makalah pml mikro

download makalah pml mikro

of 39

Transcript of makalah pml mikro

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    1/39

    BAB I

    PENDAHULUAN

    A. Latar Belakang

    Menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI No.43 tahun 2013 tentang cara

    penyelenggaraan laboratorium klinik yang baik bahan laboratorium yang

    !iatur oleh P"RM"NK"# yaitu ter!iri !ari reagen bahan stan!ar bahan

    kontrol air !an me!ia.

    #ecara umum me!ium atau me!ia a!alah substansi yang ter!iri atas

    campuran $at%$at makanan &nutrien' yang !ipergunakan untuk pemeliharaan

    !an pertumbuhan mikroorganisme. Mikroorganisme (uga merupakan makhluk

    hi!up untuk pemeliharaannya !ibutuhkan me!ia yang harus mengan!ung

    semua $at yang !iperlukan untuk pertumbuhannya yaitu antara lain senya)a%

    senya)a organik &protein karbohi!rat lemak mineral !an *itamin'.

    #e!angkan menurut P"RM"NK"# RI Nomor 43 tahun 2013 me!ia a!alah

    suatu bahan yang ter!iri atas campuran nutrisi &nutrient' yang !ipakai untuk

    menumbuhkan mikroba.

    Mikroorganisme mengubah bahan makanan sebagai sumber energi !an

    untuk sintesis bahan sel untuk memenuhi kebutuhan hi!upnya. Peran utama

    nutrien a!alah sumber energi bahan pembangun sel !an sebagai aseptor

    elektron !alam reaksi bioenergenik. +akteri meman,aatkan nutrisi me!ia

    berupa molekul%molekul kecil yang !irakit untuk menyusun komponen sel.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    2/39

    Pembuatan suatu me!ia yang !itun(ukan untuk menumbuhkan

    mikroorganisme harus memenuhi beberapa syarat penting yaitu-

    1. Mengan!ung nutrisi yang !ibutuhkan oleh mikroorganisme.

    2. Memiliki kelembaban optimum bagi pertumbuhan mikroorganisme.

    3. Mengan!ung oksigen &kultur bakteri aerob' !an p yang sesuai.

    4. /i!ak mengan!ung $at%$at penghambat !an harus steril.

    alam pemilihan me!ia yang akan !ipergunakan harus

    mempertimbangkan beberapa aspek !iantaranya yaitu mempertimbangkan

    tu(uan pemeriksaan stabilitas me!ia transportasi !an nilai ekonomis.

    Pereaksi atau sering !isebut reagen a!alah suatu $at kimia yang !igunakan

    !alam suatu reaksi untuk men!eteksi mengukur memeriksa !an

    menghasilkan $at lain. Menurut tingkat kemurniannya reagen atau $at kimia

    !ibagi men(a!i reagen tingkat analitis !an $at kimia tingkat lain. at kimia

    yang !igunakan !i laboratorium klinik ialah $at kimia tingkat analitis atau

    beberapa bahan kimia organik pa!a tingkat kemurnian kimia)i yang telah

    mele)ati tahap pengu(ian sebelum !ipakai secara rutin.

    Menurut cara pembuatannya reagen !ibagi men(a!i reagen buatan sen!iri

    !an reagen (a!i atau komersil yang telah !ibuat oleh pabrik. #uatu reagen

    harus mempunyai bahan stan!ar yang !igunakan sebagai acuan !alam

    melakukan pemeriksaan karena telah !iketahui konsentrasi !an kemurnian

    yang telah !iu(i !engan cara penimbangan. #e!angkan bahan kontrol a!alah

    bahan yang !igunakan untuk memantau ketepatan suatu pemeriksaan !i

    laboratorium atau untuk menga)asi kualitas hasil pemeriksaan sehari%hari.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    3/39

    B. Rumusan Masalah

    C. Tujuan

    Penulisan makalah ini bertu(uan untuk membantu bagaimana cara

    membuat me!ia !an reagen khususnya untuk laboratorium mikrobiologi

    !engan benar selain itu (uga untuk mengin,ormasikan bagaimana cara

    mengontrol !an menyimpan reagen !engan baik.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    4/39

    BAB II

    ISI

    +ahan laboratorium yang !iatur !alam Peraturan Menteri Kesehatan antara lain

    reagen !an me!ia. al%hal yang akan !ibahas a!alah mengenai macam (enis

    !asar pemilihan penga!aan !an penyimpanan.

    A. Macam !en"s

    1. Reagen

    Pereaksi atau sering !isebut reagen a!alah suatu $at kimia yang !igunakan

    !alam suatu reaksi untuk men!eteksi mengukur memeriksa !an

    menghasilkan $at lain.

    a. Menurut tingkat kemurniannya reagen $at kimia !ibagi men(a!i-

    1' Reagen /ingkat nalitis &Analytical Reagent R'

    Reagen tingkat analitis a!alah reagen yang ter!iri atas $at%$at kimia

    yang mempunyai kemurnian sangat tinggi. Kemurnian $at%$at tersebut

    !ianalisis !an !icantumkan pa!a botol )a!ahnya. Penggunaan bahan

    kimia R pa!a laboratorium kesehatan ti!ak !apat !igantikan !engan

    $at kimia tingkat lain.

    2' Reagen /ingkat ain

    Reagen tingkat lain terse!ia !alam tingkatan !an penggunaan yang

    berbe!a yaitu-

    a' tingkat kemurnian kimia)i &chemically pure grade'.

    beberapa bahan kimia organik bera!a pa!a tingkatan ini tetapi

    penggunaannya sebagai reagen laboratorium kesehatan harus

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    5/39

    mele)ati tahap pengu(ian yang teliti sebelum !ipakai rutin. /i!ak

    a!anya $at%$at pengotor pa!a satu lot ti!ak berarti lot%lot yang lain

    pa!a tingkat ini cocok untuk analisis.

    b' tingkat praktis &practical grade'.

    c' tingkat komersial &commercial grade'.

    merupakan ka!ar $at kimia yang bebas !iper(ual belikan !i pasaran

    misalnya alkohol 50 6.

    !' tingkat teknis &technical grade'.

    umumnya $at kimia !alam tingkatan ini !igunakan !i in!ustri%

    in!ustri kimia.

    at kimia yang !igunakan !i aboratorium Klinik ialah $at kimia tingkat

    analitis atau beberapa bahan kimia organik pa!a tingkat kemurnian

    kimia)i yang telah mele)ati tahap pengu(ian sebelum !ipakai rutin.

    Ketiga (enis tingkatan $at kimia lainnya ti!ak boleh !igunakan sebagai

    reagen !i laboratorium kesehatan.

    b. Menurut cara pembuatannya !ibagi men(a!i-

    1' reagen buatan sen!iri

    2' reagen (a!i &komersial'

    reagen (a!i a!alah reagen yang !ibuat oleh pabrikpro!usen.

    2. Me!ia

    Me!ia a!alah suatu bahan yang ter!iri atas campuran nutrisi &nutrient' yang

    !ipakai untuk menumbuhkan mikroba. #upaya mikroba !apat tumbuh !engan

    baik !alam suatu me!ia perlu !ipenuhi syarat%syarat sebagai berikut-

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    6/39

    a. arus mengan!ung semua nutrisi yang mu!ah !igunakan oleh mikrobia.

    b. arus mempunyai tekanan osmose tegangan permukaan !an p yang

    sesuai.

    c. /i!ak mengan!ung $at%$at penghambat.

    !. arus steril.

    7enis me!ia !apat !igolongkan ber!asarkan-

    a. #usunan kimia

    +er!asarkan susunan kimianya ter!apat berbagai (enis me!ia yaitu-

    1' Me!ia anorganik- me!ia yang tersusun !ari bahan%bahan anorganik

    misalnya silika gel.

    2' Me!ia organik- me!ia yang tersusun !ari bahan%bahan organik.

    3' Me!ia sintetis- me!ia buatan !engan ramuan yang tertentu baik ready

    for use maupun ramuan sen!iri.

    4' Me!ia non sintetis- me!ia alamiah misalnya me!ia )ortel me!ia

    kentang !an lain%lain.

    b. Konsistesi kepa!atan

    +er!asarkan konsistensinya ter!apat berbagai (enis me!ia yaitu-

    1' Me!ia cair &liquid medium' yaitu me!ia bentuk cair &broth' misalnya

    air pepton nutrient broth Tarozzi !an lain%lain.

    2' Me!ia setengah pa!at &semi solid medium' misalnya #IM agar Carry

    & Blair !an lain% lain.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    7/39

    3' Me!ia pa!at &solid medium' yaitu me!ia bentuk pa!at beku misalnya

    Potato Dextrose Agar utrient Agar Blood Agar serta me!ia%me!ia

    lainnya yang berbasis agar.

    c. 8ungsi me!ia

    +er!asarkan ,ungsinya ter!apat berbagai (enis me!ia yaitu-

    1' Transport me!ia- perbenihan yang !igunakan untuk mengirimkan

    specimen !ari suatu tempat ke laboratorium.

    9ontoh- Carry & Blair untuk tin(a rectal s!ab "tuart !an me!ia

    Amiesuntuk usap naso,aring.

    2' #nrichment me!ia- perbenihan yang !igunakan untuk memperbanyak

    bakteri baik yang a!a !i !alam spesimen maupun koloni%koloni yang

    kecil%kecil.

    9ontoh- Brain $eart %nfussion Broth untuk !arah &aerob' !an

    Thioglycolate Brothuntuk !arah &anaerob'.

    3' #nrichment exclusie me!ia- perbenihan yang !apat memperbanyak

    segolongan bakteri se!angkan bakteri lainnya !ihambat atau ti!ak

    !apat tumbuh.

    9ontoh- Alcalis Pepton 'ater untuk (ibrio sp) !an "elenite Broth

    untuk "almonella s).

    4' #xclusie me!ia- perbenihan yang hanya !apat !itumbuhi segolongan

    bakteri sa(a se!angkan bakteri lainnya ti!ak tumbuh !an !apat !ibe!a%

    be!akan koloni spesies satu !engan lainnya.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    8/39

    9ontoh- Blood Tellurite Plate untuk !i,teri !an $i!e agar untuk

    #nterococcus sp).

    :' Me!ia uni*ersal- perbenihan yang !apat !itumbuhi oleh hampir semua

    (enis bakteri.

    9ontoh-Blood AgarBrain $eart %nfusion Agar Tryptose "oy.

    ;' "electieme!ia- perbenihan yang !apat !igunakan untuk membe!akan

    golongan satu !engan lainnya sehingga !apat !ipilih koloni%koloni

    bakteri yang akan !icari.

    9ontoh-Blood AgarBrain $eart %nfussion Agar "almonella "higella

    Agar untuk "almonella "higella.

    5' Me!ia i!enti,ikasi- perbenihan untuk satu (enis ataupun untuk

    menentukan (enis bakteri biasanya !igunakan beberapa (enis me!ia.

    9ontoh- Me!ia gula%gula #imon

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    9/39

    2. pro!uksi pabrik yang telah !ikenal !an mempunyai sensiti*itas !an

    spesi,isitas yang tinggi

    3. !eskripsi lengkap !ari bahan atau pro!uk

    4. mempunyai masa ka!aluarsa yang pan(ang

    :. *olume atau isi kemasan

    ;. !igunakan untuk pemakaian ulang atau sekali pakai

    5. mu!ah !iperoleh !i pasaran

    =. besarnya biaya tiap satuan &nilai ekonomis'

    >. pemasok *en!or

    10. kelancaran !an kesinambungan penga!aan

    11. pelayanan purna (ual !an

    12. ter!a,tar sebagai bahan laboratorium &reagen !an me!ia' !an alat

    kesehatan !i Kementerian Kesehatan.

    #elain hal%hal tersebut !i atas untuk masing%masing reagen !an me!ia perlu

    memperhatikan hal%hal sebagai berikut-

    1. Reagen

    a. ?ntuk analisis !i laboratorium harus !ipilih reagen tingkat analitis.

    +eberapa $at organik !engan tingkat chemically pureharus !iu(i untuk

    setiap lot sebelum !ipakai !alam penggunaan rutin se!angkan $at

    kimia practical grade commercial grade atau technical grade ti!ak

    boleh !igunakan !i laboratorium.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    10/39

    b. Reagen yang su!ah (a!i &komersial' !irekomen!asikan sebagai pilihan

    utama. Reagen buatan sen!iri !ipilih bila ti!ak terse!ia reagen (a!i

    komersial.

    Keuntungan reagen buatan sen!iri-

    1' !apat !ibuat segar sehingga penun!aan !an kerusakan baik !alam

    transportasi maupun !alam penyimpanan !apat !ihin!ari

    2' penggunaan $at penga)et !apat !ihin!ari

    3' bila timbul masalah mengenai reagen !an stan!ar pemecahannya

    lebih mu!ah sebab proses pembuatannya !iketahui

    4' bila reagen terkontaminasi atau rusak ti!ak perlu menunggu

    pengiriman reagen berikutnya !an

    :' merupakan penghematan.

    Kerugian reagen buatan sen!iri-

    1' sulit !istan!ar!isasi

    2' biasanya ti!ak melalui u(i *uality Control&@9' !an

    3' ti!ak !apat !itentukan stabilitasnya.

    2. Me!ia

    ?ntuk pemilihan me!ia yang akan !ipergunakan harus

    mempertimbangkan tu(uan pemeriksaan stabilitas transportasi !an nilai

    ekonomis.

    C. Penga#aan

    Penga!aan reagen !an me!ia harus mempertimbangkan hal%hal sebagai

    berikut-

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    11/39

    1. /ingkat perse!iaan

    Pa!a umumnya tingkat perse!iaan harus selalu sama !engan (umlah

    perse!iaan yaitu (umlah perse!iaan minimum !itambah (umlah safety

    stoc+. /ingkat perse!iaan minimum a!alah (umlah bahan yang !iperlukan

    untuk memenuhi kegiatan operasional normal sampai penga!aan

    berikutnya !ari pembekal atau ruang penyimpanan umum. "afety stoc+

    a!alah (umlah perse!iaan ca!angan yang harus a!a untuk bahan%bahan

    yang !ibutuhkan atau yang sering terlambat !iterima !ari pemasok.Buffer

    stoc+a!alah stok penyangga kekurangan reagen !i laboratorium.Resere

    stoc+a!alah ca!angan reagen sisa.

    2. Perkiraan (umlah kebutuhan

    Perkiraan kebutuhan !apat !iperoleh ber!asarkan (umlah pemakaian atau

    pembelian bahan !alam perio!e ;%12 bulan yang lalu !an proyeksi (umlah

    pemeriksaan untuk perio!e ;%12 bulan untuk tahun yang akan !atang.

    7umlah rata%rata pemakaian bahan untuk satu bulan perlu !icatat.

    3. Aaktu yang !ibutuhkan untuk men!apatkan bahan &deliery time'

    amanya )aktu yang !ibutuhkan mulai !ari pemesanan sampai bahan

    !iterima !ari pemasok perlu !iperhitungkan terutama untuk bahan yang

    sulit !i!apat.

    D. Pen$"m%anan

    Regaen !an me!ia yang su!ah a!a harus !itangani secara cermat !engan

    mempertimbangkan-

    1. Perputaran pemakaian !engan menggunakan kai!ah-

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    12/39

    a. Pertama masuk%pertama keluar &8I8B % first infirst out' yaitu bah)a

    barang yang lebih !ahulu masuk perse!iaan harus !igunakan lebih

    !ahulu.

    b. Masa ka!aluarsa pen!ek !ipakai !ahulu &8"8B % first expired first

    out'.

    al ini a!alah untuk men(amin barang ti!ak rusak akibat penyimpanan

    yang terlalu lama.

    2. /empat penyimpanan.

    3. #uhu kelembaban.

    4. #irkulasi u!ara.

    :. %ncompatibility bahan kimia yang ti!ak boleh bercampur.

    al%hal khusus yang harus !iperhatikan-

    1. Reagen

    Reagen !apat berupa $at pa!at atau &bubuk kristal $at cair'. /empat

    penyimpanan reagen pun harus selalu !itutup !engan baik &hermetis'

    supaya $at kimia ti!ak terkena kelembaban u!ara !an (amur ti!ak !apat

    tumbuh. Mutu bahan kimia harus !ipilih !engan cara memban!ingkan

    pentingnya ketelitian !alam menganalisa untuk men!apat hasil reagen

    yang baik.

    Mengenal bahaya merupakan langkah pertama !alam rangka

    mengen!alikan bahaya !i laboratorium. !a beberapa sumber bahaya yang

    ter!apat !i !alam laboratorium baik bahaya yang bersi,at ,isik kimia

    maupun biologis.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    13/39

    #umber bahaya !i laboratorium berhubungan !engan

    penyimpanan penanganan !an pemakaian bahan kimia berbahaya &+3'.

    +ahayanya meliputi terciprat tumpah tertelan terhirup terhisap kontak

    !engan kulit kontak !engan mata !an lain%lain.

    a. Penyimpanan reagen buatan sen!iri

    1' arus !iketahui si,at%si,at bahan kimia yang !ibuat. Reagen

    tertentu ti!ak boleh !isimpan ber!ekatan atau !icampur karena

    !apat bereaksi.

    2' arutan ber)arna !isimpan !alam botol kaca ber)arna coklat.

    3' arutan yang ti!ak mengalami reaksi ,otokimia !i simpan !alam

    botol plastik putih.

    4' 9airan !an larutan organik !isimpan !alam botol kaca ber)arna

    coklat.

    :' isimpan pa!a suhu ruangan atau suhu !ingin &2%=C9' atau harus

    beku !isesuaikan !engan ketentuannya.

    ;' arus !ilakukan u(i stabilitas !an u(i homogenitas.

    5' iberi label nama reagen tanggal pembuatan nomor register !an

    expired date.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    14/39

    b. Penyimpanan reagen (a!i &komersial'

    1' /utuplah botol saat penyimpanan.

    2' /i!ak boleh terkena sinar matahari langsung.

    3' +eberapa reagen a!a yang harus !isimpan !alam botol ber)arna

    gelap.

    4' +eberapa reagen ti!ak boleh !iletakkan pa!a tempat yang

    ber!ekatan satu !engan lainnya.

    :' +ahan%bahan yang berbahaya !iletakkan !i bagian ba)ah lantai

    !engan label tan!a bahaya.

    ;' +uat kartu stok yang memuat tanggal penerimaan tanggal

    ka!aluarsa tanggal )a!ah reagen !ibuka (umlah reagen yang

    !iambil !an (umlah reagen sisa serta para, tenaga pemeriksa yang

    menggunakan.

    2. Me!ia

    Me!ia mikrobiologi a!alah salah satu bahan consumable yang

    banyak !igunakan !i laboratorium khususnya laboratorium mikrobiologi.

    Me!ia mikrobiologi (uga perlu !isimpan !alam kon!isi yang benar

    penyimpanan me!ia mikrobiologi yang ti!ak benar akan mempercepat

    proses penurunan kualitas me!ia mikrobiologi tersebut. okumentasi pa!a

    penerimaan barang yang baik (uga akan meminimalisasi ter(a!inya

    keti!akterse!iaan stok pro!uk pa!a gu!ang sehingga menghambat analisa.

    angkah%langkah yang !apat !ilakukan ketika menerima me!ia

    mikrobiologi !i laboratorium antara lain-

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    15/39

    a. Pastikan nama nomor katalog !anpac+ingyang !atang sesuai !engan

    yang kita pesan. Pa!a beberapa *en!or ter!apat pro!uk%pro!uk yang

    mempunyai nama yang hampir sama misalnya pro!uk yang sama

    !engan bentuk cair atau pa!atan. ?kuran pac+ing (uga perlu

    !iperhatikan karena perbe!aan ukuran pac+ing biasanya !ibe!akan

    !engan ko!e penomeran setelah nomor katalog.

    b. +atas ka!aluarsa pired Date'

    Perlu !iperhatikan )aktu batas ka!aluarsa !ari me!ia mikrobiologi

    yang !iterima. Aaktu batas ka!aluarsa yang umum tergantung (enis

    me!ianya a!alah 3%: tahun. +eberapa me!ia khusus mempunyai batas

    ka!aluarsa yang lebih singkat. iskusikan ke *en!or (ika me!ia

    mikrobiologi yang an!a terima hanya mempunyai kurang !ari :0

    persen !ari masa ka!aluarsa seharusnya. Me!ia yang su!ah (a!i

    &prepare medium microbiology' supplementme!ia mikrobiologi !an

    beberapa me!ia cair mempunyai batas ka!aluarsa yang lebih singkat

    misalnya egg yol+yang hanya mempunyai batas ka!aluarsa satu tahun.

    c. Certificate of Analysis &9o'

    #etiap menerima me!ia mikrobiologi usahakan untuk minta !isertakan

    Certicate of Analysisuntuk setiap pro!uk. al ini untuk men(amin

    keaslian !ari pro!uk tersebut. Certificate of Analysis (uga membantu

    kita memberikan in,ormasi penting seperti tanggal pembuatan tanggal

    ka!aluarsa analisa quality controlyang telah !ilakukan untuk me!ia

    tersebut !an )arna yang !ihasilkan (ika !itanam !engan bakteri

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    16/39

    tertentu. #elain 9o !okumen yang yang bisa !iminta &biasanya ti!ak

    !isertakan' a!alah +#" /#" Certificate&asal negara !ari bahan baku'

    ,aterial "afety Data "heet&M##' !an technical data sheet.

    !. okumentasi.

    okumentasi sangat penting untuk mencatat me!ia mikrobiologi yang

    !iterima ke!alam buku stok. 7ika an!a menerima me!ia mikrobiologi

    lebih !ari satu tulis tanggal penerimaan pa!a botol !an botol keberapa

    misalnya (ika kita menerima 4 botol /# maka !itulis 1:012011 1 of

    4 1:012011 2 of4 !an seterusnya. ?ntuk kemu!ahan a!ministrasi

    -irst %n -irst .ut&8I8B' gunakan selalu botol pertama sehingga (ika

    botol terakhir su!ah !igunaka misalnya 4 of4 kita !iingatkan untuk

    melakukan pemesanan kembali.

    e. Perhatikan label untuk perbe!aan penanganan !an penyimpanan

    /i!ak semua me!ia mikrobiologi aman bagi kita. Perhatikan label

    tan!a bahaya untuk memisahkan penanganan !an penyimpanan.

    Perlakukan me!ia mikrobiologi !engan tan!a tengkorak !engan

    menggunakan alat pelin!ung !iri yang sesuai. #impan me!ia

    mikrobiologi sesuai !engan label untuk meminimalisasi percepatan

    kerusakan.

    ,. Pengiriman !engan kon!isi special

    Me!ia mikrobiologi seperti egg yol+ !an egg yol+ tellurite emulsion

    harus !isimpan 2%=o9 selama pengiriman. 7ika memesan me!ia

    mikrobiologi !engan kon!isi khusus seperti itu pastikan menerima

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    17/39

    !engan menggunakan dry iceatau alat lain yang men(amin pengaturan

    suhu selama !alam pengiriman.

    al%hal khusus yang perlu !iperhatikan pa!a me!ia yaitu-

    a. PenyimpananDehidratedme!ia

    1' Me!ia yang !i!ehi!ratasi ti!ak !apat !isimpan untuk )aktu yang

    tak terbatas terutama bila penutup )a!ah telah !ibuka.

    2' 7umlah keseluruhan harus !ikemas !alam )a!ah yang akan habis

    !igunakan !alam 1%2 bulan.

    3' #aat !iterima semua )a!ah tertutup rapat. Me!ia yang

    !ikeringkan menyerap air !ari u!ara. Pa!a iklim yang lembab

    segel tutup )a!ah me!ia yang !ikeringkan !engan lilin para,,in &isi

    rongga antara tutup !an )a!ah !engan lilin cair !an biarkan

    mengeras'.

    4' /anggal penerimaan harus !icatat pa!a setiap )a!ah.

    :' #emua me!ia !ehi!ratasi harus !isimpan !i tempat gelap se(uk

    &suhu D 2:C9' !an ber*entilasi baik. Rak%rak penyimpanan ti!ak

    boleh !itempatkan !i !ekat autokla, atau tempat pencucian karena

    kelembaban !an suhu yang tinggi.

    ;' Menggunakan kai!ah 8I8B.

    5' /anggal membuka )a!ah harus !icatat pa!a )a!ah tersebut.

    =' +uang semua me!ia kering yang su!ah menggumpal atau berubah

    )arna men(a!i gelap.

    >' +uatlah catatan tertulis tentang me!ia yang terse!ia.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    18/39

    b. Penyimpanan me!ia yang telah !ilarutkan

    1' in!ari terkena cahaya matahari langsung atau panas.

    2' Me!ia yang !iperkaya !engan !arah bahan organik atau antibiotik

    harus !isimpan !i !alam lemari es.

    3' arus !i(aga agar me!ia ti!ak mengalami kekeringan. ?ntuk

    me!ia !alam ca)an petri sebaiknya !ibungkus !engan kertas

    coklat yang !iberi keterangan berupa nama me!ia !an tanggal

    pembuatan serta !isimpan !i !alam lemari es &E4C9' !engan posisi

    ca)an petri terbalik.

    4' Me!ia yang menggunakan tabung%tabung reaksi bertutupkan

    kapas sebaiknya !itutup lagi !engan aluminium ,oil atau plastic

    !rap atau para,ilm. gar menghin!ari e*aporasi atau penguapan

    !ari me!ia selama penyimpanan serta !apat menghin!arkan me!ia

    !ari kontaminasi.

    :' arus !iperhatikan batas lama penyimpanannya yaitu-

    a' /abung !engan sumbat kapas - 1 minggu.

    b' /abung !engan sumbat longgar - 1 minggu.

    c' 9a)an petri &!alam bungkus plastik' - 3 minggu.

    !' +otol !engan tutup ulir &scre!cap' - 3 bulan.

    3. kua!es

    kua!estilata aFua!est kemungkinan merupakan bahan termurah !ari

    semua bahanyang !igunakan !i laboratorium tetapi tetap merupakan

    bahan penun(ang utama!alam pembuatan me!ia. kua!es yang

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    19/39

    merupakan bahan terpenting !an yang paling sering !igunakan karenanya

    kualitas air yang !igunakan harus memenuhi stan!arseperti halnya bahan

    lain yang !igunakan !alam analisis.aboratorium harus menetapkan

    tingkat kualitas air yang !iperlukan sesuai !engan (enis pemeriksaan yang

    !ilakukan.

    #yarat -

    1. p sekitar 5 &bisa turun karena terpapar !engan u!ara'

    2. +ebas materi

    3. Kekeruhan

    4. &aya antar istrik'

    E. Uj" &ual"tas

    '. Uj" &ual"tas Reagen

    a. Reagen buatan sen!iri

    al%hal yang perlu !iperhatikan-

    1' +ahan kimia anhi!rat &ti!ak mengan!ung molekul air' yang

    !igunakan untuk pembuatan larutan stan!ar kalibrasi !an titrasi

    harus !ikeringkan terlebih !ahulu !alam o*en !engan suhu 10:C9G

    110C9 minimal 1%2 (am sebaiknya satu malam. Kemu!ian

    !inginkan sampai suhu kamar !alam !esikator !an timbang !alam

    (umlah yang tepat lalu !ilarutkan.

    2' +ahan kimia garam hi!rat &mengan!ung molekul air' cukup

    !ikeringkan !alam !esikator.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    20/39

    3' Pa!a )aktu pengenceran harus !iperhatikan kualitas akua!es yang

    !ipakai. ir yang mengan!ung kaporit akan mempengaruhi reagen

    untuk pemeriksaan kalsium !an klori!a se!angkan air yang

    mengan!ung banyak logam akan mempengaruhi pemeriksaan

    logam !an )arna.

    4' arutan ker(a si,atnya ti!ak tahan lama sehingga harus !ibuat

    secukupnya sesuai kebutuhan. ?ntuk penyimpanan sebaiknya

    !alam bentuk larutan stok &larutan in!uk'.

    :' Aa!ah reagen perlu !iberi label yang berisi nama reagen &rumus

    kimia' tanggal pembuatan !an para, pembuat.

    ;' arus !iketahui si,at bahan kimia yang !ibuat. Reagen tertentu

    ti!ak boleh !isimpan ber!ekatan atau !icampur karena !apat

    bereaksi.

    5' Penyimpanan untuk reagen tertentu mempunyai persyaratan

    khusus misalnya ti!ak boleh terkena paparan cahaya harus pa!a

    suhu ruangan suhu !ingin atau beku !an sebagainya.

    b. Reagen yang su!ah (a!i komersial

    al%hal yang perlu !iperhatikan a!alah-

    1' "tiket label )a!ah

    ?mumnya pa!a reagen komersial su!ah tercantum nama atau ko!e

    bahan tanggal pro!uksi !an batas ka!alu)arsa serta nomor batch

    reagen tersebut.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    21/39

    2' +atas ka!alu)arsa

    Perhatikan batas ka!aluarsanya. Masa ka!alu)arsa yang tercantum

    pa!a kemasan hanya berlaku untuk reagen yang !isimpan pa!a

    kon!isi baik !an belum pernah !ibuka karena reagen yang

    )a!ahnya su!ah pernah !ibuka mempunyai masa ka!alu)arsa

    lebih pen!ek !ari reagen yang belum !ibuka.

    3' Kea!aan ,isik

    Kemasan harus !alam kea!aan utuh isi ti!ak mengeras !an ti!ak

    a!a perubahan )arna. Pengu(ian kualitas !apat !ilakukan !engan-

    a' Melakukan pemeriksaan bahan kontrol assayed yang telah

    !iketahui nilainya !engan menggunakan reagen tersebut.

    b' Menggunakan strain kuman untuk u(i kualitas reagen

    mikrobiologi.

    ?(i berbagai (enis larutan pe)arna !an reagen mikrobiologi !apat !ilihat pa!a

    tabel 1.

    Ta(el '. Uj" kual"tas reagen m"kr)(")l)g"

    LARUTAN

    PE*ARNA

    REA+EN TES

    SPESIMEN

    MEDIA ,AN+

    DI+UNA&AN

    -R+ANISME

    &-NTR-L

    HASIL ,AN+

    DIHARAP&AN

    Pe)arna Hram #e!iaan apus#treptococcus !an

    #) coli

    9occus Hram positi,

    !an +asil Hram negati,

    Pe)arna iehl

    Neelsen

    #e!iaan apus

    !ahak

    ,) tuberculosis!an

    campuran ,lora

    ti!ak tahan asam

    /ampak a!anya +/

    berbentuk batang

    merah !an ti!ak

    !itemukan +/

    Pe)arna

    cri!ine orange

    #) coli

    ") aureus

    +asil cocci

    +er,luoresensi

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    22/39

    Pe)arna Hiemsaapusan !arah

    tepi

    Parasit malaria itemukan parasit

    malaria

    arutan Io!ium/in(a yang!ia)etkan

    !engan ,ormalin

    Kista#ntamoebasp) atau /iardia l)

    /erlihat inti !ari kista

    #pora

    Bacilllus sp) #pora ter)arnai satu

    )arna bacillus

    ter)arnai )arna lain

    counter stain

    +asitracin discBlood Agar

    Plate

    ") pyogenes

    ") faecalis

    !a $one pembatas

    /i!ak a!a $one

    pembatas

    Catalase Tryptic soy agar

    #. aureus

    #. ,aecalis

    /erlihat a!anya

    bubbles&gelembung'

    /i!ak ter!apat bubbles

    BNPH/#I atau0liger

    agar

    "erratia

    marcescens1 #) coli

    ") typhymurium

    Proteus sp.

    +er)arna kuning

    /i!ak ber)arna

    Bptochin discBlood Agar

    Plate

    ") pneumoniae

    ") mitis

    /i!ak a!a pertumbuhan

    !i sekitar disc

    !a pertumbuhan !i

    sekitar disc

    .xidase Tryptic soy agar

    P) aeruginosa

    #) coli

    Aarna koloni men(a!imerah hitam ungu

    !alam 20 !etik

    Koloni ti!ak berubah

    )arna

    Coagulase

    ") aureus

    ") epidermidis

    /erbentuk gumpalan

    !alam 4 (am

    /i!ak terbentuk

    gumpalan

    %ndole

    #) coli

    #) aerogenes

    9incin merah pa!a

    permukaan

    9incin kuning pa!a

    permukaan

    ,ethyl Red#) coli

    #) aerogenes

    Aarna merah

    /i!ak ber)arna

    oges Proskauer#) coli

    #) aerogenes

    /i!ak ber)arna

    Aarna merah

    .xidase disc

    P) aeruginosa

    #) coli

    Aarna ungu !alam 30

    !etik

    /i!ak ber)arna !alam

    30 !etik

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    23/39

    . Uj" kual"tas me#"a

    gar me!ia mempunyai kualitas seperti yang !iharapkan perlu

    !ilakukan u(i kualitas seperti u(i sterilitas !an u(i spesi,itas. ?(i sterilitas

    !ilakukan untuk mengetahui apakah bahan atau se!iaan steril su!ah

    memenuhi syarat atau ti!ak. ?(i sterilitas !apat !ilakukan !engan

    mengeramkan &inkubasi' me!ia selama 2%3 hari !i!alam inkubator. Pa!a

    me!ia i!ealnya ti!ak boleh !itemukan pertumbuhan bakteri. kan tetapi

    koloni yang tumbuh D 2 !apat !iterima. #e!angkan u(i spesi,itas !ilakukan

    !engan menggunakan bakteri kontrol yang sesuai !engan (enis !an ,ungsi

    me!ia yang !ibuat. al ini berman,aat untuk membantu mengetahui

    kelompok !an (enis serta ,ungsi me!ia yang !ibutuhkan. ?(i kualitas

    me!ia mencakup aspek yang luas baik me!ia buatan sen!iri maupun

    me!ia (a!i oleh karena itu penyiapan me!ia harus men!apat perhatian.

    #elama proses pembuatan me!ia sebaiknya !ia)asi oleh seorang

    penga)as agar !apat ter(amin kualitasnya. Kualitas me!ia harus !iperiksa

    !ahulu sebelum me!ia !igunakan. !a bermacam%macam cara untuk

    mengu(i mutu me!ia yang telah !ibuat yaitu-

    a. #ecara *isual

    yaitu !engan memperhatikan atau melihat )arna kekeruhan !an lain%

    lain. 9ontoh-

    1' Me!ia gula%gula yang !ilengkapi tabung !urham bila terlihat

    gelembung u!ara berarti su!ah ti!ak !apat !ipergunakan lagi.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    24/39

    2' +ila )arna me!ia ti!ak sesuai !engan )arna stan!ar maka harus

    !icurigai a!anya perbe!aan p untuk itu periksalah !engan p

    meter. +ila p me!ia berbe!a E02 satuan tambahkan asam atau

    basa atau !ibuat baru.

    b. ?(i #terilitas

    ?(i sterilitas merupakan suatu keharusan terutama pa!a me!ia yang

    !iperkaya !engan bahan%bahan tertentu seperti agar !arah atau agar

    coklat. 9aranya-

    1' mbil se(umlah :6 !ari tiap batchme!ia yang !ibuat.

    2' Inkubasi selama 1%2 hari pa!a suhu 3:C9.

    3' +ila ter!apat pertumbuhan lebih !ari 2 koloni mikroorganisme per

    ca)an petri atau lebih berarti seluruh me!ia !ari batch tersebut

    ti!ak !apat !ipakai.

    c. ?(i spesi,itas !engan penanaman mikroorganisme kontrol positi, !an

    kontrol negati,

    Mikroorganisme kontrol kualitas &strain kuman' a!alah

    mikroorganisme spesi,ik yang seharusnya tumbuh pa!a me!ia tertentu.

    Mikroorganisme tersebut memiliki ciri mor,ologi biokimia !an

    serologi yang !apat !iu(i !an mampu menun(ukkan stabilitas

    repro!uksi yang tetap bilamana !itempatkan pa!a kon!isi yang sesuai.

    ?(i me!ia !engan menggunakan kuman kontrol positi, !an kontrol

    negati, ini !apat !ilihat pa!a /abel 2.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    25/39

    Ta(el . Uj" me#"a #engan menggunakan kuman

    MEDIA IN&UBASI-R+ANISME

    &-NTR-L

    HASIL ,AN+

    DIHARAP&AN+ile aseculin

    agar

    24 (am #) faecalis

    ") pyogenes

    /umbuh J men(a!i hitam

    /i!ak tumbuh

    +loo! agar 24 (am 9B2

    candle 2ar

    ") pyogenes

    ") pneumoniae

    /umbuh !an hemolisis

    /umbuh !an L hemolisis

    9hocolate agar 24 (am 9B2 $aemophilus

    influenzae

    /umbuh

    ecarboi!ase

    % lysine

    % ornithine

    % arginine

    &dihydrolase'

    4= (am

    4= (am

    4= (am

    ") typhymurium

    "higellaflexneri

    ") typhymurium0) pneumoniae

    ") typhymurium

    0) pneumoniae

    Positi,

    Negati,

    Positi,Negati,

    Positi,

    Negati,

    Helatine &rapi!

    test'

    Kliglers iron

    agar !an /riple

    sugar iron agar

    24 (am

    24 (am

    #)coli

    "erratia marcescens

    Citrobacterfreundi

    ") typhimurium

    ") flexneri

    Acinetobacter

    Negati,

    Positi,

    gas O 2#'

    K gas O 2# '

    K

    /i!ak a!a perubahan

    Mac 9onkey

    agar

    24 (am

    aerob

    #)coli

    P) mirabilis

    Koloni merah

    Koloni tak ber)arnaMalonate broth 24 (am #) coli

    0) pneumoniae

    Negati, &hi(au'

    Positi, &biru'

    Manitol salt

    agar

    24 (am

    aerob

    ") aureus

    T) epidermidis

    #) coli

    Koloni kuning

    Koloni merah mu!a /i!ak

    tumbuh

    Methyl re!

    oges

    Peoskauer

    4= (am #) coli

    0) pneumoniae

    Positi,negati,

    Positi,negati,

    Mueller%

    inton agar

    24 (am #) coli ATCC 34533

    ")aureus ATCC

    34536P) aeruginosa ATCC

    37846

    iameter $one yang !apat

    !iterima &lihat tabel 1:'

    Nitrate broth 24 (am #) coli

    Acinetobacter

    Positi,

    Negati,

    B8 !etrose

    &)ithout oil'

    24 (am P) aeruginosa

    Acinetobacter

    calcoaceticus bioar

    %!offi

    Bksi!asi pa!a permukaan

    /i!aka!a perubahan

    Pepton )ater

    &in!ole'

    24 (am #) coli

    P) mirabilis

    Positi,

    Negati,

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    26/39

    Phenylalanine

    !eaminase

    24 (am #) coli

    P) mirabilis

    Negati,

    Positi,

    Rappaportbroth

    #elenite broth

    J kultur

    /etrathionate

    broth

    24 (am ") typhimurium#) coli

    /umbuh setelah sub kultur/umbuh tanpa sub

    #almonella

    #higella #'

    agar

    24 (am

    aerob

    24 (am suhu

    kamar

    #) coli

    ") typhimurium

    9ersinia

    enterocolitica

    "higella flexineri

    /umbuh koloni

    /i!ak tumbuh

    /i!ak ber)arna

    /i!ak ber)arna

    #immons

    citrate

    4= (am #) coli

    0) pneumoniae

    /i!ak tumbuh

    /umbuh )arna biru

    /9+# 24 (am (ibrio :non

    agglutinable;

    #) coli

    Koloni kuning

    /i!ak tumbuh

    /hayer% Martin

    agar

    24 (am

    9B2

    ) meningitidis

    ,) gonorrhoeae

    "taphylococcus

    #) coli Candida

    albicans

    /umbuh

    /umbuh

    /umbuh

    /i!ak tumbuh

    /umbuh

    /hioglycollatebroth 24 (am Bacteroidesfragilis /umbuh

    ?rea me!ium 24 (am #coli

    P) mirabilis

    Negati,

    Positi, &merah mu!a'

    !. ?(i kualitas pemeriksaan kepekaan bakteri

    e. ?(i kiner(a pa!a me!ia !engan batchbaru a!alah-

    1' #iapkan suspensi galur stok !engan kekeruhan yang hampir ti!ak

    terlihat setara !engan kekeruhan baku barium sul,at yang

    !igunakan pa!a meto!e Kirby%+auer yang telah !imo!i,ikasi

    &Mc8arlan! 0:' &lihat hal. 102' !an gunakan 1 sengkelit sebagai

    inokulum.

    2' Inkubasi selama )aktu yang rutin !igunakan. +aca plat seperti

    biasa.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    27/39

    3' +uatlah pencatatan hasil !engan baik.

    A. STANDAR -PERASI-NAL PR-SEDUR PEMBUATAN MEDIAMI&R-BI-L-+I

    '. Me#"a Nutr"ent Agar /NA0

    Merupakan media pembiakan sederhana yang

    mengandung zat-zat yang umum di perlukan oleh

    sebagian besar mikroorganisme dan dipakai juga

    sebagai komponen dasar untuk membuat media

    biakan lainnya.a. Komposisi -

    "kstark sapi Q 3 gram

    Pepton Q : gram

    gar Q 1: gram

    P Q ;=

    Fua!est Q 1000 m

    b. lat -

    Kertas timbang

    9a)an petri

    Neraca analitik

    "rlen Meyer

    #en!ok

    Helas ukur

    c. Kontrol K)alitas -

    % Kontrol Positi, - #tephylococus "cherichia coli

    % Kontrol Negati, - Me!ia yang ti!ak !itanami

    !. Prose!ur Ker(a -

    1. i timbang 20 gram Nutrient gar kemu!ian me!ia !i larutkan

    !engan aFua!est sebanyak :00m !alam "rlenmeyer &"rlenmeyer !i

    beri label'.

    2. "rlenmeyer!i beri me!ia !i tutup rapat kemu!ian panaskan kurang

    lebih 10 menit pa!a suhu :0 !era(at celcius.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    28/39

    3. M!ia !i !inginkan kemu!ian me!ia tersebut !i bagi 2. Mulut

    erlenmeyer !i sumbat !engan kapas !i tutup !engan kertas !an ikat

    !engan tali.

    4. Me!ia !i sterilkan !alam utocla*e selama 1: menit !engan suhu 121

    !era(at celcius.

    :. "rlenmeyer pertama !i perkirakan suhunya =0 !era(at celcius !i

    tambahkan !arah *ena sebanyak 3 cc !engan cara !i semprotkan

    melalui !in!ing "rlenmeyer.

    ;. Me!ia !i kocok &(angan sampai terbentuk busa' !an !i tuang ke !alam

    ca)an petri sebanyak !etengah !ari *olume ca)an petri.

    . Bl))# Agar Plate /BAP0

    Media ini di gunakan untuk menumbuhkan mikro

    organisme yang sulit untuk dibiakan dan juga untuk di

    membedakan kelompok mikro organisme yang melisis

    atau tidak melisiskan butir darah merah.

    Agar darah terdiri dari bahan dasar yang mengandung

    5% darah domba. Lisis butir darah merah terlihat

    sebagai wiayah jernih di sekitar koloni. Bila proses lisis

    sempurna akan terlihat di wilayah yang benar-benar

    jernih dan jenis hemalisisnya di sebut beta hemolisis.

    Bila proses lisis tidak sempurna dan media berwarna

    kehijauan maka jenis hemolisisnya di sebut Alpha

    emolisis. Bakteri yang tidak mampu melisiskan butir

    darah dan tidak menyebabkan perubahan nyata pada

    media tersebut di sebut gamma hemolisi. !elompok

    mikro organisme yang sering di bedakan berdasarkan

    kemampuan melisiskan butir darah merah adalah

    srepto"o""us dan staphylo"o""us# proses hemolisis di

    sebabkanoleh enzim yang di lepas mikro organisme.

    a. !omposisi $

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    29/39

    eart etra"t & '( gram

    )ryphtose & '( gram *a"l & 5 gram

    Agar-agar & '5 gram

    + & ,#

    Auadest

    b. Alat $

    !ertas timbang /awan petri

    *era"a analitik

    0rlenmeyer

    1endok

    2elas ukur

    Auto"la3e

    2elas ukur

    +etridi"h

    Alat +emanas

    1endok 4eagen

    ". +rosedur !erja

    1. Larutkan ( gram bahan tersebut dengan ' liter

    auadest

    2.

    1terilkan dengan menggunakan auto"la3e ''5derajat "el"ius selama 65 menit.

    3. 1etelah di sterilkan# dinginkan pada suhu

    5(derajat "el"ius kemudian tambahkan -7%

    darah domba# aduk rata.

    4. )uang dalam petridi"h steril kurang lebih 65""

    se"ara aseptis. indari gelembung udara dan

    simpan dalam lemari es.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    30/39

    d. !ontrol !walitas 8

    !ontrol +ositi9 $ 1trepto"o""us pyogenes,1terpto"o""us

    +neumoniae

    !ontrol *egati9 $ Media yang tidak ditanami

    1. TCBS

    a. !omposisi $

    :east etra"t & 5 gram

    Ba"teriologi"al +eptone & '( gram

    1odium thiosulphate & '( gram

    1odium /itrate & '( gram

    ; bile & 7 gram

    1u"rose & 6( gram

    1odium /hloride & '( gram

    Broom )hymol Blue & (#( gram

    )hymol Blue & (#( gram

    Agar & ' gram

    Auadest & '((( mL

    + & 7#,

    b. Alat $

    )imbangan analitik

    2elas ukur

    0rlen Meyer

    1endok reagen

    Alat +emanas

    ". +rosedur !erja

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    31/39

    . ?ibrio Met"hni"o3in kuning@>#5mm

    . ?ibrio luCalis kuning @>#mm

    5. ?ibrio ?ulni3i"us biru# kehijauan @6#>mm

    ,. ?ibrio mimi"us biru# kehijauan @'mm

    !ontrol !walitas $ !ontrol +ositi9 $ ?ibrio /olera

    !ontrol *egati9 $ 0s"heristia "oli di hambat

    pertumbuhannya

    2. Mac C)nke$ Agar /MCA0

    +embenihan ini bersi9at selekti9 untuk hasil gram

    negati3e baik 0nteroba"teriateae maupun yang non

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    32/39

    9ermented basilgram negati3e# sedangakn bakteri

    lainnya umumnya tidak tumbuh D tumbuh dengantidak subur.

    +ersenyawaan utama dalam media ini adalah

    laktosa# garam empedu dan nerah netral. Media ini

    menghambat pertumbuhan bakteri garam poditi9 yang

    di sebabkan oleh garam empedu dan kristal 3iolet#

    bakteri gram negati9 yang tumbuh di bedakan dalam

    kemampuannya mem9ermentasekan aktosa.!oloni dari bakteri yang mem9ermentasekan

    laktosa berwarna merah bata dan di kelilingi oleh

    endapan garam empedu. 0ndapan ini di sebabkan oleh

    enguraian laktosa menjadi asam yamg bereaksi

    dengan garam empedu.

    Bakteri yang tidak mem9ermentasekan laktosa

    biasanya bersi9at pathogen. 2olongan bakteri initidakmemperlihatkan perubahan pada media. Earna

    koloni di lihat pada bagian koloni terpisah.

    a. Komposisi -

    +eptone :east etra"t & 'F gram

    Agar & '>#5 gram

    +rotease +epton & > gram

    *etral 4ed & (#(> gram

    La"tosa & '( gram

    /rystal ?iolet & (#(('gram

    Bile salt no > & '#5 gram

    Auadest & '((( ml

    1odium /loride & 5 gram

    + &F#

    b. Alat $

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    33/39

    0rlen Meyer

    1endok tanduk 2elas ukur

    )abung 4eaksi

    )abung

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    34/39

    3. Salm)nella S"gella Agar /SSA0+erbenihan ini mirip M/A# hanya penggunaanya lebih

    khusus lagi untuk basil gram negati3e pathogen

    enteri"# sehingga di pakai untuk isolasi dari spe"imen

    yinja terutama salmonella shigella yang keduanya

    memperlihatkan pertumbuhan koloni yang tidak

    berwarna. 1ebagai bahan penghambat utama adalah

    garam empedu dan brilliant green yang tidak hanya

    mengam#bat bakteri asam positi9 saja tetapi menekan

    pertumbuhan basil pathogen non enteri" lainnya.

    a. !omposisi$

    0kstark sapi & 5 gram

    +roteose peptone & 5 gram

    Laktosa & '( gram

    2aram bile no.> & 7#5 gram

    *atrium sitart & 7#5 gram

    errik sitrat & ' gram

    Agar & '>#5 gram

    Merah netral & (#(65 gram

    ijau brilliant & (#>> gram

    Auadest & '((( mLdan pH

    b. Alat $

    )abung reaksi

    +etridisk

    1endok tanduk

    Auto"la3e

    0rlenmeyer

    2elas ukur

    )imbangan analitik

    ". +rosedur !erja

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    35/39

    )imbang bahan tersebut# kemudian masukkan

    dalam beaker glass 5( ml dan larutkan denganauadest# lalu masukkan ke dalam 0rlenmeyer

    omogenkan dengan "ara di panaskan diatas

    pemabas selama '5 menit

    1terilkan media tersebut di dalam auto"la3e pada

    suhu '6' derajat "el"ius selama '5 menit

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    36/39

    indi"ator untuk melihat adanya pembentukan asam.

    +ada umumnya 1. Aureus bersi9atpathogen#sedangkan 1. 0pidermis bersi9at tidak

    pathogen.

    a. !omposisi$

    0kstark sapi & ' gram -

    +roteose peptone no.> & '( gram

    *a/L & F5 gram

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    37/39

    Me#"a Uj" B")k"m"a

    A. Me#"a Sul5"#e In#)le M)t"l"t$ /SIM0

    1. Komposisi Me!ia -

    Peptone ,rom casein &20'

    Peptone ,rom meat &;;'

    monium ion &III' citrate &02'

    #o!ium thio sul,ate&02' gar%agar &30'

    2. 9ara Pembuatan -

    Melarutkan 30 gr #ul,i!e In!ole Motility IM' !alam 1

    aFua!est

    men!i!ihkan menggunakan hot plate !an menghomogenkan

    menggunakan magnetic stirrer.

    Kemu!ian mensterilisasi menggunakan autocla*e pa!a suhu

    121 9 selama 1: menit.

    B. Me#"a 6ermentas" &ar()h"#rat

    1. Komposisi Me!ia -

    Karbohi!rat&:'

    Nutrient broth &13'

    20 tetes in!icator phenol re! 1.;6.

    2. 9ara Pembuatan -

    Melarutkan sebanyak : gr karbohi!rat !an 13 gr Nutrient broth

    !alam 1 aFua!est

    Men!i!ihkan menggunakan hot plate !an menghomogenkan

    menggunakan magnetic stirrer.

    Menambahkan 20 tetes in!ikator phenol re! saat hampir

    men!i!ih.Kemu!ian mensterilisasi menggunakan autocla*e

    pa!a suhu 121 9 selama 1: menit.

    C. Me#"a Penguj"an S"trat Se(aga" Sum(er &ar()n /S"m)n C"trat

    Agar0

    1. Komposisi me!ia &g' -

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    38/39

    mmonium !ihy!rogen phosphate &1'

    !i%Potassium hy!rogen phosphate &1'

    #o!ium chlori!e &:'

    #o!ium citrate &2'

    Magnesium sul,ate &02'

    +romothymol blue &00='

    gar%agar &13'.

    2. 9ara Pembuatan -

    Melarutkan 22: gr #imon 9itrate gar ' !alam 1

    aFua!est. Men!i!ihkan menggunakan hot plate !an menghomogenkan

    103 menggunakan magnetic stirrer.

    Kemu!ian mensterilisasi menggunakan autocla*e pa!a suhu

    121 9 selama 1: menit.

  • 7/26/2019 makalah pml mikro

    39/39

    Da5tar Pustaka

    Prihatini SPengen!alian Mutu +i!ang Mikrobiologi Klinik @*uality control inclinical microbiology'T In!onesian 7ournal o, 9linical Pathology an!

    Me!ical aboratory 200;.

    Hirsang Merryani SKen!ali Mutu aboratorium Kesehatan alam ?paya Peningkatan

    Mutu Pelayanan KesehatanT Me!ia itbangkes 1>>=.

    Peraturan Menteri Kesehatan Republik In!onesia Nomor 43 tahun 2013 S9ara

    Penyelenggaraan aboratorium Klinik Uang +aikT. Menteri Kesehatan Republik

    In!onesia. 2013.

    an!epitte 7 !an erhaegen 7 S Prose!ur aboratorium asar ?ntuk +akteriologi

    KlinisT 7akarta- "H9. 2010.