m PENGARUH EKSTRAK ETANOL PEGAGAN (Centella … fileperpustakaanVunVaVidm digilibVunVaVidm m m m m m...

12
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id commit to user PENGARUH EKSTRAK ETANOL PEGAGAN (Centella asiatica L. urban) TERHADAP KERUSAKAN TUBULUS SEMINIFERUS TESTIS TIKUS (Rattus norvegicus) YANG DIINDUKSI STRES IMOBILISASI KRONIK SKRIPSI Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran SATRIA ADI PUTRA G.0010172 FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET Surakarta 2013

Transcript of m PENGARUH EKSTRAK ETANOL PEGAGAN (Centella … fileperpustakaanVunVaVidm digilibVunVaVidm m m m m m...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

PENGARUH EKSTRAK ETANOL PEGAGAN (Centella asiatica L. urban)

TERHADAP KERUSAKAN TUBULUS SEMINIFERUS TESTIS TIKUS

(Rattus norvegicus) YANG DIINDUKSI

STRES IMOBILISASI KRONIK

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

SATRIA ADI PUTRA

G.0010172

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

Surakarta

2013

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

PENGESAHAN SKRIPSI

Skripsi dengan judul: Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella asiatica L.

Urban) terhadap Kerusakan Tubulus Seminiferus Testis Tikus (Rattus

norvegicus) yang Diinduksi Stres Imobilisasi Kronik

Satria Adi Putra, NIM: G.0010172, Tahun: 2013

Telah diuji dan sudah disahkan di hadapan Dewan Penguji Skripsi

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret

Pada Hari Kamis, Tanggal 19 Desember 2013

Pembimbing Utama

Nama : Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc

NIP : 19810208 200604 2 003

(.................................)

Pembimbing Pendamping

Nama : Brian Wasita, dr., Ph.D

NIP : 19790722 200501 1 003

(.................................)

Penguji Utama

Nama : Endang Sri Hardjanti, dr., PFarK, Mor

NIP : 19471007 197611 2 001

(.................................)

Penguji Pendamping

Nama : Nanang Wiyono, dr., M.Kes

NIP : 19760530 200212 1 002

(.................................)

Surakarta, ………………..........................

Ketua Tim Skripsi Dekan FK UNS

Ari Natalia Probandari, dr., MPH., Ph.D Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., SpPD-KR-FINASIM

NIP. 19751221 200501 2 001 NIP 19510601 197903 1 002

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

ii

PERNYATAAN

Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang

pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan

sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis

atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah

dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, 19 Desember 2013

Satria Adi Putra

NIM. G0010172

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user iv

ABSTRAK

Satria Adi Putra, G0010046, 2013, Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella

asiatica L.urban) terhadap Kerusakan Tubulus Seminiferus Testis Tikus (Rattus

norvegicus) yang Diinduksi Stres Imobilisasi Kronik.

Latar Belakang: Stres telah menjadi bagian masyarakat modern yang tidak dapat

dihindari dan semakin meningkat. Padahal stres memiliki dampak negatif terhadap

kesehatan reproduksi. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui efek protektif ekstrak

Etanol Pegagan (Centella asiatica) terhadap tubulus seminiferus tetstis tikus yang

diinduksi stres imobilisasi kronik.

Metode: Penelitian ini menggunakan subjek penelitian berupa sediaan organ testis

Rattus norvegicus galur Sprague Dawley yang telah mendapat ekstrak Etanol

Pegagan dan stres imobilisasi selama 21 hari kemudian dibuat preparat blok parafin

dengan pengecatan HE. Penelitian menggunakan rancangan simple random

sampling dengan 6 kelompok yaitu: K (kelompok tanpa perlakuan), KP1 (kelompok

yang mendapat induksi stres), KP2 (induksi stres dan ekstrak Pegagan 150 mg/kg,

KP3 (induksi stres dan ekstrak 300 mg/kg), KP4 (induksi stres dan ekstrak 600

mg/kg), KP5 (induksi stres dan fluoksetin 10 mg/kg). Pengamatan pada 5 lapang

pandang setiap sampel untuk mengetahui persentase kerusakan tubulus. Parameter

yang digunakan meliputi kerusakan morfologi tubulus seminiferus, dislokasi sel

germinal testis, dan pelebaran jarak antartubulus. Analisis data menggunakan uji

statistika One Way Anova.

Hasil: Ekstrak Pegagan secara signifikan (p = 0.000) mengurangi kerusakan

tubulus seminiferus pada tikus yang diinduksi stres imobilisasi kronik. Pemberian

induksi stres secara nyata menunjukkan kerusakan tubulus (p = 0.000). Persentase

kerusakan tubulus seminiferus pada kelompok K: 13.63%, KP1: 50.89%, KP2:

28.58%, KP3: 33.04% KP4: 14.27%, dan KP5: 13.9%. Setelah pemberian Pegagan

menunjukkan perbedaan yang signifikan antara KP1 dan KP2, KP3, KP4 (p =

0.000). Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara KP4 dan fluoksetin sebagai

positif kontrol ( p = 0.796).

Simpulan: Ekstrak Etanol Pegagan (Centella asiatica L.urban) mampu mencegah

kerusakan tubulus seminiferus tikus (Rattus norvegicus) yang diinduksi stres

imobilisasi kronik.

Kata kunci: Pegagan, Kerusakan Tubulus seminiferus, Stres, Testis

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user v

ABSTRACT

Satria Adi Putra, G0010172, 2013, Effect of Ethanol Extract Pegagan (Centella

asiatica L.urban) on Seminiferous Tubules Testis Damage of Rat (Rattus

norvegicus) Induced by Chronic Immobilization Stress.

Background: Stress as a part of modern society could not be avoided. This

increasing number of stress would give bad impact on reproductive health. The aim

of this study was designed to determine the protective effect pegagan on

seminiferous tubules damage of rats induced by chronic immobilization stress.

Methods: This study used Rattus norvegicus Sprague Dawley strain testis organ

that had received the ethanol extract of Pegagan and immobilization stress for 21

days. The rats were randomly into 6 experimental groups: K (untreated group), KP1

(received stress induction), KP2 (stress induction and Pegagan extract 150 mg/kg),

KP3 (stress induction and extract 300 mg/kg), KP4 (stress induction and extract 600

mg/kg), KP5 (stress induction and fluoxetine 10 mg/kg). The subjects were made

Paraffin Block with HE staining. Tissue samples were obtained for tubular

histopathological investigation on 5 fields of view each sample. Tubular damage

were determined using germ cell dislocation, morphological changes, and enlarged

intercellular spaces of tubules. The datas were analysed statistically using One Way

Anova test.

Results: Extract Pegagan significantly (p = 0.000) reduced tubulus seminiferous

damage of rats induced by immobilization stress. KP1 showed meaningful damage

after stress induction (p = 0.000). Respectively, the percentage damage of

seminiferous tubules were K: 13.63%, KP1: 50.89%, KP2: 28.58%, KP3: 33.04%,

KP4: 14.27%, and KP5: 13.9%. Co-administration of Pegagan to stress induction

rats showed a significant difference between KP1 and KP2, KP3, KP4 (p = 0.000).

No significant difference between KP4 and fluoxetin as positive control (p = 0.796).

Conclusion: The ethanol extract of Pegagan (Centella asiatica L.urban) is capable

of preventing seminiferous tubules damage of rats (Rattus norvegicus) induced by

chronic immobilization stress.

Keywords: Centella asiatica, Tubules seminiferous damage, Stress, Testis

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

vi

PRAKATA

Puji syukur penulis haturkan ke hadirat Allah SWT karena atas karunia-Nya

penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul ”Pengaruh Ekstrak Etanol

Pegagan (Centella asiatica L.urban) terhadap Hitung Sperma Tikus (Rattus

norvegicus) yang Diinduksi Stres Imobilisasi Kronik”. Penelitian dan penulisan

skripsi ini dapat terlaksana dengan baik berkat bantuan, bimbingan, dan petunjuk

dari berbagai pihak. Untuk itu, penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada:

1. Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM selaku Dekan

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, Surakarta.

2. Ari Natalia Probandari, dr.,MPH,PhD selaku Ketua Tim Skripsi FK UNS.

3. Ratih Puspita Febrinasari, dr., MSc selaku Pembimbing Utama yang telah

menyediakan waktu di tengah kesibukannya untuk membimbing hingga

terselesaikannya skripsi ini.

4. Brian Wasita, dr., P.hD selaku Pembimbing Pendamping yang telah

menyediakan waktu di tengah kesibukannya untuk membimbing hingga

terselesainya skripsi ini.

5. Endang Sri Hardjanti, dr., PFarK, Mor selaku Penguji Utama yang telah

memberikan bimbingan, kritik dan saran demi kesempurnaan penulisan skripsi.

6. Nanang Wiyono, dr., M.Kes selaku Anggota Penguji yang telah memberikan

bimbingan, kririk dan saran demi kesempurnaan penulisan skripsi ini.

7. Seluruh Dosen dan Staf dari laboratorium Farmakologi dan Patologi Anatomi

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, Surakarta.

8. Bagian Skripsi FK UNS yang turut memberi kelancaran pembuatan skripsi ini.

9. Ayahanda Sumardi, Ibunda Sri Sulistyati, Mbak Eny Nugrohowati, Mas Agus,

Mas Anang Tri, Kakak Sri Setya, serta Adikku Dimas Subekti yang selalu

mendewasakan dan memberikan teladan yang tiada henti, mendoakan, dan

memberikan semangat dari jauh bagi penulis.

10. Sohib-sohib tercinta Sintin Khotijah yang selalu memberikan dukungan,

Gunung Mahameru atas nasehat-nasehatnya, Nabiel, Faris, Hajar, Silvia, Dyna,

Fajri, Erma yang setia menyemangati dan berjuang bahu membahu hingga

terselesaikannya skripsi ini.

11. Teman diskusi Maleoasyikers yang selalu mendoakan dan membawakan

hiburan hingga penelitian ini terselesaikan.

12. Rekan-rekan Kesuma Islam Kedokteran, Kastrat de Geneeskunde, Bulan Sabit

Merah Indonesia, ikatan Beasiswa Aktivis Nusantara, ikatan mahasiswa

berprestasi UNS atas keceriaan dan doa hingga penelitian ini terselesaikan.

13. Rekan-rekan dan pihak yang tidak dapat saya sebutkan satu-persatu yang turut

mendukung skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan dan jauh dari

kata sempurna. Penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi

kebaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat

bermanfaat bagi dunia kedokteran umumnya dan pembaca khususnya.

Surakarta, 19 Desember 2013

Satria Adi Putra

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

vii

DAFTAR ISI

Halaman

PRAKATA ..................................................................................................... vi

DAFTAR ISI .................................................................................................. vii

DAFTAR TABEL .......................................................................................... ix

DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... x

DAFTAR SINGKATAN ............................................................................... xi

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xii

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang ............................................................................ 1

B. Perumusan Masalah..................................................................... 4

C. Tujuan Penelitian......................................................................... 5

D. Manfaat Penelitian....................................................................... 5

BAB II LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka ......................................................................... 6

1. Pegagan (Centella asiatica) .................................................... 6

2. Testis ....................................................................................... 10

3. Kerusakan Tubulus Seminiferus ............................................. 12

4. Stres ......................................................................................... 14

5. Metode Blok Parafin .............................................................. 17

6. Fluoksetin ................................................................................ 18

B. Kerangka Pemikiran .................................................................... 21

C. Hiposesis ..................................................................................... 22

BAB III METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian ............................................................................ 23

B. Lokasi Penelitian ......................................................................... 23

C. Subjek Penelitian ......................................................................... 23

D. Teknik Sampling ......................................................................... 23

E. Rancangan Penelitian .................................................................. 25

F. Identifikasi Variabel Penelitian ................................................... 27

G. Definisi Operasional Variabel Penelitian .................................... 27

H. Alat dan Bahan Penelitian ........................................................... 28

I. Penentuan Dosis .......................................................................... 29

J. Cara Kerja ................................................................................... 30

K. Teknik Analisis ........................................................................... 32

BAB IV HASIL PENELITIAN

A. Preparat Sampel Penelitian.......................................................... 33

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

viii

B. Persentase Kerusakan Tubulus Seminiferus ............................... 39

BAB V PEMBAHASAN ............................................................................... 43

BAB VI PENUTUP

A. SIMPULAN ................................................................................ 53

B. SARAN ....................................................................................... 53

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 54

LAMPIRAN

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

ix

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1. Hasil Mean dan Standar Deviasi .................................................. 39

Tabel 4.2. Hasil Uji Post Hoc ........................................................................ 41

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user x

DAFTAR GAMBAR

halaman

Gambar 2.1. Pegagan .................................................................................... 6

Gambar 2. 2. Gambaran Histologis Tubulus Seminiferus ............................ 12

Gambar 2.3. Gambaran Morfologis Tubulus Seminiferus Berbagai Kondisi 14

Gambar 2.4. Kerangka Pemikiran ............................................................... 21

Gambar 3.1. Skema Rancangan Penelitian ................................................... 26

Gambar 4.1. Kelompok Kontrol Normal (K) ............................................... 34

Gambar 4.2. Kelompok Kontrol Negatif (KP1) ........................................... 35

Gambar 4.3. Kelompok Perlakuan 2 (KP2) .................................................. 36

Gambar 4.4. Kelompok Perlakuan 3 (KP3) .................................................. 36

Gambar 4.5. Kelompok Perlakuan 4 (KP4) ................................................. 37

Gambar 4.6. Kelompok Kontrol Positif (KP5) ............................................. 38

Gambar 4.7. Grafik Rata-rata Persentase Kerusakan Tiap Kelompok ......... 39

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xi

DAFTAR SINGKATAN

HSE Health & Safety Executive

HPA Hypotalamic-Pituitary-Adrenal

GnRH Gonadotropin Releasing

Hormone

LH Luteinizing Hormone

FSH Follicle Stimulating Hormone

mdpl meter diatas permukaan laut

SOD superoxide dismutase

NO Nitric Oxyde

LDL Low Density Lipoprotein

AMP Adenosin Mono Phosphat

CRF Corticotropin-Releasing Factor

AVP Arginine Vasopressin

mRNA messenger Ribonucleicacid

ACTH adrenocorticotropic hormone

TNF Tumor Necrosis Factor

SSRI Serotonin Selective Reuptake

Inhibitor

SERT Serotonin transporter

NET Norepinephrine transporter

MAO Monoamine oxidase

PCO Protein Carbonil Oxyde

HE Hematoxilin Eosin

UPHP Unit Pengembangan Hewan

Percobaan

K Kontrol

KP Kelompok Perlakuan

PGA Pulvis Gum Arabic

LPPT Lembaga Penelitian dan

Pengujian Terpadu

GRs Glukocorticoid Reseptors

LHRH Luteinizing Hormone

Releasing Hormone

5-HTTLPR 5-HTT gene–linked

promoter region

EPM Elevated Plus Maze

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user xii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Foto Preparat Menggunakan Opticlab

Lampiran 2. Persentase Kerusakan Tubulus Seminiferus

Lampiran 3. Analisis Data Menggunakan SPSS 17.00 for Windows

Lampiran 4. Dokumentasi Penelitian

Lampiran 5. Surat Ijin Penelitian

Lampiran 6. Ethical Clearance