Modul Praktikum

Ekotoksikologi Perairan (M10A135)

Semester Ganjil TA 2014/2015

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN UNIVERSITAS PADJADJARAN

2014

Modul 1

Uji Toksisitas Akut

MODUL 1 Uji Toksisitas Akut

POKOK BAHASAN :

Pemaparan dan Pengamatan Uji Toksisitas Akut

TUJUAN PRAKTIKUM :

Memahami dan mampu melaksanakan persiapan, pemaparan, dan pengamatan Uji

Toksisitas Akut

TINJAUAN PUSTAKA :

Uji Toksisitas Akut merupakan bagian dari Uji Toksisitas Kuantitatif yang dilakukan

dalam jangka waktu yang singkat sebagai akibat dari pemaparan jangka pendek terhadap

suatu bahan toksik. Efek akut dapat terjadi dalam selang waktu beberapa jam, hari atau

minggu. Parameter yang dapat diamati dari Uji Toksisitas Akut pada umumnya adalah

Kematian (Mortality). Suatu bahan kimia dinyatakan berkemampuan toksik akut bila aksi

langsungnya mampu membunuh 50% atau lebih populasi uji dalam selang waktu yang

pendek, misal 24 jam, 48 jam s/d 14 hari.

PROSEDUR PELAKSANAAN PRAKTIKUM :

Alat :

Botol Vial 20 mL

Micropippet

Pipet Tetes/ Pasteur

Gelas Ukur 5 mL

Beaker Glass 250 mL

Pengaduk Kaca

Kaca Pembesar (Loop)

Hand Counter

Bahan :

Artemia sp.

Dhapnia sp.

Timbal (Pb)

Merkuri (Hg)

Tembaga (Cu)

Besi (Fe)

Krom (Cr)

Kertas Label

Tissue Laboratorium

Gloves

Prosedur :

Metode Uji Toksisitas Akut terhadap larva Artemia dan Daphnia dimodifikasi dari

prosedur yang dilakukan oleh Meyer et.al. (1982) yakni sebagai berikut :

1. Penyiapan Larva Artemia dan Daphnia; diawali dengan dekapsulisasi Kista Artemia

dan penyiapan Daphnia;

2. Dalam vial yang telah diisi air medium (Air laut untuk Larva Artemia dan Air

tawar untuk Daphnia) sebanyak 9 mL dimasukkan masing-masing 10 ekor larva

berumur 24 - 48 jam (1- 2 hari) dengan menggunakan transpettor atau pipet tetes

sampai volume air mencapai 10 mL.

3. Dengan menggunakan Micropippet, bahan toksik uji (Timbal (Pb)e / Merkuri (Hg) /

Tembaga (Cu) / Besi (Fe) / Krom (Cr)) dengan variasi konsentrasi yang masing-

masing telah ditentukan, dimasukkan ke dalam vial sebanyak 1 %

4. Pengamatan dilakukan selama 24 jam dengan selang pengamatan 15 menit, 30

menit, 1 jam, 2 jam, 4 jam, 8 jam, 16 jam dan 24 jam. Mortalitas diamati dengan cara

menghitung jumlah larva yang yang mati.

Prosedur Analisis Data

Analisis data yang digunakan untuk menentukan nilai LC50-24 jam adalah Analisis Probit

yang mengacu pada Hubert (1979) yaitu sebagai berikut :

Hubungan nilai logaritma konsentrasi bahan toksik uji dan nilai Probit dari persentase

mortalitas hewan uji merupakan fungsi linear Y = a + bx. Nilai LC50-24 diperoleh dari

10 ekor larva Artemia/ Dhapnia

Larutan Stock Bahan Uji

Gambar 1.1.

Ilustrasi Pemaparan Uji Toksisitas Akut

anti log m, dimana m merupakan logaritma konsentrasi bahan toksik pada Y = 5, yaitu

nilai Probit 50% hewan uji, sehingga persamaan regresi menjadi :

Dengan nilai a dan b diperoleh berdasarkan persamaan sebagai berikut :

………………………………….. (1)

………………………………….(2)

Persamaan regresi = Y = a + bx

LC50-24 jam = anti log m, dimana :

…………….(3)

Keterangan :

Y : Nilai Probit Mortalitas

X : Logaritma konsentrasi bahan uji

n : banyaknya perlakuan

a : konstanta

b : slope/ kemiringan

m : nilai X pada Y = 5

LC50-24 jam : anti log m

m = 5 – a b

b = ∑ XY – 1/ n (∑ X ∑Y) ∑ X2 – 1/ n (∑ X)2

a = 1/ n (∑Y – b ∑ X)

m = 5 – a b

b

FORMAT TABULASI DATA PENGAMATAN TOKSISITAS AKUT

1. Data per Kelompok

Format Tabulasi Data Pengamatan Mortalitas Hewan Uji per Kelompok

Kelompok : ………………………………………

Jenis Bahan Toksik : ………………………………………

Konsentrasi Bahan Toksik : ………………………………………

Waktu

Dedah

Artemia Daphnia Keterangan

(1) (2) (3) (1) (2) (3)

15 menit

30 menit

1 jam

2 jam

4 jam

6 jam

8 jam

16 jam

24 jam

Jumlah

2. Data Kelas

a. Format Tabulasi Data Persentase Mortalitas (p) Hewan Uji setelah pemaparan 24 jam

Jenis Hewan Uji : ………………………………………

Jenis Bahan Toksik : ………………………………………

Ulangan Konsentrasi

kontrol ppm ppm ppm

(1)

(2)

(3)

Rata-rata

b. Format Tabulasi Data Analisis Probit LC50-24 jam

Jenis Hewan Uji : ………………………………………

Jenis Bahan Toksik : ………………………………………

d

(Konsentrasi

Uji)

N

(jumlah

hewan

uji)

r

(Mortalitas

hewan uji)

p

(%Mortalitas)

X

(Log

Konsentrasi)

Y

(Nilai Probit

% Mortalitas)

XY

ppm 10

ppm 10

ppm 10

Jumlah ( ∑ ) ∑ X ∑Y ∑XY

b = …………………….. Persamaan (1)

a = ……………………. Persamaan (2)

m = ……………………. Persamaan (3)

LC50-24 jam = anti Log m = ………………… ppm

Contoh Skema Prosedur Pengenceran Bahan Toksik

Bahan uji :……………...

Konsentrasi Awal :……………...

PERTANYAAN MODUL 1 :

*) tuliskan jawaban di Buku Jurnal masing-masing!

1. Sebutkan sifat dan karakteristik dari kelima bahan toksik yang digunakan dalam

pelaksanaan praktikum !

2. Hitunglah berapa volume Larutan bahan toksik yang harus diambil dari Larutan

Stock dengan Konsentrasi 2500 mg/L untuk mendapatkan Konsentrasi Akhir di

botol Vial (10 mL) sebesar 25 ; 50 ; dan 100 mg/L? (Gunakan Rumus Pengenceran!)

Pembagian Kelompok

Kelompok Toksikan Konsentrasi Organisme Uji

Dhapnia Arthemia

1

Timbal (Pb)

Kontrol

2 5 ppm

3 25 ppm

4 50 ppm

5

Merkuri (Hg)

Kontrol

6 0.05 ppm

7 0.01 ppm

8 0.10 ppm

9

Tembaga (Cu)

Kontrol

10 0.05 ppm

11 0.2 ppm

12 1 ppm

13

Krom (Cr)

Kontrol

14 1 ppm

15 10 ppm

16 25 ppm

17

Besi (Fe)

Kontrol

18 0.1 ppm

19 5 ppm

20 10 ppm