LIPOSOM

(ORAL DRUG DELIVERY)

KELOMPOK IIIEVA KRISYANIASTRYANTI SEPTYANI VENI VIOLITADIAN RESTU HANDAYANIFITRAH JAUHARIWD SUCI RAHMAWATI

DEFINISI

LiposomBerbentuk vesikular dan bersifat

koloidal

Tersusu n atas lipid dwi lapis

Dibentuk dengan mendispersikan berbagai macam lipid (umumnya

fosfolipid)

Vesikel speries

Komponen Penyusun Liposom

FosfolipidKolesterol

Material yang Digunakan Untuk Preparasi Liposom

Phospholipids Phosphatidyl ethanolamine (PE) Phosphatidyl glycerol (PG) Phosphatidyl serine (PS) Phosphatidic acid (PA) Sphingo myelin(SM) Lyso-phospholipids

Tipe-Tipe Liposom

Niosomes Transfersomes Ethosomes Proliposomes

Klasifikasi Liposom

1. Berdasarkan Parameter Struktur

(1). Multilamellar vesicles (MLV) (2). Large unilamellar vesicles (LUV) (3). Small unilamellar vesicles (SUV)

2. Berdasarkan Basis

(1).Conventional liposomes (CL) (2). pH sensitive liposomes (3).Cationic liposomes (4).Immunoliposomes (5). Long-circulating liposomes (LCL)28

METODE PEMBUATAN LIPOSOM

Multilamellar Liposomes (MLV)

Small Unilamellar Liposomes (SUV)

•Lipid Hydration Method (Hand shake vesicles)•Solvent Spherule Method

•Sonication Method•French Pressure Cell Method

Large Unilamellar Liposomes (LUV)

•Solvent Injection MethodsEther Infusion MethodEthanol Injection Method

•Detergent Removal Methods•Reserves Phase Evaporation Method•Calcium-Induced Fusion Method:•Microfluldization Method•Freeze-Thaw Method:

Giant Liposomes

Multivesicular Liposomes:

Assymetric Liposomes:

Other Methods:

•Lyophilization•Heating Method•High-Pressure Extrusion Method

APPLICATION OF LIPOSOMES

Perlindungan terhadap degradasi enzimatik obat1) Target Obat2) Pemberian obat topikal3) Pengobatan infeksi human

immunodeficiency virus (HIV) 4) Meningkatkan kemanjuran / keamanan

antimikroba5) Liposom kationik untuk pengiriman gen6) Liposom untuk vaksin

KETERBATASAN LIPOSOM

stabilitas sterilisasi efisiensi enkapsulasi degradasi Lisosomal Terapi Gen Target Aktif

A Liposomal Delivery Vehicle forthe Anticancer Agent Gossypol

Gosipol antineoplastik

(In Vitro & In Vivo)

memodulasi resistensi multidrug

meningkatkan penyerapan agen kemoterapi ke

multidrugresistant baris sel

bioavailabilitas oral rendah

efek samping yang serius,

kelarutan terbatas dalam air

Liposom

GPLiposom

meningkatkan kelarutan

memperpanjang waktu sirkulasi

mengubah biodistribusi in vivo

mengurangi efek samping untuk senyawa ini

D-alpha-tokoferil polietilen glikol suksinat (TPGS)

struktur amphiphilic

GP stabil dalam liposom TPGS

GP stabil dalam liposom TPGS

persiapan, karakterisasi dan sitotoksisitas GP

Bahan dan Metode

Reagen

• Asam asetat • TPGS• , fosfatidilkolin telur (EPC), • kolesterol (CH) dan metoksi-

polietilen glikol (MW 2000) • distearoylphosphatidylethanol

amine (MPEG-DSPE) • 3 - (4,5 - Dimethyl-2-thiazolyl) • 2,5-diphenyl tetrazolium

bromide (MTT) • Semua bahan kimia lain yang

analitis atau HPLC grade.

Kultur Sel

• sel karsinoma mulut manusia• sel kanker payudara dikultur• 50 penisilin pg / ml• 50 mg / ml streptomisin• 10% serum janin sapi (FBS)

Preparasi Liposom

Metode Ekstruksi

bahan lipid termasuk fosfolipid telur,

PEGDSPE, TPGS, kolesterol dan

GP

CH2Cl2

Dilarutkan

Rotary Evaporator

Dikeringkan

Film lipid

Dikeringkan

pH 7,4 buffer fosfat-saline (PBS)

Dihidrasi

Suspensi lipid

diekstrusi 3 kali

Liposom dimurnikan berdasarkan ukuran

Efisiensi penjeratan

Liposom

kolom Sepharose CL-4B (Sigma-Aldrich Inc)

dimurnikan berdasarkan ukuran-eksklusi kromatografi

dihitungEfisiensi jebakan

Distribusi ukuran

liposom suspensi (100

ml)

•Diencerkan dg 1 ml air suling•pada suhu25 ˚ C•Nicomp Submikron Particle Sizer •Model 370

Hamburan Cahaya Dinamis

Zeta PotensialSuspensi

liposom (100 ml)

•Diencerkan dg 1,5 ml air suling•pada suhu25 ˚ C•Potensi Zeta Analyzer

zeta potensi sampel liposomal

Stabilitas liposom GP-load

GP Liposomal suspensi liposom (1 ml) dicampur dengan FBS (2.5ml)

membran semipermeabel

Dianalisis

sampel liposomal dikumpulkan dan dilarutkan dalam etanol

penyimpanan pada 37 ˚ C

disentrifugasi pada 10.000 rpm selama 15

menit

menentukan konsentrasi obat oleh serapan

pada 371 nm.

Sitotoksisitas liposom GP-load.

MCF-7 sel dipindahkan ke 96-piring kultur jaringan pada 5 ×

103 sel per sumur 24 jam sebelum obat pengobatan

Uji MTT

Medium kultur kemudian diganti dengan 200 ml

medium yang mengandung zat uji

sel-sel dicuci dua kali dengan PBS

Diinkubasi pada suhu 37 ˚ C selama 24 atau 48 jam

Ditambahkan Sebanyak 20 ml MTT larutan stok (5 mg /mL)

diinkubasi selama 4 jam pada 37 ˚ C

Ditambahkan DMSO

Sel viabilitas dinilai dengan absorbansi pada 570 nm diukur pada

lempeng pembaca Biorad

Hasil

Di antara berbagai jenis formulasi diperiksa, liposom terdiri dari EPC / PEG-DSPE / CH / GP (10:0.5:2:1) dan EPC / TPGS / CH / GP (10:0.5:2:1) menunjukkan efisiensi enkapsulasi terbaik.

Kolesterol meningkatkan stabilitas membran lipid bilayer.

PEG-DSPE di bilayers lipid dapat meningkatkan pemuatan obat lipofilik

sitotoksisitas rendah TPGS-dan PEG-DSPE mengandung formulasi

menunjukkan nilai IC50 lebih tinggi dari uncoated liposom dan formulasi obat bebas setelah 24 jam inkubasi.

Kesimpulan

liposom yang dengan zat aktif GP memiliki stabilitas yang baik jika dibuat dengan metode dispersi Film dan ekstrusi, . Liposom GP tidak toksik dan memiliki toleransi yang lebih baik sebagai agen antikanker. Liposom GP yang mengandung TPGS atau PEG-DSPE dapat menurunkan zeta potensial, mengendalikan pelepasan obat dari liposom pada suhu penyimpanan 37 ˚ C serta mengurangi sitotoksisitas liposom.

TPGS mungkin memiliki potensi untuk digunakan sebagai komponen untuk persiapan penghantaran GP liposomal lebih panjang secara in vivo.