Prevalensi infeksi Candida oral pada pasien periodontitis dengan diabetes mellitus tipe 2

Sultan Al Mubaraka,∗, Asirvatham Alwin Robertb, Jagan Kumar Baskaradossc, Khalid Al-Zomana, Abdulaziz Al Sohail d, Abdulaziz Alsuwyede, Sebastian Cianciof

a King Faisal Specialist Hospital & Research Center, Riyadh, Saudi Arabia b Research Center, Sultan Bin Abdulaziz Humanitarian City, Riyadh, Saudi Arabia c Department of Dental Public Health, College of Dentistry, King Saud Bin Abdulaziz University for Health Sciences, Riyadh, Saudi Arabia d Prince Abdulrahman Bin Abdulaziz Institute for Higher Dental Studies, Riyadh, Saudi Arabia e Dental Department, King Abdulaziz Medical City, Riyadh, Saudi Arabia f Department of Periodontics and Endodontics, School of Dental Medicine, State University of New York at Buffalo, NY, USA

Ringkasan

Tujuan: Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui prevalensi Candida spp. pada pasien periodontitis dengan diabetes mellitus tipe 2. Metode: Penelitian cross-sectional ini termasuk 42 pasien diabetes dengan periodontitis (berusia 21-70 tahun; 18 laki-laki dan 24 perempuan). Pengukuran klinis termasuk kedalaman probing pocket (PPD), tingkat perlekatan klinis (CAL) dan kadar hemoglobin A1c (HbA1c). Sampel sub-gingiva dikumpulkan dari aspek mesio-bukal dari gigi 3 untuk analisis jamur. Spesies Candida, termasuk Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida tropicalis dan Candida glabrata, diidentifikasi menggunakan pewarnaan Gram, uji tabung kuman, CHROMagar, Staib agar dan API 20C AUX. Hasil: Prevalensi keseluruhan Candida pada pasien diabetes dengan periodontitis yang diamati dalam penelitian adalah 52%. Spesies Candida yang sering ditemukan adalah C. albicans (38%), diikuti oleh C. dubliniensis (9,5%), C. tropicalis (4,7%) dan C. glabrata (4,7%). Dibandingkan dengan wanita, pasien laki-laki yang ditandai dengan peningkatan kadar infeksi Candida. Hasil penelitian juga menunjukkan bahwa individu di atas usia 40 tahun mengalami peningkatan kadar infeksi Candida dibandingkan dengan pasien yang berusia kurang dari 40 tahun. Infeksi Candida lebih tinggi di antara subyek dengan kadar gula darah yang tinggi (HbA1c> 9) dibandingkan dengan individu dengan kadar gula darah yang terkontrol (HbA1c <6). Pasien dengan PPD ≥ 5 memiliki risiko infeksi Candida yang tinggi dibandingkan dengan pasien dengan PPD antara 3 dan 4. Kesimpulan: Penelitian ini menunjukkan bahwa frekuensi C. albicans lebih tinggi dari frekuensi C. dubliniensis, C. tropicalis dan C. glabrata pada pasien diabetes dengan periodontitis. Infeksi Candida diamati pada peningkatan frekuensi antara subyek dengan kadar gula darah tinggi dan PPD ≥ 5.

© 2013 Raja Saud Bin Abdulaziz University untuk Ilmu Kesehatan. Diterbitkan oleh Elsevier.

PengantarPrevalensi seluruh dunia diabetes dewasa adalah sekitar 171 juta, dan Kesehatan Dunia Organisasi (WHO) dan International Diabetes Federation (IDF) memperkirakan bahwa prevalence ini akan meningkat menjadi sekitar 366 juta pada tahun 2030 [1]. Loe melaporkan bahwa diabetes adalah faktor risiko untuk periodontitis dan penyakit periodontal adalah komplikasi keenam terkemuka diabetes [2]. Hiperglikemia memicu serangkaian peristiwa yang menyebabkan peningkatan risiko infeksi. Memang, hubungan yang signifikan antara diabetesdan peningkatan kerentanan terhadap infeksi oral, termasuk penyakit periodontal, telah dilaporkan[3].

Candida albicans adalah spesies periodontal yang paling sering dikaitkan dengan lesi oral, tapi spp Candida lainnya juga tidak menutup kemungkinan [4] dari air liur subyek dengan dan tanpa kandidiasis oral. Isolasi Candida dari rongga mulut bukan berarti tidak adanya penyakit rongga mulut  [5]. Namun, organisme jamur umumnya menjajah lidah, langit-langit dan bukal mukosa, dan kolonisasi tersebut dapat terjadi di plak sub-gingiva orang dewasa dengan periodontitis [6].

Sering terjadinya infeksi Candida pada pasien dengan diabetes mellitus telah dikenal selama bertahun-tahun[7]. Jenis lain Candida spp. telah sering diisolasi dari rongga mulut pasien dengan diabetes. C. albicans, yang telah sering diisolasi dari pasien diabetes [8], Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida dubliniensis, Candida kuusei, Candida colliculosa, Candida fomata, Candida parapsilosis, Candida guillermondii dan Candida rugosa telah sembuh dari pasien diabetes [11/09].  Tujuan

dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki prevalensi Candida spp. pada pasien periodontitis dengan Diabetes mellitus tipe 2.

Materi dan metode

Penelitian cross-sectional ini termasuk 42 pasien diabetes dengan periodontitis (18 laki-laki dan 24 perempuan; berusia 21-70 tahun) yang terdaftar di Sultan Bin Abdulaziz Humanitarian City, Riyadh, Kerajaan Arab Saudi, dari Maret 2008 Agustus 2009. Subyek direkrut pada saat mereka mengecek dan kontrol gigi di SBAHC.

Internasional Federasi Diabetes (IDF) dan American College of Endocrinology (ACE) merekomendasikan mempertahankan kadar hemoglobin A1c (HbA1c) di bawah 6,5%, sedangkan American Diabetes Association (ADA) merekomendasikan bahwa tingkat HbA1c berada di bawah 7,0% [12]. Dalam penelitian ini, sampel darah vena pada saat puasa untuk laboratorium analisis dari HbA1c yang terglikasi yang diperoleh dari vena antecubital antara pukul 08:00 dan 10:30 dengan venipuncture menggunakan 27-G jarum kupu-kupu dan DCA Vantage. Kontrol glikemik yang buruk didefinisikan tingkat HbA1c ≥ 7%.

Pengukuran klinis termasuk probing pocket depth (PPD) dan clinical attachment level (CAL). Periodontitis didefinisikan sebagai keadaan berupa penghancuran jaringan periodontal, yang bermanifestasi PPD ≥ 3 mm dan ≥3 mm kehilangan perlekatan pada tempat yang sama [13].

Subyek yang bersedia untuk berpartisipasi dalam penelitian diminta untuk menandatangani informed consent. Kriteria inklusi adalah : rentang usia antara 21 dan 70 tahun; diagnosis diabetes tipe 2 yang telah didiagnosis minimal 1 tahun sebelum penelitian; mInimal 18 Sisa gigi alami tanpa restorasi mahkota; dan kondisi fisik yang baik tanpa penyakit medis yang serius atau penyakit menular, seperti malignansi dan hepatitis aktif.  Kriteria ekslusi penggunaan

pengobatan jamur atau perawatan periodontal dalam waktu 3 bulan sebelum penelitian. Pasien wanita yang sedang hamil atau sedang sakit juga dikeluarkan dari penelitian. Semua partisipan sepatutnya diberitahu tentang penelitian, dan penelitian ini telah disetujui oleh bagian Penelitian dan Etika Komite SBAHC. Sampel sub-gingiva dikumpulkan dari 3 dari kantong terdalam di rongga mulut, dan sampel itu dikirim untuk analisis jamur di Pusat penelitian SBAHC. Sampel sub-gingiva dikembangbiakan pada media khusus, CHROMagar [14], untuk membiakan Candida. Sample yang baik dipipet ke CHROMagar Candida (CHROMagar, Paris, Prancis) 10 tetes dari suspensi sel mengandung 2 × 107 sel ragi/ml. Kultur pada media diinkubasi di 37◦ C dan diperiksa setelah 2 hari [15]. Sample kemudian diinkubasi [16] pada 42◦C untuk membedakan antara C. albicans dan C. dubliniensis. Semua sample dianalisis menggunakan AUX API 20Csistem (bioMeriux, Marcy-l'E 'toile, Prancis) untuk mengidentifikasi secara definitif berdasarkan karbohidrat yang di asimilasi. Sel ragi di PBS, yang setara dengan McFarland Standard No.0,5, tersebar pada ragi nitrogen pelat dasar agar (Difco) yang tidak mengandung karbohidrat. Kertas disk direndam dalam 1% (w/v) , dan hasil yang dibaca setelah inkubasi piring di 25◦C untuk 2-3 hari [17].

Analisis statistikSemua data yang tersedia dianalisis, dan tidak ada data yang hilang. Analisis data dilakukan dengan menggunakan Microsoft Excel 2002 (Microsoft Corporation, Seattle, WA, USA) dan Paket Statistik, versi 16 (SPSS Inc, Chicago, IL, USA).

HasilData sosio-demografis ditunjukkan pada Tabel 1. Usia rata-rata dari peserta penelitian adalah 47,3 ± 14,4 (rata-rata tengah ±). Delapan belas peserta adalah laki-

laki (42,8%), dan 24 (57,2%) adalah perempuan. Keseluruhanprevalensi Candida pada pasien diabetes adalah 52%, dan spesies diidentifikasi termasuk C. albicans (38%),C.dubliniensis (9,5%), C. tropicalis (4,7%) dan C.glabrata (4,7%). 

Gambar. 1 menunjukkan spesifik gender prevalensi Candida pada pasien diabetes dengan periodontitis. Dibandingkan dengan pasien wanita, laki-laki mengalami peningkatan kadar C. albicans, C.dubliniensis, C. tropicalis dan C. glabrata. Gambar. 2 menunjukkan bahwa pasien di atas usia 40 memiliki peningkatan kadar C. albicans, C. dubliniensis, C.tropicalis dan C. glabrata dibandingkan dengan individu di bawah usia 40. Pengaruh keparahan diabetes pada infeksi Candida ditunjukkan pada Gambar. 3. Infeksi Candida lebih

umum di kalangan subyek dengan kadar gula darah tinggi (HbA1c> 9) dibandingkan dengan gula darah yang terkendali dengan baik (HbA1c <6). Pengaruh PPD pada Candida ditunjukkan pada Gambar. 4. Pasien dengan PPD ≥ 5 mm mempunyai risiko infeksi Candida yang tinggi berbanding pasien dengan PPD antara 3 dengan 4 mm.

Gambar 1. Prevalensi Candida pada pasien diabetes dengan periodontitis. 

Gambar 2.Prevalensi Candida berdasarkan usia pada pasien diabetes dengan periodontitis

Gambar 3. Prevalensi Candida pada pasien dengan kadar HbA1c yang berbeda

Diskusi

Faktor virulensi pada spesies Candida memfasilitasi kolonisasi dan proliferasi dalam kantong periodontal. Candida spp. dapat mengagregasi dengan bakteri dalam biofilm gigi dan melekat pada sel epitel. Interaksi ini mungkin penting dalam kolonisasi mikroba yang memberikan kontribusi untuk perkembangan penyakit oral [18,19]. Spesies Candida, terutama C. albicans, telah berkontribusi dari kantong periodontal pada 7,1-19,6% dari pasien dengan periodontitis kronis [6,20]. Kedua C. albicans dan C. dubliniensis mampu berkolanisasi kantong periodontal pada pasien dengan periodontitis kronis [21].

Gambar 4 Prevalansi Candida dengan kedalaman probing pocket (mm).

Laporan yang diterbitkan juga mengindikasikan bahwa C. albicans adalah spesies dominan ragi yang diisolasi dari cairan sulkus gingiva (gingival crevicular fluid) dan kantong periodontal dari pasien periodontal dan subyek sehat, namun keberadaan C. glabrata dan C. tropicalis juga telah dilaporkan walaupun jarang [19,22]. Dalam studi ini, dilaporkan bahwa prevalensi infeksi Candida lebih tinggi pada pasien diabetes. Selain itu, kami ditemukan bahwa laki-laki berisiko tinggi dalam mengalami infeksi Candida daripada perempuan. Hasil penelitian juga menunjukkan bahwa individu yang berusia lebih dari 40 lebih sering mengalami infeksi Candida dibandingkan dengan pasien yang lebih muda.

Percobaan Polymerase chain reaction (PCR) mengungkapkan bahwa jumlah dari beberapa Candida spp. lebih tinggi pada pasien diabetes dengan penyakit periodontal kronis dibandingkan pada pasien tanpa dia-betes [23]. Di antara pasien diabetes, C. albicans, C. dubliniensis, C. tropicalis dan C. glabrata diamati sebanyak 57%, 75%, 16% dan 5% dari kantong periodontal masing-masing. Pada pasien non-diabetes, C. albicans dan C. dubliniensis hadir pada 20% dan 14% dari situs periodontal, masing-masing. Sebaliknya, tidak ada bukti kolonisasi dari C. tropicalis atau C. glabrata yang ditemukan di situs periodontal [23]. Dalam penelitian ini, ditemukan bahwa pasien periodontitis dengan PPD ≥ 5 mm memiliki risiko tinggi infeksi Candida disbanding pasien dengan PPD antara 3 dan 4 mm.

Studi sebelumnya telah melaporkan bahwa pasien diabetes yang dikolonisasi dengan Candida memiliki kadar glukosa dalam saliva yang tinggi dibandingkan pasien yang tidak dikolonisasi [24]. Bahkan, jumlah

infeksi Candida pada pasien diabetes terkontrol adalah rendah dibanding pasien diabetes yang tidak terkontrol. Kontrol diabetes yang baik adalah perlindungan terbaik terhadap infeksi Candida, dan penelitian telah menunjukkan bahwa mengendalikan kadar gula darah menurunkan risiko infeksi Candida [25-27]. Pada penelitian ini, ditemukan bahwa tingkat infeksi Candida meningkat pada penderita diabetes yang tidak terkontrol dibandingkan dengan pasien yang kadar gula darah yang terkontrol. Infeksi Candida jarang terjadi pada subjek dengan kadar gula darah yang terkontrol (HbA1c <6) dibanding subjek tanpa kontrol diabetes yang teratur (HbA1c> 9).

Keterbatasan utama dari penelitian ini adalah jumlah pasien yang relatif kecil dan terbatasnya jumlah faktor risiko yang diteliti. Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk mengatasi keterbatasan ini. Namun, penelitian ini memberikan data berharga yang berkaitan dengan populasi Saudi. Selain itu, studi ini menunjukkan kebutuhan untuk penelitian yang luas di daerah ini di Arab Saudi, yang bisa memfasilitasi perencanaan dan desain strategi dan intervensi yang tepat.

Kesimpulannya, penelitian ini menunjukkan bahwa frekuensi infeksi dari C. albicans lebih tinggi dari frekuensi C. dubliniensis, C. tropicalis dan C. glabrata pada pasien diabetes dengan periodontitis. Selain itu, infeksi Candida pada populasi lebih sering ditemukan pada subyek dengan kadar gula darah tinggi dan PPD ≥ 5 mm. Selain itu, studi lebih lanjut dalam pengaturan klinis yang berbeda akan diperlukan untuk memberikan gambaran yang lebih komprehensif dari infeksi

Candida pada pasien periodontitis dengan diabetes mellitus.

Daftar Pustaka

[1] Agarwal S, Raman R, Paul PG, Rani PK, Uthra S, Gayathree R, et al. Sankara Nethralaya—–Diabetic Retinopathy Epidemiology and Molecular Genetic Study (SN-DREAMS 1): study design and research methodology. Ophthalmic Epidemiology 2005;12:143—53.

[2] Loe H. Periodontal disease. The sixth complication of diabetes

mellitus. Diabetes Care 1993;16:329—34.

[3] Cullinan MP, Ford PJ, Seymour GJ. Periodontal disease and systemic health: current status. Australian Dental Journal 2009;54(Suppl. 1):S62—9.

[4] Coleman DC, Sullivan DJ, Bennett DE, Moran GP, Barry HJ, Shanley DB. Candidiasis: the emergence of a novel species, Candida dubliniensis. AIDS 1997;11:557—67.

[5] Oliveira MA, Carvalho LP, Gomes Mde S, Bacellar O, Barros TF, Carvalho EM. Microbiological and immunological features of oral candidiasis. Microbiology and Immunology 2007;51:713—9.

[6] Slots J, Rams TE, Listgarten MA. Yeasts, enteric rods and pseudomonads in the subgingival flora of severe adult periodontitis. Oral Microbiology and Immunology 1988;3:47—52.

[7] Kumar BV, Padshetty NS, Bai KY, Rao MS. Prevalence of Candida in the oral cavity of diabetic subjects. Journal

of the Association of Physicians of India 2005;53:599—602.

[8] Rajendran R, Robertson DP, Hodge PJ, Lappin DF, Ramage G. Hydrolytic enzyme production is associated with Candida albicans biofilm formation from patients

with type 1 diabetes. Mycopathologia 2010;170:229—35.

[9] Lotfi-Kamran MH, Jafari AA, Falah-Tafti A, Tavakoli E, Falahzadeh MH. Candida colonization on the denture of diabetic and non-diabetic patients. Dental Research Journal (Isfahan) 2009;6:23—7.

[10] Manfredi M, McCullough MJ, Al-Karaawi ZM, Hurel SJ, Porter SR. The isolation, identification and molecular analysis of Candida spp. isolated from the oral cavities of patients with diabetes mellitus. Oral Microbiology and Immunology 2002;17:181—5.

[11] Motta-Silva AC, Aleva NA, Chavasco JK, Armond MC, Franca JP, Pereira LJ. Erythematous oral candidiasis in patients with controlled type II diabetes mellitus and complete dentures. Mycopathologia 2010;169: 215—23.

[12] Executive summary: standards of medical care in diabetes— –2009. Diabetes Care 2009;32:S6—12.

[13] Albandar JM, Brunelle JA, Kingman A. Destructive periodontal disease in adults 30 years of age and older in the United States, 1988—1994. Journal of Periodontology 1999;70:13—29.

[14] Odds FC, Bernaerts R. CHROMagar Candida, a new differential isolation medium for presumptive identification of clinically important Candida species. Journal of Clinical Microbiology 1994;32:1923—9.

[15] Park JH, Shin BC, Do BH, Oh JT, Lee JM, Kim SW, et al. Serum IgE levels in Korean patients with human immunodeficiency virus infection. Korean Journal of Internal Medicine 2002;17:88—93.

[16] Melton JJ, Redding SW, Kirkpatrick WR, Reasner CA, Ocampo GL, Venkatesh A, et al. Recovery of Candida dubliniensis and other Candida species from the oral cavity of subjects with periodontitis who had

well-controlled and poorly controlled type 2 diabetes: a pilot study. Special Care in Dentistry 2010;30:230—4.

[17] Rousselle P, Freydiere AM, Couillerot PJ, de Montclos H, Gille Y. Rapid identification of Candida albicans by using Albicans ID and fluoroplate agar plates. Journal of Clinical Microbiology 1994;32:3034—6.

[18] Sardi JC, Duque C, Mariano FS, Peixoto IT, Höfling JF, Gonc¸alves RB. Candida spp. in periodontal disease: a brief review. Journal of Oral Science 2010;52: 177—85.

[19] Jarvensivu A, Hietanen J, Rautemaa R, Sorsa T, Richardson M. Candida yeasts in chronic periodontitis tissues and subgingival microbial biofilms in vivo. Oral Diseases 2004;10:106—12.

[20] Reynaud AH, Nygaard-Ostby B, Boygard GK, Eribe ER, Olsen I, Gjermo P. Yeasts in periodontal pockets. Journal of Clinical Periodontology 2001;28:860—4.

[21] Urzua B, Hermosilla G, Gamonal J, Morales-Bozo I, Canals M, Barahona S, et al. Yeast diversity in the oral microbiota of subjects with periodontitis: Candida albicans and Candida dubliniensis colonize the periodontal pockets. Medical Mycology 2008;46:783—93.

[22] Ergun S, Cekici A, Topcuoglu N, Migliari DA, Kulekci G, Tany-eri H, et al. Oral status and Candida colonization in patients

with Sjogren’s syndrome. Medicina Oral Patologia Oral y Cirugia Bucal 2010;15:e310—5.

[23] Sardi JC, Cruz GA, Höfling JF, Duque C, Gonc¸alves RB. Identification of Candida species by PCR in periodontal pockets of diabetic patients with chronic periodontitis. International Symposium. Congress of Clinical Microbiology 2008 (Abstract).

[24] Darwazeh AM, MacFarlane TW, McCuish A, Lamey PJ. Mixed salivary glucose levels and candidal carriage in patients with diabetes mellitus. Journal of Oral Pathology and Medicine 1991;20:280—3.