Pengembangan Isolasi Minyak Atsiri dari Daun Nilam Pogostemon cablin Benth

dengan praproses Fermentasi

oleh Werdi Isna Retnowati

Pembimbing Fida Madayanti W, Ph.D

Program Studi KimiaFakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Institut Teknologi Bandung2010

AGENDA PRESENTASI

2

1 •Pendahuluan

2 •Tinjauan Pustaka

3 •Strategi Penelitian

4 •Hasil Penelitian

5 •Kesimpulan

PENDAHULUAN

Tujuan Peneliti

an

Kebutuhan pasar dunia

Potensi Indonesia Devisa negara

Pengembangan produksi belum

maksimal

TUJUAN PENELITIAN

Mendapatkan mikroorganisme unggul untuk digunakan dalam praproses fermentasi nilam

Mendapatkan minyak atsiri dari daun nilam (Pogostemon cablin Benth) dengan kadar minyak

yang memuaskan

STRATEGI PENELITIANKompos

Isolasi Mikroba

Karakterisasi

Kandidat utama

Fermentasi

Isolasi DNA

Kromosom

PCR Identifikasi jenis

Isolasi Minyak Nilam GCNilam

KESIMPULAN

1. Telah didapatkan mikroorganisme unggul yang dapat digunakan dalam praproses fermentasi

2. Dengan praproses fermentasi menggunakan mikroorganisme tersebut, diperoleh yield minyak nilam 6,51 kali lipat lebih banyak dibandingkan dengan isolasi tanpa fermentasi

3. Identifikasi mikroorganisme dan isolasi nilam dengan destilasi uap masih berlangsung

SEKIAN TERIMA KASIH

Isolasi Mikroorganisme (Koloni Tunggal)

KOMPOS •Sampling•1ml suspensi, sentrifuge

Suspensi Kompos •Pengenceran 1-12x•Sebarkan pada media padat

Koloni campuran •Pada pengenceran tertentu akan didapatkan beberapa koloni berbeda

Ekspresi Enzim

NB/PDA

Media CMC

Media CaCl2

Media Nilam

Media Kaya

STRATEGI PENELITIAN

Identifikasi mikrobaKandidat Utama

Isolasi DNA Kromosom PCR

Sequencing

Identifikasi Jenis

Mikroba

TINJAUAN PUSTAKA

18S rRNA rRNA komponen utama pada

ribosome, mengkode mRNA menjadi asam amino

Gen yang mengkode rRNA identifikasi spesiesType Large

SubunitSmall Subunit

Prokaryot 5S, 23S 16SEukaryot 5S, 5.8S, 28S 18S

Primer

Urutan (5’ 3’)

Posisi Annealing

Euk1209F

CAGGTCTGTGATGCCC

1423-1438

Uni1392R

GACGGGCGGTGTGTAC

1641-1627

Jumlah Basa

219

1419pb

514pb

396pb

214pb

Hasil PCR

Isolasi DNA Kromosom

TINJAUAN PUSTAKA

NILAM Pogostemon cablin Benth/ Nilam

aceh Pogostemon heyneanus Benth/

Nilam hutan atau Nilam jawa Pogostemon hortensis Backer/ Nilam

sabun

TINJAUAN PUSTAKA

Minyak Nilam Komponen utama:

Patchouli alkohol dan norpatchoulenol

Kegunaan:zat fiksatif

TINJAUAN PUSTAKA Isolasi Minyak Atsiri

Destilasi Uap

STRATEGI PENELITIAN

Gas Chromatography

Isolasi Minyak Nilam

Destilasi Uap Ekstraksi

Daun Nilam

• Isolasi Minyak Nilam

Fermentasi

• Mikroba diremajakan dalam media kaya selama 18 jam pada 37o C; 150rpm Starter

• Medium adaptasi terdiri dari 20%starter dan 80%slurry nilam (nilam:aquadest = 1:10])

• Inkubasi selama 18 jam pada 37o C; 150rpm

Media adaptasi nilam

• Fermentasi dilakukan dengan menyebarkan 10% media adaptasi ke dalam daun nilam steril

• Inkubasi selama selama 36 jam pada 37o C; dengan pengocokan berkala tiap 2 jam

Fermentasi

Ekstraksi 2 tahap

Minyak Hasil Fermentasi: 2,15mL (4,3%) Minyak tanpa Fermentasi: 0,33mL (0,66%) Tanpa Fermentasi:Fermentasi = 1:6,51

CMC CaCl2 Nilam Kaya TOTALNB A 8 6 9 1 24B 9 6 9 0.6 24.6C 9 2 9 0.9 20.9D 8 7 9 1 25E 8 7 9 1 25F 8 7 9 1 25G 8 2 9 1 20H 5 8 9 1 23I 5 7 9 0.9 21.9J 5 2 9 0.6 16.6K 3 2 9 0.5 14.5L 3 2 9 0.5 14.5

M 3 2 9 0.5 14.5N 5 7 9 0.5 21.5

PDA 1 2 2 8 9 212 2 2 8 9 213 5 2 6 9 22

• Nilai 10 dari skala 1-10 untuk

Aktivitas selulase tinggi

• Nilai 1 dari skala 1-10 untuk

Aktivitas lipase tinggi

• Nilai 10 dari skala 1-10 untuk

kemampuan tumbuh dalam media

nilam

Didapatkan 4 Kandidat Unggul:

KNB-f, KNB-d, KNB-a, dan KNB-b