Morfologi FIX

8/2/2019 Morfologi FIX

1/19

I. PENDAHULUANA. Latar Belakang

Metode pengecatan pertama kali ditemukan oleh Christian Gram pada

tahun 1884. Dengan metode ini bakteri dapat dikelompokkan menjadi dua, yaitu

bakteri gram positif dan gram negatif yang didasarkan dari reaksi atau sifat bakteri

terhadap zat tersebut. Reaksi atau sifat bakteri tersebut ditentukan oleh komposisi

dinding selnya sehingga pengecatan gram tidak bisa dilakukan pada

mikroorganisme yang tidak mempunyai dinding sel (Tryana, S.T, 2008).

Bakteri memiliki beberapa bentuk yaitu basil, kokus, dan spirilum. Bakteri

dapat dibedakan melalui teknik pewarnaan gram. Teknik pewarnaan tersebut

dapat menghasilkan warna merah dan ungu. Bakteri gram negatif ditandai dengan

pewarnaan merah, sedangkan yang positif berwarna ungu (Jawetz, 2005).

Teknik pewarnaan gram harus sesuai dengan prosedur karena dapat

mengakibatkan kesalahan identifikasi data apakah gram positif atau gram negatif,

sehingga diperlukan adanya praktikum ini agar mengetahui jalannya mekanisme

pewarnaan gram.

B. Tujuan1. Memahami dan melakukan pewarnaan gram terhadap jenis bakteri.2. Mengidentifikasi suatu jenis bakteri termasuk bakteri gram positif dan gram

negatif.

3. Mengamati berbagai morfologi bakteri.


2/19

II. MATERI DAN METODEA. Materi

Alat- alat yang digunakan pada praktikum morfologi adalah object glass,

pembakar spiritus, pipet tetes, dan mikroskop. Sedangkan bahan yang digunakan

pada praktikum morfologi adalah isolat bakteri, zat warna kristal violet/ ungu

(gram A), zat warna lugols iodin/ kalium iodida (gram B), zat warna alkohol 95 %

(gram C), zat warna safranin (gram D), dan aquades.

B. Metode


3/19

III. HASIL DAN PEMBAHASANA. Hasil

Gambar 1. 1 Salmonella pengamatan kelompok

Gambar 1.2 Salmonella di laboratorium


4/19

Gambar 2.1 Staphylococcus sp pada mikroskop

Gambar 2.2 Staphylococcus pada pustaka

B. Pembahasan

1. Perbedaan1.1 Bakteri

Bakteri merupakan mikroorganisme bersel tunggal, tidak berklorofil

dan berkembangbiak dengan cara membelah diri. Ukuran bakteri lebih kecil


5/19

dari protozoa maupun fungsi satu sel. Pengamatan-pengamatan yang dilakukan

Leewenhoek merupakan pengamatan yang menampakan penampilan kasar

bakteri yang hanya menampakan sel bulat, seperti batang atau spiral.

(Purnomo, 2005)

Perkembangan pengamatan sel bakteri sampai dengan sebelum tahun

1940-an meliputi teknik pewarnaan ternyata dapat memperbaiki apa yang

diamati Leewenhoek sehingga dapat lebih tepat mengamati morfologi bakteri

yang meliputi : bentuk, ukuran, struktur luar, dan pola penataan bakteri.

Morfologi bakteri dapat berupa morfologi koloni dan morfologi sel bakteri.

Berikut ini beberapa contoh morfologi koloni bakteri. (Purnomo, 2005)

Koloni bakteri merupakan kumpulan bakteri sejenis hasil reproduksi

yang mengumpul pada satu tempat di medium kultur atau kumpulan bakteri

pada kultur yang berasal dari hasil pertumbuhan atau keturunan dari satu sel

bakteri. Beberapa kelompok bakteri menunjukan ciri-ciri koloni yang saling

berbeda, baik dilihat dari bentuknya, elevasi, maupun bentuk tepi koloni.

Ukuran, bentuk, dan penataan sel merupakan ciri morfologi kasar sel bakteri.

(Purnomo, 2005)

Setelah ditemukan mikroskop elektron dan teknik-teknik memotong sel

menjadi irisan-irisan bagian sel, serta teknik isolasi senyawa sel maka

kemudian ditemukan ciri morfologi dan ciri biokimiawi yang lebih detail lagi.

Ciri morfologi dari irisan-irisan bagian sel ini kemudian kita sebut morfologi

struktur halus dari sel bakteri. (Purnomo, 2005).

Satuan ukuran bakteri menggunakan mikrometer (m) yang setara

dengan 10-3

milimeter (mm). Bakteri yang sering kita pelajari dalam

mikrobiologi umumnya berukuran 0,5-1,0 x 2,0-5,0 m, meskipun ada

beberapa yang di luar range ini, bahkan sampai lebih dari 100 m dan

sebaliknya bakteri pleomorfik seperti mikoplasma ukurannya berkisar 0,1 0,3

m. Oleh karena itu kalau kita melihat ukuran bakteri secara keseluruhan

lebarnya dapat berukuran 0,1 m dan panjangnya mencapai lebih dari 100 m.

(Purnomo, 2005)

Meskipun ukuran sel bakteri sangat kecil, tetapi dapat diukur

menggunakan mikrometer mikroskop biasa. Pengukur sel menggunakan


6/19

mikrometer okuler yang memiliki garis-garis berjarak sama (gambar kiri).

Jarak antar garis dalam mikrometer okuler dapat diukur menggunakan

mikrometer obyektif (mikrometer pentas) yang berfungsi sebagai mistar pada

proses pengukuran mikroskopis (gambar kanan). Oleh karena itu, mikroskop

yang dilengkapi dengan mikrometer okuler dapat digunakan tidak hanya

mengukur panjang-lebar bakteri tetapi juga dapat digunakan untuk mengukur

panjang-lebar sel organisme lainnya. (Purnomo, 2005).

Sel-sel bakteri dapat berbentuk seperti bola , elips (coccus), batang

(bacillus) dan spiral (heliks). Spesies-spesies tertentu bakteri menunjukan

adanya pola penataan sel, misalnya : berpasangan, bergerombol, membentuk

rantai atau filamen. Bakteri bentuk bola dan elips biasa disebut bentuk kokus

(kokus= buah beri). Kokus ada beberapa penataan yang berbeda- beda yang

dapat mencerminkan marga yang berbeda juga. Ada lima penataan kokus,

yaitu: diplokokus, tetrakokus, sarcina, streptokokus, dan stafilakokus.

(Purnomo, 2005).

Umumnya bakteri patogen tanaman berbentuk batang. Diantara bakteri

terdapat golongan yang mempunyai alat gerak yang disebut flagellum dan ada

yang tidak mempunyai alat gerak (atrichus). Bakteri yang hanya mempunyai

satu alat gerak disebut 'monotrichus', satu berkas alat gerak pada salah satu

ujung disebut 'lofotrichus', terdapat di kedua ujungnya disebut amphitrichus,

dan bila di seluruh tubuh disebut 'peritrichus'. (Purnomo, 2005)

Sebagian besar bakteri berkembangbiak secara aseksual, dengan cara

memanjangkan sel diikuti dengan pembelahan sel menjadi dua bagian sel

anakan. Pembelahan demikian kita sebut pembelahan biner melintang.

Pembelahan biner melintang merupakan suatu proses reproduksi aseksual.Pembelahan biner lebih banyak terjadi pada bakteri yang berkaitan dengan

tumbuh manusia. Bakteri-bakteri lain dapat berproduksi dengan proses

pembentukan spora, fragmentasi filamen, dan pertunasan. Pelajaran ini akan

dibahas lebih lajut pada bab pertumbuhan mikroorganisme. (Purnomo, 2005).


7/19

1.2 Khamir (Yeast)Tubuh atau talus khamir berupa sel tunggal. Khamir bersifat

mikroskopik sebagai sel bebas yang sederhana. Biasanya berbentuk bulat atau

lonjong, termasuk sel eukariotik. Berkembang biak secara seksual maupun

aseksual. Cara seksual yang umum dilakukan yaitu dua sel khamir melebur

(fusi) menjadi sel tunggal berbentuk kantong yang disebut askus. Di dalam

askus terbentuk satu sampai delapan spora, yang disebut askospora. Dalam

kondisi yang cocok, askus akan pecah selanjutnya askospora akan tumbuh

membentuk sel khamir baru. (Purnomo, 2005).

Cara aseksual yang biasa untuk pembiakan khamir menggunakan proses

aseksual yang disebut blastospora. Sel khamir pada awalnya akan terjadi

benjolan-benjolan (tunas) berbagai ukuran yang semakin membesar, kemudian

berangsur-angsur menyempit pada bagian yang berhubungan dengan dinding

sel induk sehingga akhirnya terpotong dari sel induknya.

Proses pertunasan (blastospora) berbeda dengan pembelahan biner yang

didahului oleh terbelahnya inti. Semua kelompok khamir dapat

berkembangbiak secara aseksual, tetapi tidak semua khamir dapat

berkembangbiak secara seksual. Khamir yang hanya berkembangbiak secara

aseksual dikelompokan ke dalam Deuteromycetes, sedangkan khamir yang

membentuk spora seksual dikelompokan sesuai dengan spora seksual yang

dibentuknya. Umumnya khamir yang berkembangbiak secara seksual

membentuk askospora sehingga dikelompokan ke dalam Ascomycetes.

Beberapa contoh khamir misalnya : Saccharomyces cerevisiae merupakan

khamir permukaan memproduksi gas sangat cepat, S. carsbergensis merupakan

khamir dasar karena memproduksi gas sangat lamban, Hansenula anomala(Ascomycetes), Candida albicans merupakan khamir yang tidak membentuk

spora seksual. (Purnomo, 2005)

1.3 JamurFungi merupakan organisme heterotrofik absorbtik yang memerlukan

senyawa organik untuk sumber tenaganya. Fungi dapat hidup pada benda

organik mati maupun organisme hidup. Mereka yang hidup dari bahan organik


8/19

mati disebut saprofit dan yang hidup pada organisme hidup disebut parasit.

Fungi saprofitik berperan penting dalam merombak sisa-sisa bahan organik

menjadi senyawa-senyawa yang sederhana dan dapat dimanfaatkan oleh

organisme lain. Selain sebagai perombak (dekomposer), fungi saprofitik juga

berperan penting dalam fermentasi industri, misalnya dalam industri minuman

anggur, antibiotik, tape, kecap dan masih banyak lagi. Sebagai dekomposer,

fungi juga merugikan manusia jika bahan organik yang dirombak merupakan

bahan yang kita butuhkan, misalnya : kayu, tekstil, makanan, produk pasca

panen pertanian dan bahan-bahan lain. (Purnomo, 2005)

Sebagai parasit, fungi dapat menyerang manusia, hewan dan tumbuhan.

Fusarium oxysporum, Phytophthora infestan, Coleto-trichum gloeosporoides

merupa-kan contoh fungi parasit yang menyebabkan penyakit pada tumbuhan.

(Purnomo, 2005)

Jamur memerlukan kelembaban yang tinggi, persediaan bahan organik,

dan oksigen untuk pertumbuhannya, meskipun akan tumbuh terbaik pada suhu

sekitar suhu kamar (20 320C). Kebanyakan bersifat saprofit atau hidup dari

bahan organik mati, lingkungan mengandung gula dan tidak asam.

Mekanisme reproduksi jamur disebut pembentukan spora. Spora jamur

harus dipikirkan sebagai sesuatu yang analog dengan biji pada tumbuhan yaitu

sebagai alat pertumbuhan, meskipun semua bagian jamur mampu tumbuh.

Spora jamur dapat terbentuk karena proses perkawinan (seksual) maupun tidak

(aseksual). Spora seksual diproduksi dengan terjadinya peleburan (fusi) dua

sel, sedangkan spora aseksual dibentuk oleh satu sel tanpa adanya pembuahan

(fertilisasi) oleh individu kedua. (Purnomo, 2005)

Table 1. Perbedaan Morfologi Bakteri, Yeast dan Jamur

No Pembeda Bakteri Yeast Jamur

1. Bentuk Tidak terlalu bulat

dan circular

Seperti kapas dan

circular

Bulat


9/19

2. Permukaan Mengkilap dan

halus

Tidak rata Permukaan kusam

dan licin

3. Sifat Uniseluler Seluler Uniseluler

2. Morfologi2.1 Staphylococcus sp

Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram Positif, tidak bergerak,

tidak berspora dan mampu membentuk kapsul. (Boyd, 1980), berbentuk kokus

dan tersusun seperti buah anggur (Todar, 2002) sebagaimana terlihat pada

gambar 2.4. Ukuran Staphylococcus berbeda-beda tergantung pada media

pertumbuhannya. Apabila ditumbuhkan pada media agar, Staphylococcus

memiliki diameter 0,5-1,0 mm dengan koloni berwarna kuning. Dinding selnya

mengandung asam teikoat, yaitu sekitar 40% dari berat kering dinding selnya.

Asam teikoat adalah beberapa kelompok antigen dari Staphylococcus. Asamteikoat mengandung aglutinogen dan N-asetilglukosamin. (Boyd, 1980).

2.2 Salmonella spSalmonella berbentuk batang, tidak berspora dan tidak bersimpai tetapi

mempunyai flagel feritrik (fimbrae), pada pewarnaan gram bersifat gram

negatif, ukuran 2- 4 mikrometer x 0,5- 0,8 mikrometer dan bergerak. Pada

biakan agar koloninya besar, bergaris tengah 2- 3 milimeter, bulat, agak

cembung, jernih, lucin, dan tidak menyebabkan hemolisis (Gupte, 1990).

2.3 Candida spCandida tampak sebagai ragi lonjong, bertunas, merupakan gram

positif, berukuran 2-3 x 4-6 mikron dan sel-sel bertunas bersifat gram positif

yang memanjang menyerupai hifa disebut pseudohifa (Jawetz, 1986). Candida

tumbuh pada suhu 37 C. Pertumbuhan pada media Sabaroud Glukosa Agar


10/19

sesudah 3 hari berbentuk koloni telah dapat dilihat dengan jelas, tampak koloni

yang halus dan licin serta berbau ragi yang khas. (Dumilah S, 1982)

Table 2. Data Rombongan Morfologi Mikroorganisme

Kel Isolat

Morfologi

Ukuran Bentuk Deviasi Permukaan Margin

1 Salmonella thypii

Warna ungu

Gram positif

Moderate Irregular Flat Halus

mengkilap

Lobate

2 Salmonella thypii

Warna merah

Gram negative

Small Irregular Flat Halus

mengkilap

Lobate

3 Staphylococcus

aureus

Pin

point

Circular Flat Halus

mengkilap

Lobate


11/19

Warna ungu

Gram positif

4 Staphylococcus

aureus

Warna ungu

Gram positif

Pin

point

Circular Flat Halus dan

Keruh

Entire

5 Salmonella thypii

Warna merah

Gram negatif

Pin

point

Circular Flat Kasar Entire

6 Salmonella thypii

Large Circular Flat Kusam Undulate


12/19

Warna merah

Gram negatif

7 Staphylococcus

aureus

Warna ungu

Gram positif

Pin

point

Circular Flat Halus

mengkilap

Entire

8 Staphylococcus

aureus

Warna ungu

Gram positif

Pin

point

Circular Flat Halus

mengkilap Entire


13/19

3. Fungsi ReagenZat warna adalah senyawa kimia berupa garam-garam yang salah satu

ionnya berwarna. Garam terdiri dari ion bermuatan positif dan ion bermuatan

negatif. Senyawa-senyawa kimia ini berfungsi untuk membedakan bakteri-bakteri

karena reaksinya dengan sel bakteri akan memberikan warna berbeda. Perbedaan

inilah yang digunakan sebagai dasar pewarnaan bakteri (Sutedjo , 1991).

Pengecatan Gram merupakan salah satu teknik pewarnaan yang digunakan

untuk mengidentifikasi bakteri (mikroorganisme). Zat warna yang digunakan pada

pengecatan Gram meliputi crystal violet , yodium , alkohol dan safranin. Fungsi

dari masing-masing zat warna tersebut adalah :

3.1 Kristal VioletBerwarna ungu. Merupakan pewarna primer (utama) yang akan

memberi warna mikroorganisme target. Crystal Violet bersifat basa sehingga

mampu berikatan dengan sel mikroorganisme yang bersifat asam , dengan

begitu sel mikroorganisme yang transparan akan terlihat berwarna (Ungu).

3.2 YodiumMerupakan pewarna Mordan , yaitu pewarna yang berfungsi

memfiksasi pewarna primer yang diserap mikroorganisme target. Pemberian

yodium pada pengecatan Gram dimaksudkan untuk memperkuat pengikatan

warna oleh bakteri.

3.3 AlkoholSolven organik yang berfungsi untuk membilas atau melunturkan

kelebihan zat warna pada sel bakteri (mikroorganisme). Pemberian alkohol

pada pengecatan ini dapat mengakibatkan terjadinya dua kemungkinan :

1. Mikroorganisme (bakteri) akan tetap berwarna ungu

2. Bakteri menjadi tidak berwarna


14/19

3.4 SafraninSafranin merupakan pewarna tandingan atau pewarna sekunder. Zat ini

berfungsi untuk mewarnai kembali sel-sel yang telah kehilangan pewarna

utama setelah perlakuan dengan alkohol. Dengan kata lain , memberikan warna

pada mikroorganisme non target. (Wahyuningsih , 2008)

Zat -zat warna tersebut dapat berikatan dengan komponen dinding sel

bakteri dalam waktu singkat. Karena itulah rentang waktu pemberian zat warna

yang satu ke yang lainnya tidak lama sehingga proses identifikasi bakteri

berlangsung cepat (efisiensi waktu). Prosedur (tahap) diatas dapat dilakukan

sesuai dengan waktu yaitu:

(1) Waktu 30 detik 1 menit untuk pewarnaan dengan larutan crystal violet

kemudian dibilas dengan air mengalir selama 2 detik. Pewarnaan selama 1

menit bertujuan agar cat ini dapat melekat sempurna pada dinding bakteri

(2) Waktu 1 menit untuk penambahan larutan Yodium kemudian juga dibilas

dengan air yang mengalir , dilakukan selama 1 menit agar pengikatan

warna oleh bakteri menjadi lebih kuat.

(3) Waktu 1 menit dilakukan pembilasan dengan alkohol kemudian dibilas

dengan air yang mengalir , dilakukan selama 1 menit agar zat warna dapat

luntur secara sempurna dan tidak ada yang tersisa.

(4) Waktu 30-60 detik dilakukan penambahan larutan safranin, kemudian

dibilas dengan air yang mengalir.

(Prescott,2002)

Table 3. Urutan pewarnaan pada pengecatan Gram beserta hasilnya

no Pewarna Reaksi dan Penampakan pada Sel Bakteri

Gram Positif Gram Negatif

1 Crystal

Violet(UK)

Sel berwarna ungu Sel berwarna ungu

2 Yodium (Y) KomplekUK-Y terbentuk di

dalam sel, sel tetap berwarna

KomplekUK-Y terbentuk di

dalam sel, sel tetap berwarna


15/19

(Pelczar , 2007).

ungu. ungu

3 Alkohol Dindind sel terdehidrasi ,

pori-pri menciut , daya

rembes dinding sel dan

membrane menurun.

Komplek UK-Y tidak dapat

keluar sel , sel tetap ungu.

Lipid terekstraksi dari

dinding sel , pori-pori

mengembang sehingga

komplek UK-Y keluar sel.

Sel tidak berwarna.

4 Safranin Sel tidak terpengaruh. Sel Tetap

berwarna ungu.

Sel menyerap zat warna dan sel

berwarna merah


16/19

IV.KESIMPULAN DAN SARANA. Kesimpulan

Percobaan kali ini didapatkan kesimpulan sebgai berikut:

1. Bakteri dapat dibedakan melalui teknik pewarnaan gram. Teknik pewarnaantersebut dapat menghasilkan warna merah dan ungu. Bakteri gram negatif

ditandai dengan pewarnaan merah, sedangkan yang positif berwarna ungu.

2. Salmonella sp dari isolate ikan mentah termasuk bakteri gram negative,karena hasil pengamtan secara mikroskopis berwarna merah.

3. Sel- sel bakteri secara khas berbentuk kokus, basil, dan spiral. Kokus adalahbakteri yang serupa bola- bola kecil. Kokus yang bergandeng dua disebut

diplokokus, yang mengelompok berempat disebut tetrakokus. Basil adalah

bakteri panjang berbentuk batang, yang bergandengan panjang disebut

streptobasil dan yang bergandeng dua disebut diplobasil. Spiral adalah

baktreri yang bengkok yang menyerupai spiral.

B. SaranPelaksanaan praktikum sebaiknya para praktikan memperhatikan

penjelasan asisten supaya dalam pelaksanaanya dapat berlangsung sesuai tujuan

yang diinginkan.


17/19

DAFTAR REFERENSI

Boyd, Rf. And Marr, JJ. 1980. Medical Microbiology. Little, Brown and Co.,

Boston.

Dumilah S. Suprihatin, DIP. Bact. 1982. Candida dan Candidiasis Pada

Manusia. FKUI. Jakarta

Gupte S. 1990. Mikrobiologi Dasar. Binarupa Aksara. Jakarta.

Jawets, Melnick. 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta :Salemba Medika

Jawetz, Melnick, dkk. 1986. Mikrobiologi Untuk Profesi Kesehatan. Penerbit

Buku Kedokteran. Jakarta.

Pelczar ,M.J . 2007 . Dasar-Dasar Mikrobiologi . Universitas Indonesia Press :

Jakarta.

Prescott, H. K., 2002. Microbiology. Mc Graw Hill : New York.

Purnomo, Bambang. 2005. Bahan Bacaan Kuliah : Dasar-dasar Mikrobiologi.

PS. IHPT. Faperta Unib.

Sutedjo , M . 1991. Mikrobiologi Tanah. Rineka Cipta : Jakarta

Todar, K. 2002. Growth of bacterial population.

http://www.textbookofbakteriology.net.Diakses 7 April 2012

Tryana, S.T. 2008. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Malang: Djambatan

Wahyuningsih . 2008 . Pengecatan Gram . Universitas Jenderal Soedirman ,

Fakultas Pertanian : Purwokerto.
http://www.textbookofbakteriology.net/http://www.textbookofbakteriology.net/http://www.textbookofbakteriology.net/


18/19


19/19

Morfologi FIX

Documents

Transcript of Morfologi FIX