7/23/2019 metode-fiko.doc

1/3

2. METODE

A. Alat dan Bahan

Alat dan bahan yang digunakan pada penelitian kultivasi mikroalga ini yaitu

sampel mikroalga, selang udara yang digunakan untuk aerasi pada saat kultivasi,

Haemocytometer yang digunakan untuk perhitungan densitas sel mikroalga,

mikroskop yang digunakan untuk pengamatan jumlah sel mikroalga, centrifuge tubes

yang digunakan sebagai wadah sampel mikroalga, wadah kultur digunakan untuk

tempat media kultur dan mikroalga yang akan dikulturkan, media kultur yang

digunakan sebagai medium pertumbuhan mikroalga yang berupa f/2 yang terdiri

medium f/2 yaitu: Fel.!"2#, $a2%&'A.2"2#, u(#).*"2# +,- mg/m,$a20o#).2"2# +!,1 mg/m, n(#).3"2# +22 mg/m, ol2.)"2# +45

mg/m, 0nl2.)"2#, vitamin B42 +4 mg/m, biotin +5,4 mg/m, dan thiamin

"l, $a$#1 +3* mg/m dan $a"26#)7"2# +* mg/m,dan Laminair Air Flow

Cabinet yang digunakan sebagai tempat steril dalam pembuatan medium maupun

pada saat mikroalga akan di masukkan ke botol kultur.

B. ara kerja

ara kerja yang dilakukan pada penelitian kultivasi mikroalga terdiri atas :

4. 8ultivasi mikroalga

40enyiapkan stok media f/2 sesuai dengan resep yaitu Fel.!"2#,

$a2%&'A.2"2#, u(#).*"2# +,- mg/m, $a20o#).2"2# +!,1 mg/m,

n(#).3"2# +22 mg/m, ol2.)"2# +45 mg/m, 0nl2.)"2#, vitamin

B42 +4 mg/m, biotin +5,4 mg/m, dan thiamin "l, $a$#1 +3* mg/m

dan $a"26#)7"2# +* mg/m.

2(tok media disterilisasi dengan 9ara filtrasi denganMilipore membrane 5,22

mikrometer

1Air laut dan alat7alat disterilisasi dengan autoclave selama 4*725 menit dengan

suhu 4245 dan tekanan 4 atm.

)(tok kultur mikroalga diambil dan dimasukkan ke dalam wadah kultur yang

berisi media yang sudah disterilisasi. (ebaiknya volume stok kultur sebesar 4/*

atau 25 dari volume medium dengan kepadatan awal sel total dalam

keseluruhan volume akhir minimal sekitar 45725 ; 45.555 sel/ml.

*

7/23/2019 metode-fiko.doc

2/3

2. 6engambilan data jumlah sel mikroalga

4 .(ampel kultur diambil setiap )- jam selama masa inkubasi.

2 =umlah sel dihitung dibawah mikroskop dengan menggunakan $eubauer

"aemo9ytometer.

1 8ultur diambil kemudian diamati di bawah mikroskop dengan bantuan

#ptiab.

) 6erhitungan jumlah sel dibantu dengan menggunakan hand9ounter. &i9atat

jumlah sel yang terhitung.

. Analisis &ata

"asil perhitungan sel dengan haemo9ytometer di konversi menjadi densitas sel

+sel/m dengan rumus sebagai berikut:

&ensitas sel +sel/m > =umlah sel terhitung ? * ? 45)

6erhitungan doubling time dan spe9ifi9 growth rate menggunakan data dari

densitas sel. &oubling time dihitung dengan rumus sebagai berikut:

n+$t/$5>+ln 2t/td

td>+ ln 2t/ n+$t/$5

(etelah doubling time diperoleh, maka dihitung spe9ifi9 growth rate dari kultur

mikroalga dengan rumus:

@> 5,!1/ td

7/23/2019 metode-fiko.doc

3/3