PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA … Awal.pdfStruktur gigi beserta jaringan periodontal ......

18
TESIS PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA SULKUS GINGIVA TIKUS YANG MENGALAMI PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN JUMLAH SEL FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN PERIODONTAL LEBIH TEBAL I GUSTI AGUNG SRI PRADNYANI 1290761001 PROGRAM MAGISTER PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS UDAYANA DENPASAR 2016

Transcript of PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA … Awal.pdfStruktur gigi beserta jaringan periodontal ......

TESIS

PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA

SULKUS GINGIVA TIKUS YANG MENGALAMI

PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN JUMLAH SEL

FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN

PERIODONTAL LEBIH TEBAL

I GUSTI AGUNG SRI PRADNYANI

1290761001

PROGRAM MAGISTER

PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

2016

PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA

SULKUS GINGIVA TIKUS YANG MENGALAMI

PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN JUMLAH SEL

FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN

PERIODONTAL LEBIH TEBAL

Tesis Untuk Memperoleh Gelar Magister

pada Program Magister, Program Studi Ilmu Biomedik

Program Pascasarjana Universitas Udayana

I GUSTI AGUNG SRI PRADNYANI

NIM : 1290761001

PROGRAM MAGISTER

PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

2016

LEMBAR PENGESAHAN

TESIS INI TELAH DISETUJUI

PADA TANGGAL 2 AGUSTUS 2016

Mengetahui

Pembimbing I

Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M. Repro

NIP 194612311969021001

Pembimbing II

Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M.Repro

NIP 196404171996011001

Ketua Program Studi Ilmu Biomedik

Program Pascasarjana

Universitas Udayana

Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc, Sp.GK

NIP. 195805211985031002

Direktur Program Pascasarjana

Universitas Udayana

Prof. Dr. dr. A. A. Raka Sudewi, Sp.S (K)

NIP 19590215198510 2001

Tesis Ini Telah Diuji

Tanggal 2 Agustus 2016

Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK RektorUniversitas Udayana,

No : 3457/UN14.4/HK/2016, Tanggal 22 Juli 2016

Ketua : 1. Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M.Repro

Anggota :

2. Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M. Repro

3. Prof. dr. Ketut Tirtayasa, MS., AIF

4. Dr.dr. I Wayan Putu Sutirta Yasa, M.Si

5. dr. I Gusti Ngurah Mayun, Sp. HK

UCAPAN TERIMA KASIH

Pertama-tama perkenankanlah penulis memanjatkan puji syukur ke

hadapan Ida Sang Hyang Widhi Wasa / Tuhan Yang Maha Esa, karena hanya atas

asungkertha waranugraha-Nya / karunia-Nya, tesis ini dapat diselesaikan.

Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis mengucapkan terimakasih

yang sebesar-besarnya kepada Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M.Repro,

pemimbing utama yang dengan penuh perhatian telah memberikan dorongan,

semangat, bimbingan, dan saran selama penulis mengikuti program magister,

khususnya dalam penyelesaian tesis ini. Terimakasih sebesar-besarnya pula

penulis sampaikan kepada Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M. Repro,

Pembimbing II yang dengan penuh perhatian dan kesabaran telah memberikan

bimbingan dan saran kepada penulis. Ucapan yang sama juga ditujukan kepada

Rektor Universitas Udayana, Prof. Dr. dr. I Ketut Suastika, Sp.PD (KEMD) atas

kesempatan dan fasilitas yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan

menyelesaikan pendidikan Program Magister di Universitas Udayana. Ucapan

terimakasih ini juga ditujukan kepada Direktur Program Pascasarjana Universitas

Udayana yang dijabat oleh Prof. Dr. dr. A. A. Raka Sudewi, SpS(K) atas

kesempatan yang diberikan kepada penulis untuk menjadi mahasiswa Program

Magister pada Program Pascasarjana Universitas Udayana. Tidak lupa pula

penulis ucapkan terimakasih kepada Prof. Dr. dr. Putu Astawa, Sp.OT (K),

M.Kes, Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Udayana atas ijin yang diberikan

kepada penulis untuk mengikuti pendidikan program Magister. Pada kesempatan

ini, penulis juga menyampaikan rasa terimakasih kepada Dr. dr. I Dw. Made

Sukrama, M.Si., Sp.MK(K), Kepala Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas

Kedokteran Univrsitas Udayana. Ungkapan terimakasih penulis sampaikan pula kepada

para penguji tesis, yaitu Prof. dr. Ketut Tirtayasa, MS., AIF, Dr.dr. I Wayan Putu

Sutirta Yasa, M.Si, dr. I Gusti Ngurah Mayun, Sp. HK, yang telah memberikan

masukan, saran, sanggahan, dan koreksi sehigga tesis ini dapat terwujud seperti

ini.

Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terimakasih yang

tulus disertai penghargaan kepada seluruh dosen-dosen dan staf Biomedis serta

guru-guru yang telah membimbing penulis, mulai dari sekolah dasar sampai

perguruan tinggi. Juga penulis ucapkan terimakasih kepada drs. I Gusti Agung

Gede Mertasana dan drg. Ni Made Sritamin, orang tua penulis yang telah

mengasuh dan membesarkan penulis, memberikan dasar-dasar berpikir logik dan

suasana demokratis sehingga tercipta lahan yang baik untuk berkembangnya

kreativitas. Akhirnya penulis sampaikan terimakasih kepada suami tercinta,

dr.A.A.Ngurah Bagus Lanang Suraharja dan anak-anak, A. A. Ngurah Gede

Aditya Ananta Raharja dan calon bayi yang masih dalam kandungan atas

pengertian, semangat dan kesempatan yang diberikan untuk lebih berkonsentrasi

menyelesaikan tesis ini.

Semoga Ida Sang Hyang Widhi Wasa / Tuhan Yang Maha Esa selalu

melimpahkan rahmat-Nya kepada semua pihak yang telah membantu pelaksanaan

dan penyelesaian tesis ini, serta kepada penulis sekeluarga.

ABSTRAK

PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA SULKUS GINGIVA

TIKUS YANG MENGALAMI PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN

JUMLAH SEL FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN

PERIODONTAL LEBIH TEBAL

Periodontitis merupakan penyakit infeksi, apabila tidak dilakukan

perawatan yang tepat dapat mengakibatkan tanggalnya gigi. Tujuan dari penelitian

ini adalah untuk membuktikan pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% pada sulkus

gingiva mengakibatkan jumlah sel fibroblas dan pembentukan kolagen pada

ligamen periodontal lebih banyak yang ditandai dengan bertambahnya lebar

ligamen periodontal tikus.

Telah dilakukan penelitian eksperimental Randomized Post Test Only

Control Group Design pada 32 ekor tikus putih jantan yang diinduksi

lipopolisakarida (LPS) selama 8 hari. Lalu tikus dibagi menjadi kelompok control

yang diterapi dengan placebo dan kelompok perlakuan yang diterapi dengan

tetrasiklin HCL gel 0,7%. Pada hari ke-10 tikus dieuthanasia untuk pengambilan

mandibula dan dibuatkan preparat histologi dengan pengecatan HE. Data diuji

normalitas dengan Shapiro-wilk dan dilanjutkan dengan independent t-test.

Dari hasil penelitian, rerata jumlah sel fibroblas kelompok perlakuan

dengan pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% (148,38±5,11 unit) lebih tinggi

dibandingkan dengan rerata kelompok kontrol (113,19±5,39 unit). Rerata

peningkatan kolagen yang ditunjukkan ketebalan ligamen periodontal kelompok

perlakuan dengan pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% (338,65±57,28 µm) lebih

tinggi dibandingkan rerata kelompok kontrol (225,50±45,29 µm). Hasil rerata

jumlah fibroblas dan ketebalan ligamen periodontal ini berbeda secara bermakna

(p<0,05).

Disimpulkan bahwa pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% pada sulkus

gingiva tikus yang mengalami periodontitis mengakibatkan jumlah sel fibroblas

lebih banyak dan ligamen periodontal lebih tebal. Perlu dilakukan penelitian lebih

lanjut terhadap peran tetrasiklin gel sebagai conditioning agent pada permukaan

akar gigi terhadap peningkatan kolagen ligamen periodontal melalui metode

pemeriksaan lainnya, dan perlu dilakukan aplikasi tetrasiklin HCL gel pada pasien

penderita periodontitis untuk melihat proses penyembuhan periodontitis secara

klinis.

Kata kunci : tetrasiklin HCL gel 0,7%, jumlah fibroblas, ligamen periodontal,

periodontitis

ABSTRACT

APPLYING 0.7% TETRACYCLINE HCL GEL ON RAT GINGIVAL

SULCUS WITH PERIODONTAL DISEASES RESULT HIGHER

NUMBER OF FIBROBLAST CELLS AND THICKER OF PERIODONTAL

LIGAMENT

Periodontal disease is an infectious disease, could be result loose of the

teeth. The aim of this research is to prove that the applying 0,7% tetracycline hcl

gel on rat gingival sulcus result higher number of fibroblasts and collagen

synthesis which are marked by the thicker of rat periodontal ligament.

The study was a randomized post test only control group design

experimental study on 32 white male rats which are inducted by

lipopolyssaccaride (LPS) for 8 days. And then rats divided into control group

were given placebo, and treatment group were given 0,7% tetracycline HCL gel.

On 10th

days, the rats were euthanazided for taken mandibula alveolar bone tissue

sampling and histological preparations were made by HE (Harris Hematoxylin-

Eosin) staining. The data were analyzed using SPSS program processed using

Shapiro Wilk for normality test and then continued using independent t-test.

The result of this research is the mean number of fibroblasts at treatment

group by administration of 0.7% tetracycline HCL gel (148.38±5.11 units) was

higher than the control group (113.19±5.39 units). The mean of collagen synthesis

were showed by the thickness of periodontal ligamen at group treated 0.7%

tetracycline HCL gel (338.65±57.28 µm) was higher than the control group

(225.50±45.29 µm). The mean number of fibroblast cell and thickness of

periodontal ligament were statistically different (p<0.05).

Thus, it is conclude that 0.7% tetracycline HCL gel enhance the number of

fibroblasts cell and the thickness of periodontal ligament in rat with periodontal

disease.

Keywords : 0.7% tetracycline HCL gel, number of fibroblasts cell, periodontal

ligament, periodontal disease

DAFTAR ISI

SAMPUL DALAM .......................................................................................... i

PRASYARAT GELAR .................................................................................... ii

LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................. iii

PENETAPAN PANITIA PENGUJI ................................................................ iv

SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT................................................. v

UCAPAN TERIMAKASIH ............................................................................. vi

ABSTRAK ....................................................................................................... viii

ABSTRACT ..................................................................................................... viiii

DAFTAR ISI .................................................................................................... x

DAFTAR TABEL ............................................................................................ xiv

DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xv

DAFTAR SINGKATAN ................................................................................. xvi

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xvii

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1

1.1 Latar Belakang ............................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah .......................................................................... 5

1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................... 5

1.3.1 Tujuan Umum ....................................................................... 5

1.3.2 Tujuan Khusus ...................................................................... 6

1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................... 6

1.4.1 Manfaat Akademis ................................................................ 6

1.4.2 Manfaat Praktis ..................................................................... 6

BAB II KAJIAN PUSTAKA ........................................................................... 8

2.1 Jaringan Periodontal ....................................................................... 8

2.1.1 Gingiva .................................................................................. 10

2.1.2 Cementum .............................................................................. 10

2.1.3 Periodontal Ligamet.............................................................. 10

2.1.4 Alveolar Bone ........................................................................ 11

2.2 Periodontitis ................................................................................... 11

2.2.1 Histopatogenesis Gingivitis dan Periodontitis ...................... 14

2.2.2 Mekanisme Kerusakan Jaringan Pada Penyakit Periodontal 16

2.3 Fibroblas ......................................................................................... 19

2.3.1 Definisi Fibroblas .................................................................. 19

2.3.2 Struktur Fibroblas ................................................................. 20

2.3.3 Fungsi Fibroblas .................................................................... 21

2.4 Kolagen .......................................................................................... 22

2.4.1 Definisi Kolagen ................................................................... 22

2.4.2 Struktur Kolagen ................................................................... 22

2.4.3 Fungsi Kolagen ..................................................................... 24

2.4.4 Sintesis Kolagen .................................................................... 25

2.5 Peran Fibroblas Dalam Sintesis Kolagen ....................................... 27

2.6 Serat Kolagen Pada Ligamen Periodontal ..................................... 30

2.7 Tetrasiklin ...................................................................................... 33

2.7.1 Sifat Kimia ............................................................................ 36

2.7.2 Farmakologi .......................................................................... 37

BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP PENELITIAN, DAN

HIPOTESIS PENELITIAN ........................................................... 40

3.1 Kerangka Berpikir .......................................................................... 40

3.2 Konsep Penelitian........................................................................... 41

3.3 Hipotesis Penelitian ........................................................................ 42

BAB IV METODE PENELITIAN .................................................................. 43

4.1 Rancangan Penelitian ..................................................................... 43

4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ......................................................... 44

4.2.1 Lokasi .................................................................................... 44

4.2.2 Waktu Penelitian ................................................................... 44

4.3 Penentuan Sumber Data ................................................................. 45

4.3.1 Besar Sampel ......................................................................... 45

4.3.2 Kriteria Sampel ..................................................................... 46

4.3.2.1 Kriteria Inklusi ......................................................... 46

4.3.2.2 Kriteria Eksklusi ...................................................... 46

4.3.2.3 Kriteria Drop Out..................................................... 46

4.4 Variabel Penelitan .......................................................................... 46

4.4.1 Klasifikasi variable................................................................ 46

4.4.2 Hubungan Antar Variabel ..................................................... 47

4.5 Definisi Operasional....................................................................... 47

4.6 Bahan dan Alat Penelitian .............................................................. 48

4.6.1 Bahan Penelitian.................................................................... 48

4.6.2 Alat Penelitian ....................................................................... 49

4.7 Prosedur Penelitian......................................................................... 49

4.7.1 Pembuatan Tetrasiklin HCL Gel ........................................... 49

4.7.2 Perlakuan Pada Tikus ............................................................ 49

4.7.3 Pembuatan Sediaan Mikroskopis .......................................... 51

4.7.4 Menentukan Sintesis Kolagen ............................................... 52

4.8 Alur Penelitian ............................................................................... 53

4.9 Analisis Data .................................................................................. 54

BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................ 55

5.1 Analisis Deskriptif ......................................................................... 56

5.2 Uji Normalitas Data ....................................................................... 56

5.3 Uji Homogenitas Data Antar Kelompok ........................................ 57

5.4 Uji Komparabilitas ......................................................................... 58

5.4.1 Analisis Komparabilitas Jumlah Fibroblas ........................... 58

5.4.2 Analisis Komparabilitas Ketebalan Ligament Periodontal ... 59

5.5 Gambaran Histologis Jumlah Fibroblas dan Ketebalan Ligamen

Periodontal antar Kelompok ......................................................... 60

BAB VI PEMBAHASAN ................................................................................ 63

6.1 Subjek Penelitian ............................................................................ 63

6.2 Pembahasan Hasil Perbandingan Rerata Jumlah Fibroblas Antar

Kelompok ..................................................................................... 63

6.3 Pembahasan Hasil Perbandingan Rerata Ketebalan Ligamen

Periodontal .................................................................................... 66

BAB VII SIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 71

DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 72

LAMPIRAN ..................................................................................................... 78

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Penampang sagital struktur jaringan periodontal pada gigi ..... 9

Gambar 2.2. Struktur gigi beserta jaringan periodontal ................................ 9

Gambar 2.3. Keadaan gigi yang mengalami periodontitis pada rahang atas 13

Gambar 2.4. Progress penyakit periodontal .................................................. 18

Gambar 2.5. Struktur mikroskopis fibroblas pada jaringan ikat longgar

dengan pengecatan hematoksilin-eosin ................................... 28

Gambar 2.6. Peran fibroblas dalam membentuk dan meletakkan serat-serat

dalam matrik, terutama serat kolagen ....................................... 29

Gambar 2.7. Struktur kimia tetrasiklin .......................................................... 33

Gambar 5.1. Gambaran Histologis Sel Fibroblas .......................................... 60

Gambar 5.2. Gambaran Histologis Tebal Ligamen Periodontal ................... 60

Gambar L2.1 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok kontol. 80

Gambar L2.2 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok

perlakuan I ................................................................................ 80

Gambar L2.3 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok

perlakuan II ............................................................................... 81

Gambar L2.4 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok

perlakuan III ............................................................................. 81

Gambar L2.5 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Kontrol ................ 82

Gambar L2.6 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Perlakuan I .......... 82

Gambar L2.7 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Perlakuan II ......... 83

Gambar L2.6 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Perlakuan III ....... 83

Gambar L4.1. Lokal anastesi pada gingiva tikus ............................................. 90

Gambar L4.2. Alat dan bahan yang digunakan ............................................... 90

Gambar L4.3. Pembedahan Mandibula tikus................................................... 91

Gambar L4.4. Spesimen Kelompok kontrol dan perlakuan ............................ 91

DAFTAR TABEL

Tabel 5.1 Karakteristik subjek penelitian kelompok kontrol dan perlakuan ..... 55

Tabel 5.2. Analisis deskriptif jumlah fibroblas dan ketebalan ligamen

periodontal ......................................................................................... 56

Tabel 5.3. Hasil uji normalitas data jumlah fibroblas antar kelompok .............. 57

Tabel 5.4. Hasil uji normalitas data ketebalan ligamen periodontal antar

kelompok ........................................................................................... 57

Tabel 5.5. Hasil uji homogenitas data jumlah fibroblas dan ketebalan

ligamen periodontal ........................................................................... 58

Tabel 5.6. Rerata jumlah fibroblas antar kelompok ........................................... 58

Tabel 5.7. Rerata ketebalan ligamen periodontal antar kelompok ...................... 59

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 : Keterangan Kelaikan Etik.............................................................. 74

Lampiran 2 : Hasil Penelitian Pendahuluan ........................................................ 75

Lampiran 3 : Analisis Data Dengan SPSS .......................................................... 80

Lampiran 4 : Dokumentasi Saat Penelitian ......................................................... 84

DAFTAR SINGKATAN

CGF : Crevicular Gingival Fluid

CMC-Na : Carboxymethilcellulosa-Natrium

EDM : Extracelullar Dermal Matrix

Gly : Glycine

HCL : Hydrochloride

IFN : Interferon

IL : Interleukin

LPS : Lipopolisakarida

MCP : Monocyte Chemoattractant Protein

MIP : Macrophage Inflammatory Protein

MMP : Matriks metalloproteinase

mRNA : messenger Ribose Nucleic Acid

PGE2 : Prostaglandin E2

PMN : Polimorfonuklear

Pro : Prolina

RANTES : Regulated Activation Normal T cell Expressed and Secreted

TGF : Transforming growth factor

TIMP : Tissue Inhibitor of Metalloproteinase

TNF : Tumor Necrosis Factor

tRNA : transfer Ribose Nucleic Acid

Zn : Zinc