Kinetika reaksi .•Michaelis –Menten laju awal reaksi ... Contoh...

download Kinetika reaksi .•Michaelis –Menten laju awal reaksi ... Contoh soal •Kinetika enzim glukoamilase ditentukan pada ... Tentukan model kinetika penghambatan Waktu

of 23

  • date post

    31-Jan-2018
  • Category

    Documents

  • view

    559
  • download

    31

Embed Size (px)

Transcript of Kinetika reaksi .•Michaelis –Menten laju awal reaksi ... Contoh...

  • Kinetika reaksienzimatis

    Shinta Rosalia Dewi, M.Sc

  • Enzim : protein yg mengkatalisis prosesbiokimia dalam sel hayati yang spesifikproduksi biomassa atau metabolit, produkpangan, pakan, dll

    Reaksi enzimatis :

    Sistem homogen atau heterogen

    Satu substrat atau lebih

  • Dasar kinetika reaksi enzimatis

    Michaelis Mentenlaju awal reaksienzimatis dapat ditentukan berdasarkanfungsi terhadap konsentrasi substrat danparameter yg berpengaruh dalam enzim

    Henri pembentukan kompleks enzimsubstrat reversibel selama reaksipembentukan produk dari substrat lajureaksi berbanding lurus dengan konsentrasikompleks

  • Reaksi reversibelk k

    kE S ES E P

    d[S]v k [E][S] k [ES]

    dt

    d[ES]v k [E][S] [k k ][ES]

    dt

    laju pembentukan (kekanan) = laju penguraian (kekiri)

    k [E][S] [k k ][ES]

    k [E][S] [k k ][ES]

    k k[E][S] [ES]

    k

    1 2

    1

    1 1

    1 1 2

    1 1 2

    1 1 2

    1 2

    1

    0

    k kKm

    k

    1 2

    1

  • T

    T

    T

    T

    T

    T

    max T

    max

    [E][S] [ES]Km

    [E ] [E] [ES]

    [E ] [ES] [S] [ES]Km

    [E ][S] [ES][S] [ES]Km

    [E ][S] [ES] Km [S]

    [E ][S][ES]

    Km [S]

    [E ][S]v k [ES] k

    Km [S]

    v k [E ]

    v [S]v

    Km [S]

    2 2

    2

  • Kinetika reaksi Michaelis-Menten :

    maxv [S]vKm [S]

  • Kinetika reaksi homogen : penentuan Km

    Persamaan Lineweaver dan Burk

    max

    max max max

    max max

    v [S]v

    Km [S]

    Km [S] Km [S]

    v v [S] v [S] v [S]

    Km

    v v [S] V

    1

    1 1 1

  • Persamaan Eadie Hofstee

    max

    max

    max

    max

    max

    v [S]v

    Km [S]

    v Kmv sehingga v =v

    Km [S]

    [S]

    vv = Km v

    [S]

    vv Km v

    [S]

    1

    1

  • Persamaan Hanes

    max

    max max

    max max

    max max

    v [S]v

    Km [S]

    Km(Lineweaver Burk)

    v v [S] v

    Km[S] [S] [S]

    v v [S] v

    [S] Km[S]

    v v v

    1 1 1

    1 1 1

    1

  • Inhibisi

    Kompetitif : inhibitor berkompetisi dengansubstrat untuk berinteraksi dengan sisi aktifenzim

    uncompetitive: inhibitor menghambat kerjaenzim di sisi yg berbeda dari interaksisubstrat-enzim terikat pada ES

    Non- kompetitif : inhibitor menghambat di sisiberbeda, tidak menghasilkan produkterikat pada E atau ES

  • Inhibisi

    Oleh produk produk yang dihasilkan dapatmenghambat kerja enzim kompetitif atautidak kompetitif

    Oleh substrat substrat menghambat kerjaenzim (konsentrasi substrat terlalu tinggi) membentuk kompleks tidak kompetitif

  • Inhibisi kompetitif

  • Inhibisi kompetitifk k

    k

    ki

    max

    max max

    E S ES E P

    E I EI

    [ET] [ES] [E] [EI]

    v [S]v

    [I]Km [S]

    Ki

    Km [I]

    v v v Ki [S]

    [I]K 'm Km

    Ki

    1 2

    1

    1

    1 1 11

    1

  • Inhibisi uncompetitive

  • Inhibisi uncompetitive

    k k i

    k

    max

    E S I ES I ESI

    ES E P

    [ET] [ES] [E] [ESI]

    v[S]

    [I]

    Kiv

    Km[S]

    [I]

    Ki

    1 1

    1

    1

    1

    max max

    Km [I]

    v v [S] v Ki

    KmK 'm

    [I]

    Ki

    1 1 11

    1

  • Inhibisi non-kompetitif

  • Inhibisi non-kompetitif

    k k

    k

    ki

    ki

    max

    max max

    E S ES E P

    E I EI

    ES I ESI

    [ET] [ES] [E] [ESI]

    v [S]v

    [I]Km [S]

    Ki

    Km [I]

    v v [S] v Ki

    1 2

    1

    1

    1

    1 1 11

  • Faktor yang mempengaruhi reaksienzimatis

    pH perubahan struktur, ionisasi, pengikatanenzim

    pH mempengaruhi muatan

    Muatan mempengaruhi struktur enzim

    Selanjutnya akan mempengaruhi reaksi ES

  • Suhu

    k=Ae-E/RT

    Pereaksi kimia

  • Penentuan aktivitas enzim

    pH Stat pengukuran jumlah asam (H+) yang ditambahkan ke cairan pereaksi volume asam/basa terhadap waktu

    Spektrofotometri pengukuran enzimdengan spektrofotometer pada panjanggelombang tertentu

  • Contoh soal

    Kinetika enzim glukoamilase ditentukan padasuatu reaktor tertutup pada suhu 40oC berdasarkan glukosa yang terbentuk (mol/L). Bila volume cairan dalam reaktor 500 ml danlarutan enzim yang digunakan 500 L mengandung 4g/L.

  • Bagaimana bentuk kinetika hidrolisis maltosaoleh enzim glukoamilase?

    Glukosa sebagai produk juga berfungsi sebagaiinhibitor. Kinetika penghambatannya ditunjukkanpd tabel di bawah. Tentukan model kinetikapenghambatan

    Waktu(menit)

    Konsentrasi awal maltosa (mM)

    50 100 150 200

    2 95 110 130 140

    5 230 290 320 340

    10 440 570 640 670

    15 700 860 960 1.000

    30 1.400 1.700 1.900 2.000

  • TRK meeting 5.xlsx

    Glukosa(mM)

    Konsentrasi substrat maltosa (mM)

    50 100 150 200

    0 5,8 7,2 8 8,4

    2,5 5,2 6,9 7.6 8,1

    5 4,8 6,4 7,3 7,9

    10 4,1 5,8 6,7 7,4

    TRK meeting 5.xlsx