

Gelasobyek

Buat sediaanapus

FIKSASI DENGAN METANOL(5-10 menit)

WARNAI GIEMSA(10-20) menit

PEMBUATAN PREPARAT PERMANENPEMBUATAN PREPARAT PERMANEN

Page 22: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Sediaan apus di atas

gelas obyek

(3). Preparat permanen pada amoeba(metoda Heidenhein)

Fiksasi sublimat

alkohol 20 menit

Dalam iodin

alkohol 30 menit

Alkohol 70%

1 menit

Cuci

dengan air

“Mordanting”

4 % amonium ferric alum

Cuci

dengan air

Warnai

Heidenhein’s

Haematoxylin

Cuci

2% ammonium

ferric alum

1-4 menit

Cuci

dengan air

30 menit

Cuci

melalui seri

alkohol, xylol

“Mounting”

canada balsam

Cuci

dengan air

PEMBUATAN PREPARAT PERMANENPEMBUATAN PREPARAT PERMANEN

Page 23: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Dibicarakan :(1). Larutan Buffer

(2). Field’s Stain

(3). Giemsa’s Stain

PEMBUATAN LARUTAN-LARUTANPEMBUATAN LARUTAN-LARUTAN

(1). Larutan Buffer

Terdiri atas :

0, 49 gr. KH2PO4

1,14 gr Na2HPO4

1.000 ml. aquadestSelesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 24: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Larutan A :0,80 gr. Methylene Blue0,50 gr. Azure I5,00 gr. Na2HPO4 anhydrous

6,25 gr. KH2PO4 anhydrous

5.000 ml aquadest

Terdiri atas 2 larutan :a. Larutan Ab. Larutan B

(2). Field’s Stain

Larutan B :1,00 gr. Eosin0,50 gr. Na2HPO4 anhydrous

6,25 gr. KH2PO4

5,00 ml aquadest

PEMBUATAN LARUTAN-LARUTANPEMBUATAN LARUTAN-LARUTAN

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 25: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

0,6 gr Giemsa’s stain certified powder50,0 ml. Methyl alkohol absolute, acetone free50,0 ml. Glycerine, cp

(3). Giemsa’s Stain

PEMBUATAN LARUTAN-LARUTANPEMBUATAN LARUTAN-LARUTAN

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 26: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

TEKNIK PEMERIKSAAN

PARASIT CACING

Page 27: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

TEKNIK PEMERIKSAAN LABORATORIUM PARASIT CACING

TEKNIK PEMERIKSAAN LABORATORIUM

DIPILIH BERDASARKAN

HIDUP DI DALAM

USUS

HIDUP DI DALAM

DARAH

BAHAN PEMERIKSAAN :

TINJA

BAHAN PEMERIKSAAN :

DARAH

Page 28: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MAKROSKOPIK

MIKROSKOPIK

TEKNIK PEMERIKSAAN PARASIT CACING PADA TINJA

TEKNIK PEMERIKSAAN PARASIT CACING PADA TINJA

KUALITATIF

KUANTITATIF

Bau - amis A. lumbricoides

Ada/tidak nematoda keluar spontan

Page 29: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIK

KUALITATIF

METODA STOLL

METODA KATO - KATZ

KUANTITATIF

TEKNIK PEMERIKSAAN PARASIT CACING PADA TINJA

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

METODA LANGSUNG (DIRECT SLIDE)

METODA APUNG (FLOTATION METHOD)

MODIFIKASI MERTIOLAT IOD FORMALIN (MIF)

METODA SELOTIP (CELLOTAPE METHOD)

METODA KONSENTRASI

METODA KATO

Page 30: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Cepat Berguna untuk infeksi

berat Larutan yang

dipergunakan :- NaCl Fisiologis (0,9%), atau- Eosin 2%

METODA LANGSUNG (DIRECT SLIDE)

MIKROSKOPIKKUALITATIF

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 31: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA LANGSUNG (DIRECT SLIDE)

MIKROSKOPIKKUALITATIF

Teteskan 1-2 tetes NaCl 0,9% atau Eosin 2% pada objek glass

Dengan lidi, ambil tinja sedikit, taruh pada larutan di atasDengan lidi diratakan/dilarutkanTutup dengan cover glassPeriksa di bawah mikroskop 40 x

atau 100 x1-2 tetes

NaCl 0,9%atau

eosin 2%

Taruh tinja pada larutandi atas gelas objek

Ratakan denganlidi

Tutup dengan cover glassSelesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 32: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

METODA APUNG (FLOATATION METHOD)

Berdasarkan BJ telur < BJ larutan

Berguna untuk infeksi ringan

Larutan yang dipergunakan :- NaCl jenuh, atau- Gula jenuh

TERDAPAT 2 CARADENGAN DISENTRIFUSI

TANPA DISENTRIFUSI

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 33: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

TANPA DISENTRIFUSI

NaCl jenuh/gula jenuhTinja

Gelaspengaduk

Ose

20 menit

10 gr tinja campur 200 ml NaCl jenuh, aduk sampai larutBiarkan 20 menit, larutan

permukaan ambil dengan oseTaruh larutan dari ose ke atas

permukaan objek glassTutup dengan cover glassLihat di bawah mikroskop

Ambil dengan osetaruh di atas objek glas

10 gr. tinja + 200 cc NaCl jenuh

Tutup cover glass

METODA APUNG (FLOATATION METHOD)

Page 34: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

DENGAN DISENTRIFUSI

NaCl jenuh/gula jenuhTinja

Gelaspengaduk

Saring

Sentrifusi 100 x/mnt5 menit

10 gr tinja campur 200 ml NaCl jenuh, aduk sampai larutSaring dengan saringan tehTuangkan ke dalam tabung

sentrifusiSentrifusi 100 x per-menit selama 5

menitDari permukaan ambil larutan

dengan ose10 gr. tinja

+ 200 cc NaCl jenuh

METODA APUNG (FLOATATION METHOD)

Page 35: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

DENGAN DISENTRIFUSI

Tutup dengan cover glassLihat di bawah mikroskopTaruh larutan di atas kaca objek

Taruh larutan di ataskaca objek Tutup cover glass

METODA APUNG (FLOATATION METHOD)

Page 36: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

Untuk mengetahui adanya telur cacing, Ameba dan Giardia lamblia

Larutan Dasar 1 :- 250 ml aquadest- 200 ml thimerosal (1:1.000)- 25 ml formalin- 5 ml glycerin

Larutan Dasar 2 :- Larutan lugol 5% yang segar

MODIFIKASI MERTIOLAT IODIN FORMALIN (MODIFIKASI MIF)

Baik untuk pewarnaan sekaligus pengawetan kista protozoa usus dan telur cacing

Page 37: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

di (+) 7 ml. ether(40 C)

MIKROSKOPIKKUALITATIF

MODIFIKASI MERTIOLAT IODIN FORMALIN (MODIFIKASI MIF)

Gelaspengaduk

5 ml lar. Dasar 10,5 ml lar. Dasar 2

0,5 gr tinja

Saring KOCOKsampai campuran

homogen

Sentrifusi 1.000-3.000 x/mnt1 menit

5 ml lar. dasar 1 (+) 0,5 ml lar. dasar 2 (+) 0,5 gr tinja, aduk homogen

Saring dengan 2 lapis kain gas ke dalam tabung sentrifusiTambah 7 ml ether (40 C)Tabung tutup sumbat karet, kocok keras-

keras sampai campuran homogenSumbat dibuka, biarkan 2 menit, sentrifusi 1 menit (1.000-3.000 putaran per-menit)

Page 38: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

Tutup dengan cover glassLihat di bawah mikroskopTeteskan endapan ke ataskaca objek

MODIFIKASI MERTIOLAT IODIN FORMALIN (MODIFIKASI MIF)

Supernatan dibuangambil endapan dengan pipet

Supernatan buang,ambi endapandengan pipet

Teteskan di atasgelas objek

Tutup cover glass

Page 39: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

METODA SELOTIP (CELLOTAPE METHOD)

Untuk pemeriksaan telur Enterobius vermicularis

Anak 1-10 tahun Dilakukan pagi sebelum cebok/mandi Plester plastik bening (2 x 1,5 cm) ditempelkan

ke kulit sekitar liang dubur Plester tekan-tekan, kemudian angkat perlahan-

lahan Tempelkan pada gelas objek, lihat mikroskop

Telur menempel pada daerah perianal sehingga

jarang di dapatkan bersama tinja (5 %), untuk

menemukan parasit ini diperlukan cara “Scotch

Adhesive Tape Swab” dari Graham atau metoda

selotip

Kriteria beratnya infeksi berdasarkan jumlah telur yang ditemukan per-lapang pandangan :- (1-5) telur +- (6-10) telur ++- (11-20) telur +++- >21 telur ++++

Page 40: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

METODA SELOTIP (CELLOTAPE METHOD)

Page 41: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

METODA KONSENTRASI

Praktis, sederhana, untuk pemeriksaan telur cacing pada tinja dengan cara sebagai berikut :- 1 gr tinja masukkan ke dalam tabung reaksi, beri

aquades, aduk sampai homogen, masukkan ke dalam tabung sentrifusi

- Sentrifusi dengan kecepatan 3.000 rpm selama 1 mnt- Supernatan dibuang, sedimen ambil dengan pipet- Teteskan pada gelas objek, tutup dengan cover glass

Page 42: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Larutan tinjadimasukkan ke dalam tabung sentrifusi

MIKROSKOPIKKUALITATIF

Sentrifusi 3.000 x/mnt,1 menit

1 gr tinja, tambah aquades, aduk homogen

Larutan tinja masukkan ke dalam tabung sentrifusi

Supernatan dibuang, endapan diambil dengan pipet

Sentrifusi 1 menit (3.000 putaran per-menit)

METODA KONSENTRASI

Aduk sampai homogen

1 gr tinja

Batangpengaduk

Aquades

Page 43: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

Tutup dengan cover glassLihat di bawah mikroskopTeteskan endapan ke ataskaca objek

METODA KONSENTRASI

Page 44: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

TEKNIK SEDIAAN TEBAL (METODA KATO)

Praktis, sederhana dan murah Dapat dipakai pada pemeriksaan masal Tinja yang dipergunakan banyak sehingga lebih

banyak telur yang diperiksa Morfologi telur cukup baik (jelas)

Bahan : Larutan

- 100 ml aquades/fenol 6%- 100 ml glycerin (supaya kotoran tinja jadi jernih)- 1 ml larutan hijau malachit (supaya mata tidak silau)

Selofan, 2,5 x 3 cm, rendam dalam larutan > 24 jam

Teknik :- Ambil 20-50 mg tinja (sebesar kacang merah)- Letakkan di atas kaca objek, ratakan- Tutup dengan selopan, tekan sehingga tinja rata

dan menyebar di bawah selopan- Keringkan cairan berlebihan dengan kertas saring- Biarkan 20-30 menit- Periksa di bawah mikroskop

Page 45: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUALITATIF

TEKNIK SEDIAAN TEBAL (METODA KATO)

100 bag. Aquades/fenol 6%100 bag. Glycerin1 bag. Lar. Hijau malachit

Selofan dipotong2,5 x 3 cm

Dimasukkan(direndam)

Rendam

> 24 jam

20-50 grtinja

Selofan yangsudah direndam

Tinja

Page 46: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Larutan yang dipergunakan :- NaOH 0,1 N (pelarut tinja) atau- KOH 10%

Baik untuk infeksi berat dan sedang

Kurang baik untuk infeksi ringan

METODA STOLL

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

Page 47: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

56 m l60 m l

56 m l60 m l

Butir Gelas

KOCOK

Diamkan 1 malam

ATAU cukup 3-4 jam tapi dikocok lebih lama

56 m l60 m l

Tinja

Larutan NaOH 0,1N

METODA STOLL

56 ml 60 ml

Page 48: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

Kocok dan ambil 0,15 ml

56 m l60 m l

METODA STOLL

Page 49: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

PENGHITUNGAN NaOH = 56 ml, tinja 4 ml ~ 4gr 4 gr tinja dalam 60 ml Atau 1 gr tinja dalam 15 ml Volume larutan tinja 0,15 ml

ditemukan y telur Maka volume 15 ml ditemukan y

x 100 (~ 1 gr tinja)

RUMUS :

Jumlah telur dalam 1 gram tinja = Jumlah telur yang terlihat (miroskopik) x 100

METODA STOLL

Page 50: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

TINGKAT INFEKSI MENURUT JUMLAH TELUR DALAM TIAP GRAM TINJA DAN JUMLAH CACING

RINGAN SEDANG BERAT

Kurang 7.000 7.000-35.000 lebih 35.000

A. lumbricoides

5/kurang 6-25 lebih 25

RINGAN SEDANG BERAT

A. duodenale

Kurang 3.000 3.000-10.000 lebih 10.000

20/kurang 21-100 lebih 100

RINGAN SEDANG BERAT

N. americanus

Kurang 2.000 2.000-7.000 lebih 7.000

50/kurang 51-200 lebih 200

JUMLAH CACINGJUMLAH TELUR PER-GRAM TINJATINGKAT INFEKSIINFEKSI OLEH

SUMBER : PARASITIC DISEASES PROGRAME. WHO. GENEVA, 1981

METODA STOLL

Page 51: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA KATO-KATZ

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

ALAT :- Kaca objek- Selotip, tebal 40 m, ukuran 3 x 3 cm- Karton tebal, diberi lubang dengan

volume tertentu untuk mencetak tinja seberat 30 mg

- Lidi, kertas minyak dan kawat kasa

Larutan Malachite-Green :- 100 ml aquades- 100 ml glycerin (supaya kotoran tinja jadi

jernih)- 1 ml larutan hijau malachit (supaya mata

tidak silau) Selotip rendam dalam larutan >

24 jam

Page 52: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA KATO-KATZ

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

TATA KERJA :- Menyaring tinja. Letakkan 5 gr tinja di atas

kertas minyak, kawat kasa diletakkan di atasnya lalu tekan

- Mencetak tinja. Di atas kaca objek letakkan karton berlubang, tinja yang telah disaring dicetak sebesar lubang karton (berat tinja diketahui : 30 mg)

- Membuat preparat. Karton angkat, tinja tutup dengan selotip, sediaan tekan - ratakan

- Biarkan pada suhu kamar 30 menit- Lihat di bawah mikroskop

Page 53: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA KATO-KATZ

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

MENYARING TINJA

Kertasminyak

Kawat kasa

TEKAN

Tinja (5 gr)

TEKAN

Kawat kasa

Tinja (5 gr)

DARISAMPING

Kaca objek

Kartonberlubang

Tinja yangtelah disaring

- Letakkan 5 gr tinja di atas kertas minyak, kawat kasa diletakkan di atasnya lalu tekan

Dicetak

- Di atas kaca objek di letakkan karton berlubang, tinja yang sudah disaring di cetak pada lubang karton

- Karton di angkat- Tinja ditutup

selotip yang telah direndam

- Tekan, ratakan- Biarkan 30 mnt- Lihat di

mikroskop

Tinja yangdicetak

Gelasobjek

Selotip yangtelah direndam

LIHAT DI BAWAHMIKROSKOP

MENCETAK TINJA MEMBUAT PREPARAT

Page 54: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA KATO-KATZ

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

SUZUKI dkk. :C = jumlah telur yang didapat dalam preparatU = berat tinja yang dipakai (mg)

JTPG = Jumlah Telur Per Gram tinja

JTPG = 1.000 x X = X x 23Y

KOBAYASHI (1980) : (1-9) : + (10-99) : ++ (100-999) : +++ >1.000 : ++++

WHO (1981) PRODUKSI TELUR PER-HARI :

A. lumbricoides : 200.000 A. doudenale : 10.000-25.000 N. americanus : 5.000-10.000

BERAT TINJA PER-HARI Anak : 70 gram Dewasa : 2 x anak

Page 55: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA SEDIMENTASI FORMOL ETHER(RITCHIE)

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

(0,5 ml tinja) + (1-2 ml aquades), kocok, + (10-12 ml aquades), kocok

Saring Sentrifusi 1.000 rpm, 1 menit + (1 ml formalin 10%) + (formalin 10% sampai

volume 8 ml), diamkan 10 menit + (3ml ether), kocok 15-20 detik Sentrifusi 2.000 rpm, 1-2 menit Supernatan dibuang, sedimen pindahkan ke

kaca objek, lihat di bawah mikroskop

Page 56: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

(0,5 ml tinja) + (1-2 ml aquades), kocok, + (10-12 ml aquades), kocok

KOCOK

0,5 ml. tinja

1-2 ml. aquades

KOCOK

10-12 ml. aquades

SARING

SENTRIFUSI1.000 rpm, 1 menit

Saring Sentrifusi 1.000 rpm, 1 menit

METODA SEDIMENTASI FORMOL ETHER(RITCHIE)

Page 57: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

MIKROSKOPIKKUANTITATIF

+ (1 ml formalin 10%) + (formalin 10% sampai volume 8 ml), diamkan 10 menit

DIAMKAN(10 menit)

3 ml. ether

1 ml. Formalin 10%+ Formalin 10% sampai

volume 8 ml

KOCOK(15-20 detik)

SENTRIFUSI2.000 rpm, 1-2 menit

+ (3ml ether), kocok 15-20 detik

Sentrifusi 2.000 rpm, 1-2 menit

Supernatan dibuang, sedimen pindahkan ke kaca objek, lihat di bawah mikroskop

METODA SEDIMENTASI FORMOL ETHER(RITCHIE)

Page 58: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA PEMBIAKAN LARVAMENURUT BAERMANN

TEKNIK PEMERIKSAANSTADIUM LARVA

KEGUNAAN Untuk memeriksa larva cacing

tambang dalam tanah Untuk pembiakan larva dari tinja

Page 59: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

METODA PEMBIAKAN LARVAMODIFIKASI HARADA - MORI

TEKNIK PEMERIKSAANSTADIUM LARVA

Untuk menentukan dan mengidentifikasi larva infektif cacing tambang : Strongyloides stercoralis Trichostrongylus sp

Telur cacing berkembang menjadi larva infektif pada kertas saring basah

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 60: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

PADA TINJA PENDERITA YANG SUDAH DIOBATI DILAKUKAN :(1) Pemeriksaan Kualitatif

(2) Pemeriksaan Kuantitatif

TEKNIK PEMERIKSAANCACING DEWASA

Semua tinja yang ditampung dalam pispot dimasukkan ke dalam gelas piala, larutkan dengan air, kocok

Saring dengan saringan kawat halus, kotoran dalam sarimgan siram air ledeng sehingga cacing tertinggal dalam saringan

Tampung dalam petri-dish besar, campur air Periksa dengan loupe di atas meja hitam, hitung Identifikasi di bawah mikroskop

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 61: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

DENGAN MENGGUNAKAN LARUTAN FORMALIN 3,5 % ATAU 4%

CARA PENGAWETAN DAN PENYIMPANANTELUR DAN CACING DEWASA DALAM TINJA

Cara pembuatan larutan formalin 3,5% atau 4% :- 1 bagian larutan formalin 35% atau 40% dicampur

dengan 9 bagian air ledeng, masukkan ke dalam botol tertutup

Tinja dimasukkan ke dalam botol di atas dan tutup rapat

Untuk organ yang terserang penyakit parasit, sebelum dimasukkan ke dalam botol, cuci dulu sampai bersih

Selesai PenayanganKlik Tombol “Esc”

Page 62: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

TERMASUK KE DALAM KELOMPOK FILARIA

CACING YANG HIDUP DI DALAM DARAH(BAHAN PEMERIKSAAN DARAH)

CARA LANGSUNG Darah diambil dari jari tangan Sediaan darah segar

- Kualitatif- Menentukan adanya mikrofilaria pada darah tepi- Tidak untuk identifikasi spesies

Sediaan darah tebal- Kuantitatif- Diukur darah yang keluar dari jari dengan

mikropipet (160 m), buat tetes tebal

CARA KONSENTRASI Diambil darah vena Lebih pekak daripada cara langsung

Page 63: Pemeriksaan Laboratorium Parasit

Alhmadulillah...