PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA … Awal.pdfStruktur gigi beserta jaringan periodontal ......
Transcript of PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA … Awal.pdfStruktur gigi beserta jaringan periodontal ......
TESIS
PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA
SULKUS GINGIVA TIKUS YANG MENGALAMI
PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN JUMLAH SEL
FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN
PERIODONTAL LEBIH TEBAL
I GUSTI AGUNG SRI PRADNYANI
1290761001
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2016
PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA
SULKUS GINGIVA TIKUS YANG MENGALAMI
PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN JUMLAH SEL
FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN
PERIODONTAL LEBIH TEBAL
Tesis Untuk Memperoleh Gelar Magister
pada Program Magister, Program Studi Ilmu Biomedik
Program Pascasarjana Universitas Udayana
I GUSTI AGUNG SRI PRADNYANI
NIM : 1290761001
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2016
LEMBAR PENGESAHAN
TESIS INI TELAH DISETUJUI
PADA TANGGAL 2 AGUSTUS 2016
Mengetahui
Pembimbing I
Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M. Repro
NIP 194612311969021001
Pembimbing II
Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M.Repro
NIP 196404171996011001
Ketua Program Studi Ilmu Biomedik
Program Pascasarjana
Universitas Udayana
Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc, Sp.GK
NIP. 195805211985031002
Direktur Program Pascasarjana
Universitas Udayana
Prof. Dr. dr. A. A. Raka Sudewi, Sp.S (K)
NIP 19590215198510 2001
Tesis Ini Telah Diuji
Tanggal 2 Agustus 2016
Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK RektorUniversitas Udayana,
No : 3457/UN14.4/HK/2016, Tanggal 22 Juli 2016
Ketua : 1. Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M.Repro
Anggota :
2. Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M. Repro
3. Prof. dr. Ketut Tirtayasa, MS., AIF
4. Dr.dr. I Wayan Putu Sutirta Yasa, M.Si
5. dr. I Gusti Ngurah Mayun, Sp. HK
UCAPAN TERIMA KASIH
Pertama-tama perkenankanlah penulis memanjatkan puji syukur ke
hadapan Ida Sang Hyang Widhi Wasa / Tuhan Yang Maha Esa, karena hanya atas
asungkertha waranugraha-Nya / karunia-Nya, tesis ini dapat diselesaikan.
Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis mengucapkan terimakasih
yang sebesar-besarnya kepada Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M.Repro,
pemimbing utama yang dengan penuh perhatian telah memberikan dorongan,
semangat, bimbingan, dan saran selama penulis mengikuti program magister,
khususnya dalam penyelesaian tesis ini. Terimakasih sebesar-besarnya pula
penulis sampaikan kepada Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M. Repro,
Pembimbing II yang dengan penuh perhatian dan kesabaran telah memberikan
bimbingan dan saran kepada penulis. Ucapan yang sama juga ditujukan kepada
Rektor Universitas Udayana, Prof. Dr. dr. I Ketut Suastika, Sp.PD (KEMD) atas
kesempatan dan fasilitas yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan
menyelesaikan pendidikan Program Magister di Universitas Udayana. Ucapan
terimakasih ini juga ditujukan kepada Direktur Program Pascasarjana Universitas
Udayana yang dijabat oleh Prof. Dr. dr. A. A. Raka Sudewi, SpS(K) atas
kesempatan yang diberikan kepada penulis untuk menjadi mahasiswa Program
Magister pada Program Pascasarjana Universitas Udayana. Tidak lupa pula
penulis ucapkan terimakasih kepada Prof. Dr. dr. Putu Astawa, Sp.OT (K),
M.Kes, Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Udayana atas ijin yang diberikan
kepada penulis untuk mengikuti pendidikan program Magister. Pada kesempatan
ini, penulis juga menyampaikan rasa terimakasih kepada Dr. dr. I Dw. Made
Sukrama, M.Si., Sp.MK(K), Kepala Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas
Kedokteran Univrsitas Udayana. Ungkapan terimakasih penulis sampaikan pula kepada
para penguji tesis, yaitu Prof. dr. Ketut Tirtayasa, MS., AIF, Dr.dr. I Wayan Putu
Sutirta Yasa, M.Si, dr. I Gusti Ngurah Mayun, Sp. HK, yang telah memberikan
masukan, saran, sanggahan, dan koreksi sehigga tesis ini dapat terwujud seperti
ini.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terimakasih yang
tulus disertai penghargaan kepada seluruh dosen-dosen dan staf Biomedis serta
guru-guru yang telah membimbing penulis, mulai dari sekolah dasar sampai
perguruan tinggi. Juga penulis ucapkan terimakasih kepada drs. I Gusti Agung
Gede Mertasana dan drg. Ni Made Sritamin, orang tua penulis yang telah
mengasuh dan membesarkan penulis, memberikan dasar-dasar berpikir logik dan
suasana demokratis sehingga tercipta lahan yang baik untuk berkembangnya
kreativitas. Akhirnya penulis sampaikan terimakasih kepada suami tercinta,
dr.A.A.Ngurah Bagus Lanang Suraharja dan anak-anak, A. A. Ngurah Gede
Aditya Ananta Raharja dan calon bayi yang masih dalam kandungan atas
pengertian, semangat dan kesempatan yang diberikan untuk lebih berkonsentrasi
menyelesaikan tesis ini.
Semoga Ida Sang Hyang Widhi Wasa / Tuhan Yang Maha Esa selalu
melimpahkan rahmat-Nya kepada semua pihak yang telah membantu pelaksanaan
dan penyelesaian tesis ini, serta kepada penulis sekeluarga.
ABSTRAK
PEMBERIAN TETRASIKLIN HCL GEL 0,7% PADA SULKUS GINGIVA
TIKUS YANG MENGALAMI PERIODONTITIS MENGAKIBATKAN
JUMLAH SEL FIBROBLAS LEBIH BANYAK DAN LIGAMEN
PERIODONTAL LEBIH TEBAL
Periodontitis merupakan penyakit infeksi, apabila tidak dilakukan
perawatan yang tepat dapat mengakibatkan tanggalnya gigi. Tujuan dari penelitian
ini adalah untuk membuktikan pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% pada sulkus
gingiva mengakibatkan jumlah sel fibroblas dan pembentukan kolagen pada
ligamen periodontal lebih banyak yang ditandai dengan bertambahnya lebar
ligamen periodontal tikus.
Telah dilakukan penelitian eksperimental Randomized Post Test Only
Control Group Design pada 32 ekor tikus putih jantan yang diinduksi
lipopolisakarida (LPS) selama 8 hari. Lalu tikus dibagi menjadi kelompok control
yang diterapi dengan placebo dan kelompok perlakuan yang diterapi dengan
tetrasiklin HCL gel 0,7%. Pada hari ke-10 tikus dieuthanasia untuk pengambilan
mandibula dan dibuatkan preparat histologi dengan pengecatan HE. Data diuji
normalitas dengan Shapiro-wilk dan dilanjutkan dengan independent t-test.
Dari hasil penelitian, rerata jumlah sel fibroblas kelompok perlakuan
dengan pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% (148,38±5,11 unit) lebih tinggi
dibandingkan dengan rerata kelompok kontrol (113,19±5,39 unit). Rerata
peningkatan kolagen yang ditunjukkan ketebalan ligamen periodontal kelompok
perlakuan dengan pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% (338,65±57,28 µm) lebih
tinggi dibandingkan rerata kelompok kontrol (225,50±45,29 µm). Hasil rerata
jumlah fibroblas dan ketebalan ligamen periodontal ini berbeda secara bermakna
(p<0,05).
Disimpulkan bahwa pemberian tetrasiklin HCL gel 0,7% pada sulkus
gingiva tikus yang mengalami periodontitis mengakibatkan jumlah sel fibroblas
lebih banyak dan ligamen periodontal lebih tebal. Perlu dilakukan penelitian lebih
lanjut terhadap peran tetrasiklin gel sebagai conditioning agent pada permukaan
akar gigi terhadap peningkatan kolagen ligamen periodontal melalui metode
pemeriksaan lainnya, dan perlu dilakukan aplikasi tetrasiklin HCL gel pada pasien
penderita periodontitis untuk melihat proses penyembuhan periodontitis secara
klinis.
Kata kunci : tetrasiklin HCL gel 0,7%, jumlah fibroblas, ligamen periodontal,
periodontitis
ABSTRACT
APPLYING 0.7% TETRACYCLINE HCL GEL ON RAT GINGIVAL
SULCUS WITH PERIODONTAL DISEASES RESULT HIGHER
NUMBER OF FIBROBLAST CELLS AND THICKER OF PERIODONTAL
LIGAMENT
Periodontal disease is an infectious disease, could be result loose of the
teeth. The aim of this research is to prove that the applying 0,7% tetracycline hcl
gel on rat gingival sulcus result higher number of fibroblasts and collagen
synthesis which are marked by the thicker of rat periodontal ligament.
The study was a randomized post test only control group design
experimental study on 32 white male rats which are inducted by
lipopolyssaccaride (LPS) for 8 days. And then rats divided into control group
were given placebo, and treatment group were given 0,7% tetracycline HCL gel.
On 10th
days, the rats were euthanazided for taken mandibula alveolar bone tissue
sampling and histological preparations were made by HE (Harris Hematoxylin-
Eosin) staining. The data were analyzed using SPSS program processed using
Shapiro Wilk for normality test and then continued using independent t-test.
The result of this research is the mean number of fibroblasts at treatment
group by administration of 0.7% tetracycline HCL gel (148.38±5.11 units) was
higher than the control group (113.19±5.39 units). The mean of collagen synthesis
were showed by the thickness of periodontal ligamen at group treated 0.7%
tetracycline HCL gel (338.65±57.28 µm) was higher than the control group
(225.50±45.29 µm). The mean number of fibroblast cell and thickness of
periodontal ligament were statistically different (p<0.05).
Thus, it is conclude that 0.7% tetracycline HCL gel enhance the number of
fibroblasts cell and the thickness of periodontal ligament in rat with periodontal
disease.
Keywords : 0.7% tetracycline HCL gel, number of fibroblasts cell, periodontal
ligament, periodontal disease
DAFTAR ISI
SAMPUL DALAM .......................................................................................... i
PRASYARAT GELAR .................................................................................... ii
LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................. iii
PENETAPAN PANITIA PENGUJI ................................................................ iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT................................................. v
UCAPAN TERIMAKASIH ............................................................................. vi
ABSTRAK ....................................................................................................... viii
ABSTRACT ..................................................................................................... viiii
DAFTAR ISI .................................................................................................... x
DAFTAR TABEL ............................................................................................ xiv
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xv
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................. xvi
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xvii
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah .......................................................................... 5
1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................... 5
1.3.1 Tujuan Umum ....................................................................... 5
1.3.2 Tujuan Khusus ...................................................................... 6
1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................... 6
1.4.1 Manfaat Akademis ................................................................ 6
1.4.2 Manfaat Praktis ..................................................................... 6
BAB II KAJIAN PUSTAKA ........................................................................... 8
2.1 Jaringan Periodontal ....................................................................... 8
2.1.1 Gingiva .................................................................................. 10
2.1.2 Cementum .............................................................................. 10
2.1.3 Periodontal Ligamet.............................................................. 10
2.1.4 Alveolar Bone ........................................................................ 11
2.2 Periodontitis ................................................................................... 11
2.2.1 Histopatogenesis Gingivitis dan Periodontitis ...................... 14
2.2.2 Mekanisme Kerusakan Jaringan Pada Penyakit Periodontal 16
2.3 Fibroblas ......................................................................................... 19
2.3.1 Definisi Fibroblas .................................................................. 19
2.3.2 Struktur Fibroblas ................................................................. 20
2.3.3 Fungsi Fibroblas .................................................................... 21
2.4 Kolagen .......................................................................................... 22
2.4.1 Definisi Kolagen ................................................................... 22
2.4.2 Struktur Kolagen ................................................................... 22
2.4.3 Fungsi Kolagen ..................................................................... 24
2.4.4 Sintesis Kolagen .................................................................... 25
2.5 Peran Fibroblas Dalam Sintesis Kolagen ....................................... 27
2.6 Serat Kolagen Pada Ligamen Periodontal ..................................... 30
2.7 Tetrasiklin ...................................................................................... 33
2.7.1 Sifat Kimia ............................................................................ 36
2.7.2 Farmakologi .......................................................................... 37
BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP PENELITIAN, DAN
HIPOTESIS PENELITIAN ........................................................... 40
3.1 Kerangka Berpikir .......................................................................... 40
3.2 Konsep Penelitian........................................................................... 41
3.3 Hipotesis Penelitian ........................................................................ 42
BAB IV METODE PENELITIAN .................................................................. 43
4.1 Rancangan Penelitian ..................................................................... 43
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ......................................................... 44
4.2.1 Lokasi .................................................................................... 44
4.2.2 Waktu Penelitian ................................................................... 44
4.3 Penentuan Sumber Data ................................................................. 45
4.3.1 Besar Sampel ......................................................................... 45
4.3.2 Kriteria Sampel ..................................................................... 46
4.3.2.1 Kriteria Inklusi ......................................................... 46
4.3.2.2 Kriteria Eksklusi ...................................................... 46
4.3.2.3 Kriteria Drop Out..................................................... 46
4.4 Variabel Penelitan .......................................................................... 46
4.4.1 Klasifikasi variable................................................................ 46
4.4.2 Hubungan Antar Variabel ..................................................... 47
4.5 Definisi Operasional....................................................................... 47
4.6 Bahan dan Alat Penelitian .............................................................. 48
4.6.1 Bahan Penelitian.................................................................... 48
4.6.2 Alat Penelitian ....................................................................... 49
4.7 Prosedur Penelitian......................................................................... 49
4.7.1 Pembuatan Tetrasiklin HCL Gel ........................................... 49
4.7.2 Perlakuan Pada Tikus ............................................................ 49
4.7.3 Pembuatan Sediaan Mikroskopis .......................................... 51
4.7.4 Menentukan Sintesis Kolagen ............................................... 52
4.8 Alur Penelitian ............................................................................... 53
4.9 Analisis Data .................................................................................. 54
BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................ 55
5.1 Analisis Deskriptif ......................................................................... 56
5.2 Uji Normalitas Data ....................................................................... 56
5.3 Uji Homogenitas Data Antar Kelompok ........................................ 57
5.4 Uji Komparabilitas ......................................................................... 58
5.4.1 Analisis Komparabilitas Jumlah Fibroblas ........................... 58
5.4.2 Analisis Komparabilitas Ketebalan Ligament Periodontal ... 59
5.5 Gambaran Histologis Jumlah Fibroblas dan Ketebalan Ligamen
Periodontal antar Kelompok ......................................................... 60
BAB VI PEMBAHASAN ................................................................................ 63
6.1 Subjek Penelitian ............................................................................ 63
6.2 Pembahasan Hasil Perbandingan Rerata Jumlah Fibroblas Antar
Kelompok ..................................................................................... 63
6.3 Pembahasan Hasil Perbandingan Rerata Ketebalan Ligamen
Periodontal .................................................................................... 66
BAB VII SIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 71
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 72
LAMPIRAN ..................................................................................................... 78
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1. Penampang sagital struktur jaringan periodontal pada gigi ..... 9
Gambar 2.2. Struktur gigi beserta jaringan periodontal ................................ 9
Gambar 2.3. Keadaan gigi yang mengalami periodontitis pada rahang atas 13
Gambar 2.4. Progress penyakit periodontal .................................................. 18
Gambar 2.5. Struktur mikroskopis fibroblas pada jaringan ikat longgar
dengan pengecatan hematoksilin-eosin ................................... 28
Gambar 2.6. Peran fibroblas dalam membentuk dan meletakkan serat-serat
dalam matrik, terutama serat kolagen ....................................... 29
Gambar 2.7. Struktur kimia tetrasiklin .......................................................... 33
Gambar 5.1. Gambaran Histologis Sel Fibroblas .......................................... 60
Gambar 5.2. Gambaran Histologis Tebal Ligamen Periodontal ................... 60
Gambar L2.1 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok kontol. 80
Gambar L2.2 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok
perlakuan I ................................................................................ 80
Gambar L2.3 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok
perlakuan II ............................................................................... 81
Gambar L2.4 Jumlah Fibroblas pada ligamen periodontal kelompok
perlakuan III ............................................................................. 81
Gambar L2.5 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Kontrol ................ 82
Gambar L2.6 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Perlakuan I .......... 82
Gambar L2.7 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Perlakuan II ......... 83
Gambar L2.6 Ketebalan Ligamen Periodontal Kelompok Perlakuan III ....... 83
Gambar L4.1. Lokal anastesi pada gingiva tikus ............................................. 90
Gambar L4.2. Alat dan bahan yang digunakan ............................................... 90
Gambar L4.3. Pembedahan Mandibula tikus................................................... 91
Gambar L4.4. Spesimen Kelompok kontrol dan perlakuan ............................ 91
DAFTAR TABEL
Tabel 5.1 Karakteristik subjek penelitian kelompok kontrol dan perlakuan ..... 55
Tabel 5.2. Analisis deskriptif jumlah fibroblas dan ketebalan ligamen
periodontal ......................................................................................... 56
Tabel 5.3. Hasil uji normalitas data jumlah fibroblas antar kelompok .............. 57
Tabel 5.4. Hasil uji normalitas data ketebalan ligamen periodontal antar
kelompok ........................................................................................... 57
Tabel 5.5. Hasil uji homogenitas data jumlah fibroblas dan ketebalan
ligamen periodontal ........................................................................... 58
Tabel 5.6. Rerata jumlah fibroblas antar kelompok ........................................... 58
Tabel 5.7. Rerata ketebalan ligamen periodontal antar kelompok ...................... 59
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 : Keterangan Kelaikan Etik.............................................................. 74
Lampiran 2 : Hasil Penelitian Pendahuluan ........................................................ 75
Lampiran 3 : Analisis Data Dengan SPSS .......................................................... 80
Lampiran 4 : Dokumentasi Saat Penelitian ......................................................... 84
DAFTAR SINGKATAN
CGF : Crevicular Gingival Fluid
CMC-Na : Carboxymethilcellulosa-Natrium
EDM : Extracelullar Dermal Matrix
Gly : Glycine
HCL : Hydrochloride
IFN : Interferon
IL : Interleukin
LPS : Lipopolisakarida
MCP : Monocyte Chemoattractant Protein
MIP : Macrophage Inflammatory Protein
MMP : Matriks metalloproteinase
mRNA : messenger Ribose Nucleic Acid
PGE2 : Prostaglandin E2
PMN : Polimorfonuklear
Pro : Prolina
RANTES : Regulated Activation Normal T cell Expressed and Secreted
TGF : Transforming growth factor
TIMP : Tissue Inhibitor of Metalloproteinase
TNF : Tumor Necrosis Factor
tRNA : transfer Ribose Nucleic Acid
Zn : Zinc