Pemantapan mutu Pemantapan mutu Lab. MikrobiologiLab. Mikrobiologi

Jaminan kualitas Jaminan kualitas Laboratorium mikrobiologi Laboratorium mikrobiologi adalah semua upaya yang adalah semua upaya yang dilakukan secara mandiri dilakukan secara mandiri untuk menjamin agar mutu untuk menjamin agar mutu hasil pemeriksaan hasil pemeriksaan laboratorium yang laboratorium yang dikeluarkan dapat dipercaya dikeluarkan dapat dipercaya

Mencakup :Mencakup : Reliability atau ketepatanReliability atau ketepatan

Hasil pemeriksaan benar dan dipercayaHasil pemeriksaan benar dan dipercaya Reproducibility atau ketelitianReproducibility atau ketelitian

Hasil pemeriksaan sama dengan hasil Hasil pemeriksaan sama dengan hasil yang diperoleh ketika dites ulangyang diperoleh ketika dites ulang

Speed atau KecepatanSpeed atau KecepatanKecepatan tes cukup bagi dokter dalam Kecepatan tes cukup bagi dokter dalam memberi pengobatanmemberi pengobatan

Cost benefit Ratio atau beaya murahCost benefit Ratio atau beaya murahBeaya pemeriksaan menguntungkan Beaya pemeriksaan menguntungkan pasient dan masyarakatpasient dan masyarakat

Faktor yang mempengaruhi reliability, Faktor yang mempengaruhi reliability, reproducibility dalam hasil laboratorium dan reproducibility dalam hasil laboratorium dan beberapa sumber kesalahan dapat beberapa sumber kesalahan dapat disebabkan oleh :disebabkan oleh :

a.a.Kerja pekerja laboratoriumKerja pekerja laboratoriumb.b.Ruangan kerjaRuangan kerjac.c.Laboratorium materialLaboratorium material

Kualitas reagen, bahan kimia, peralatan Kualitas reagen, bahan kimia, peralatan gelas, pengecatan, media kultur.gelas, pengecatan, media kultur.

d.d.MetodaMetodae.e.Pembacaan hasil yang cepatPembacaan hasil yang cepatf.f.LaporanLaporan

Pengendalian mutu Pengendalian mutu laboratorium mikrobiologi laboratorium mikrobiologi lebih ditekankan kepada lebih ditekankan kepada kesempurnaan teknis.kesempurnaan teknis.

Sistem pengendalian mutu Sistem pengendalian mutu meliputi tiga tahap :meliputi tiga tahap :

1.1.Tahap Pra Analitik Tahap Pra Analitik 2.2.AnalitikAnalitik3.3.Pasca AnalitikPasca Analitik

Pengendalian mutu pra Pengendalian mutu pra analitik :analitik :

Mencakup semua tahapan Mencakup semua tahapan sebelum pemeriksaan sebelum pemeriksaan laboratorium dilakukan yaitulaboratorium dilakukan yaitu

persiapan pasien,persiapan pasien,

pengambilan spesimenpengambilan spesimen

penanganan spesimenpenanganan spesimen..

Pengendalian mutu tahap Pengendalian mutu tahap analitikanalitik

Mencakup pengendalian Mencakup pengendalian pemantapan mutu internal dan pemantapan mutu internal dan pemantapan mutu eksternalpemantapan mutu eksternal

1.Kalibrasi alat1.Kalibrasi alat

2.kontrol kualitas medium 2.kontrol kualitas medium

kulturkultur

Media kultur disiapkan dalam Media kultur disiapkan dalam laboratorium. Untuk pengendalian laboratorium. Untuk pengendalian mutu laboratorium perlu diperhatikan :mutu laboratorium perlu diperhatikan :

Pemilihan mediaPemilihan media Penyimpanan mediaPenyimpanan media    Persiapan mediaPersiapan media Penyimpanan media yang sudah Penyimpanan media yang sudah

disiapkandisiapkan Kontrol kualitas dari media yang Kontrol kualitas dari media yang

disiapkandisiapkan

Pemilihan media Pemilihan media Laboratorium yang efisien Laboratorium yang efisien

memilih media yang bisa memilih media yang bisa digunakan untuk digunakan untuk beberapa macam beberapa macam pemeriksaanpemeriksaan

Penyimpanan media yang sudah disiapkanPenyimpanan media yang sudah disiapkan lindungi dari cahaya mataharilindungi dari cahaya matahari lindungi dari panas. Untuk media yang lindungi dari panas. Untuk media yang mengandung darah, materi organic atau mengandung darah, materi organic atau antibiotik yang harus disimpan dalam antibiotik yang harus disimpan dalam kulkaskulkas Peletakan media yang sudah disiapkan bila Peletakan media yang sudah disiapkan bila disimpan dalam tempat dingin dan gelap :disimpan dalam tempat dingin dan gelap :

Tabung dengan sumbat kapas wolTabung dengan sumbat kapas wol 1 minggu1 minggu Tabung tanpa penutupTabung tanpa penutup 1 minggu1 minggu Kontainer dengan sumbat putarKontainer dengan sumbat putar 3 minggu3 minggu Cawan petri disegel dengan kantong plastikCawan petri disegel dengan kantong plastik

3 minggu3 minggu

Kontrol kualitas dari media yang Kontrol kualitas dari media yang disiapkandisiapkan Pengujian pHPengujian pH Tes sterilisasiTes sterilisasi

Periksa secara rutin darah atau Periksa secara rutin darah atau komponen lain yang ditambahkan komponen lain yang ditambahkan dalam media setelah diautoclavedalam media setelah diautoclave..     

Ambil media dari penyimpanan dan Ambil media dari penyimpanan dan inkubasi pada suhu 37inkubasi pada suhu 3700C selama 2 hari. C selama 2 hari. Bila ada pertumbuhan lebih dari 2 Bila ada pertumbuhan lebih dari 2 koloni berarti media tersebut tidak koloni berarti media tersebut tidak dapat dipakai (tidak steril).dapat dipakai (tidak steril).     .    .

Kontrol kualitas dari media yang Kontrol kualitas dari media yang disiapkandisiapkan

Tes pelaksanaanTes pelaksanaan Uji pengamatan media yang Uji pengamatan media yang

dipergunakandipergunakan

MAC CONCAYMAC CONCAY

MAC CONCAY AGARMAC CONCAY AGAR

MacConkey agar plate (MC)MacConkey agar plate (MC) UseUse : For the : For the selective isolation, cultivation and differentiation selective isolation, cultivation and differentiation of coliformsand enteric pathogens based on the of coliformsand enteric pathogens based on the ability to ferment lactose. Lactose–fermening ability to ferment lactose. Lactose–fermening organisms appear as red to pink colonies. Lactose-organisms appear as red to pink colonies. Lactose-nonfermenting organisms appear as colorless or nonfermenting organisms appear as colorless or transparent coloniestransparent colonies

Control organismsControl organisms :   :  Escherichia coliEscherichia coli : Pink colonies (lactose : Pink colonies (lactose fermentation)fermentation)Proteus mirabilisProteus mirabilis : Colorless colonies ,no spreading : Colorless colonies ,no spreadingEnterococcusEnterococcus sp. : No growth sp. : No growth

IncubateIncubate : Aerobic, 35° C, 24 hrs.: Aerobic, 35° C, 24 hrs.Shelf life Shelf life : 4 weeks: 4 weeks   

BAPBAP

BAPBAP

BAPBAP

Blood agar plate (BA)Blood agar plate (BA) UseUse :  :  For For the isolation, cultivation and the isolation, cultivation and detection of hemolytic activity of detection of hemolytic activity of streptococci, pneumococci streptococci, pneumococci Control Control organismsorganisms :   :   Streptococcus pneumoniaeStreptococcus pneumoniae : Good : Good growth, Alpha - hemolysisgrowth, Alpha - hemolysis                            Streptococcus pyogenesStreptococcus pyogenes : Good : Good growth, Beta-hemolysis          growth, Beta-hemolysis          

IncubateIncubate: aerobic 35° C, 24 hrs.: aerobic 35° C, 24 hrs.Shelf lifeShelf life : 4 weeks: 4 weeks

Triple Sugar Iron agar slantTriple Sugar Iron agar slant

Triple Sugar Iron agar slant (TSI slant)Triple Sugar Iron agar slant (TSI slant) UseUse : : For the differentiation of members of the For the differentiation of members of the Enterobacteriaceae base on their fermentation of Enterobacteriaceae base on their fermentation of lactose, sucrose and glucose and the production of lactose, sucrose and glucose and the production of HH22S.S.

Control organismsControl organisms :  :  Escherichia coliEscherichia coli : A/A (G) : A/A (G)Shigella flexneriShigella flexneri : K/A : K/AProteus vugaris Proteus vugaris : K/A, H: K/A, H22S S Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosa : K/N : K/N

IncubateIncubate : Aerobic 35° C, 24 hrs : Aerobic 35° C, 24 hrsShelf lifeShelf life :  8  weeks:  8  weeks

Simmons’ Citrate Agar slantSimmons’ Citrate Agar slant UseUse : For the : For the differentiation of Gram-negative bacteria on the differentiation of Gram-negative bacteria on the basis of  citrate utilization. Bacteria which can basis of  citrate utilization. Bacteria which can utilize citrate as sole carbon source  turn medium utilize citrate as sole carbon source  turn medium blue.blue.

Control organismsControl organisms :  :  Klebsiella pneumoniae Klebsiella pneumoniae : Growth and blue color : Growth and blue color (positive) (positive)     Escherichia coli Escherichia coli : No growth, remains green : No growth, remains green (negative) (negative)     

IncubateIncubate : Aerobic 35° C, 24 hrs: Aerobic 35° C, 24 hrsShelf lifeShelf life :  8  weeks:  8  weeksPrice (Baht)Price (Baht) : 5 (return tube)  : 5 (return tube) 

Simmons’ Citrate Agar slantSimmons’ Citrate Agar slant

Kovac's reagentKovac's reagentSULFIT INDOL MOTILITY MEDIUMSULFIT INDOL MOTILITY MEDIUM

Kovac's reagentKovac's reagent UseUse : For determination of : For determination of bacteria that posses the bacteria that posses the enzyme tryptophanase are capable of cleaving enzyme tryptophanase are capable of cleaving tryptophan, thereby producing  indole,  pyruvic tryptophan, thereby producing  indole,  pyruvic acid  and ammonia. Indole can be detected in acid  and ammonia. Indole can be detected in tryptophan medium by observing  tryptophan medium by observing  the development of red color after adding  a the development of red color after adding  a solution containing   p-dimethylamino-solution containing   p-dimethylamino-benzaldehyde. (Kovac's reagent)benzaldehyde. (Kovac's reagent)

Control organismsControl organisms :  :           Escherichia coli Escherichia coli : Red  (Indole  positive) : Red  (Indole  positive) Klebsiella Klebsiella sp.sp. : remained yellow (Indole  : remained yellow (Indole  negative) negative) 

gramgramGram's stainGram's stain UseUse : For : For differentiating Gram-positive differentiating Gram-positive and  negative bacteria. and  negative bacteria.

Crystal violet, Gram's iodine, Crystal violet, Gram's iodine, Decolorizer and Safranin ; each Decolorizer and Safranin ; each 100100

Control organismsControl organisms :  : Escherichia coli Escherichia coli : red cell : red cell (Gram negative) (Gram negative) Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus : dark : dark purple cell (Gram positive) purple cell (Gram positive) 

Shelf lifeShelf life :   1 year:   1 year

Acid fast stainAcid fast stain

Acid fast stainAcid fast stain UseUse : For the : For the determination of the Mycobacterium,  determination of the Mycobacterium,  Nocardia, and  Corynebacterium Nocardia, and  Corynebacterium

Carbon fuchsin, 3% Acid alcohol Carbon fuchsin, 3% Acid alcohol and Methylene blue ; Carbon fuchsinand Methylene blue ; Carbon fuchsin

Control organismsControl organisms :  : Mycobacterium tubercurosis Mycobacterium tubercurosis : red cell  : red cell  Escherichia coli Escherichia coli : blue cell : blue cell 

Shelf lifeShelf life :   1 year:   1 year