ISBN 978-602-8892-72-8 tahun Seminar Nasional Farmasi...

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 1

Seminar Nasional Farmasi Universitas Sumatera Utara 2012:Peran Farmasi dalam Pembangunan Kesehatan

ISBN 978-602-8892-72-8

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 2


PERPUSTAKAAN NASIONAL: KATALOG DALAM TERBITAN

Peranan Farmasi Dalam Pembangunan Kesehatan-Seminar

Proceeding – editor, M. Pandapotan Nst, dkk. – Medan :

Fakultas Farmasi USU, 2012

ISBN 978-602-8892-72-8

Termasuk bibliografi

1. Peranan Farmasi I. Kesehatan

© Hak Cipta dilindungi berdasarkan Undang-Undang

No. 19 Tahun 2002 tentang Hak Cipta

Dilarang memperbanyak sebagian atau seluruh isi buku ini dengan

cara apapun, termasuk dengan cara penggunaan mesin fotocopy

tanpa izin dari penerbit

Cetakan pertama, September 2012

M. Pandapotan Nst.

PERANAN FARMASI DALAM PEMBANGUNAN KESEHATAN: SEMINAR PROCEEDING

Hak penerbitan pada Fakultas Farmasi USU.

Editor dan Penerbit tidak bertanggung jawab atas substansi tulisan.

Penyunting : Lia Laila

Desain cover : Sumardi

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 10


DAFTAR ISI

KATA SAMBUTAN KETUA PANITIA............................................................................................ 3

KATA SAMBUTAN DEKAN FAKULTAS FARMASI USU .......................................................... 4

KATA SAMBUTAN REKTOR .......................................................................................................... 6

KATA PENGANTAR EDITOR.......................................................................................................... 9

DAFTAR ISI...................................................................................................................................... 10

KUMPULAN MAKALAH LENGKAP KATEGORI BIOLOGI FARMASI............................ 14

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING.......................................................................... 15

KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI SERTA............................................................... 24

KANDUNGAN ASIATIKOSIDA DAN UJI FITOKIMIA .............................................................. 33

ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI ................................................................................. 45

Pemisahan Senyawa Flavonoid dari Ekstrak Etlasetat dengan KKt Preparatif ................................. 49

UJI POTENSI ANTITUBERKULOSIS EKSTRAK ETANOL ....................................................... 52

UJI SITOTOKSIK FRAKSI EKSTRAK ETANOL KUDA LAUT ................................................. 63

AKTIVITAS SITOTOKSIK BEBERAPA ISOLAT......................................................................... 71

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI KEMAMPUAN SEBAGAI..................................................... 79

TANGGAP PERTUMBUHAN KEDELAI PADA.......................................................................... 91

ANALISIS KOMPONEN KIMIA MINYAK ATSIRI ................................................................... 100

STUDI PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI ........................................................... 108

ISOLASI DAN IDENTIFIKASI AGAR ......................................................................................... 120

POTENSI EKSTRAK ETILASETAT DAN EKSTRAK ETANOL............................................... 129

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI ...................................................................................... 120

POTENSI ANTIBAKTERI AIR REBUSAN SERBUK, EKSTRAK............................................. 126

PRODUKSI BIOMASSA SECARA IN VITRO PADA................................................................. 135

ISOLASI DAN KARAKTERISASI NATRIUM ALGINAT DARI............................................... 145

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL............................................................. 154

KUMPULAN MAKALAH LENGKAP KATEGORI FARMAKOLOGI FARMASI ................... 161

EFEK JUS WORTEL (Daucus carota L.) UNTUK MENURUNKAN KADAR

KOLESTEROL TOTAL PADA MARMUT (Cavia cobaya) ................................................ 162

EFEK SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG TANJUNG (Mimusopsi

cortex) TERHADAP SEL T47D .............................................................................................. 168

PEMAKAIAN NSAIDS PADA SEBUAH APOTEK DI MEDAN, INDONESIA:

MASALAH TERAPI OBAT.................................................................................................... 174

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 11


PENGETAHUAN HIPERTENSI PADA MAHASIWA FARMASI YANG MENGIKUTI

PHARMACY UPDATE 5 .......................................................................................................... 182

MASALAH TERKAIT PENGGUNAAN OBAT (MTPO) DITINJAU DARI SEGI

INTERAKSI OBAT: SEBUAH STUDI KASUS PADA PENDERITA DIABETES

MELITUS TIPE 2 (DM TIPE 2) DENGAN PENYULIT HIPERTENSI................................ 188

PROFIL KINERJA PRAKTIK FARMASI KOMUNITAS/APOTEK ........................................... 209

EFEK EKSTRAK RIMPANG TEMULAWAK (CURCUMA XANTHORRHIZA ROXB.)

TERHADAP PENURUNAN KONTRAKSI OTOT POLOS ILEUM TIKUS

(RATTUS NOVERGICUS) JANTAN TERISOLASI SECARA IN VITRO ............................ 219

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIFITAS SALEP EKSTRAK ETANOL DAUN

JARAK TINTIR(Jatropha multifida L. )SEBAGAI OBAT LUKA BUATAN YANG

DIINFEKSI PADA KULIT MARMUT JANTAN (Cavia cobaya)......................................... 227

EFEK PENYEMBUHAN LUKA PADA MARMUT DARI MEMBRAN ALGINAT-

KITOSAN DAN KALSIUM ALGINAT KITOSAN............................................................... 235

UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.)

TERHADAP SEL T47D............................................................................................................. 28

PENGARUH EKSTRAK ETANOL RIMPANG TEMU MANGGA ........................................ 30

UJI EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH MERAH............................................................... 29

EFEK EKSTRAK ETANOL MAJAKANI (Quercus infectoria G. Olivier) TERHADAP

RESPON IMUN SELULER MENCIT..................................................................................... xxx

UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK ETANOL DAUN AFRIKA (Vernonia

amygdalina Del.) TERHADAP TIKUS JANTAN GALUR WISTAR........................................ v

UJI EFEK EKSTRAK ETANOL BIJI JENGKOL (Pithecellobium lobatum Benth.)

TERHADAP PENURUNAN KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS PUTIH

JANTAN GALUR WISTAR YANG DIINDUKSI ALOKSAN.................................................. 6

UJI ANTIDIARE EKSTRAK ETANOL MAJAKANI PUTIH (Quercus infectoria G.

Olivier) DENGAN METODE TRANSIT INTESTINAL PADA TIKUS .................................. iv

PENGUJIAN EFEK ANTIDIARE...................................................................................................... 7

UJI EFEK HIPOGLIKEMIK NATRIUM ALGINAT DARI RUMPUT LAUT Sargassum

ilicifolium (Turner) C.Agardh TERHADAP TIKUS PUTIH JANTAN GALUR

WISTAR YANG DIINDUKSI ALOKSAN............................................................................... 13

EFEK PEMBERIAN MONOSODIUM GLUTAMAT ( MSG ) TERHADAP

TERBENTUKNYA MIKRONUKLEUS PADA SEL DARAH MERAH MENCIT ................ 21

UJI AKTIVITAS ANTIMIELOSUPRESI EKSTRAK ETANOL RIMPANG TEMU

MANGGA (Curcuma mangga Valeton & v.Zijp.) PADA MENCIT JANTAN YANG

DIINDUKSI DENGAN SIKLOFOSFAMIDA ............................................................................ 2

KUMPULAN MAKALAH LENGKAP KATEGORI KIMIA FARMASI .................................. 9

PENURUNAN RESIDU PESTISIDA PADA TOMAT DENGAN METODE

PENCUCIAN.............................................................................................................................. 10

AKRILAMID DALAM MINYAK GORENG BEKAS.................................................................... 20

PENETAPAN KADAR PROTEIN DAN NON PROTEIN NITROGEN (NPN) PADA

ULAT KIDU (RHYNCHOPHORUS FERRUGINEUS) DAN ................................................... 34

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 12


PEMANFAATAN HEMISELULOSA TONGKOL JAGUNG SEBAGAI .................................... 42

ANALISIS KOMPOSISI ASAM LEMAK DAN IDENTIFIKASI POSISI ASAM

LAURAT DALAM MINYAK KELAPA MURNI ..................................................................... iv

PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN

NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA

TINGGI......................................................................................................................................... 1

PENGARUH INTERESTERIFIKASI LEMAK SAPI........................................................................ 3

PENETAPAN KADAR MERKURI, KROMIUM DAN TEMBAGA PADA KERANG DI

PERAIRAN BELAWAN SECARA SPEKTROFOTOMETRI SERAPAN ATOM ................. 15

ANALISIS KANDUNGAN MINERAL KALIUM, NATRIUM, DAN MANGAN PADA

CACING TANAH Peryonix sp SECARA SPEKTROFOTOMETRI SERAPAN

ATOM......................................................................................................................................... 23

PENGEMBANGAN METODE PENETAPAN KADAR BAHAN PEMANIS,

PENGAWET, DAN KAFEIN DALAM PRODUK MINUMAN RINGAN

BERKARBONASI DENGAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI ....................... 32

SIFAT ANTIBAKTERI DARI HASIL HIDROLISIS MINYAK KELAPA MURNI

TERHADAP BAKTERI PATOGEN DAN PROBIOTIK ......................................................... 47

PENETAPAN KADAR SEFADROKSIL DALAM SEDIAAN KAPSUL ...................................... 57

IDENTIFIKASI ASAM LEMAK PALMITAT PADA ...................................................................... 1

KAJIAN HARA TANAH (pH, C-organik, N dan P) PADA LAHAN KEBUN KELAPA

SAWIT PT. PANGKATAN INDONESIA YANG DIAPLIKASIKAN LIMBAH

CAIR PABRIK KELAPA SAWIT............................................................................................. 5

PENGEMBANGAN METODE KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

SPEKTROMETRI MASSA UNTUK PENETAPAN KADAR RIFAMPISIN,

ISONIAZID DALAM SEDIAAN TABLET................................................................................ 2

PENENTUAN GOLONGAN SENYAWA KIMIA YANG MEMBERIKAN EFEK

ANTIDIABETES DARI EKSTRAK KELOPAK BUNGA ROSELA (Hibiscus

sabdariffa L.) ................................................................................................................................ 2

PENENTUAN KADAR VITAMIN C PADA KERIPIK KENTANG TERHADAP LAMA

PENYIMPANAN DAN KONDISI KEMASAN DENGAN METODE TITRASI

IODOMETRI .............................................................................................................................. 18

KUMPULAN MAKALAH LENGKAP BIDANG TEKNOLOGI FARMASI ............................ 1

PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN PANDAN WANGI (Pandanus amaryllifolius Roxb)

SEBAGAI PEWARNA RAMBUT DALAM SEDIAAN KRIM................................................. 2

FORMULASI BENTUK SEDIAAN SACHET NATA DE COCO YANG ........................................ 2

PRAPERLAKUAN VITAMIN C TERHADAP ............................................................................... 17

BIOAVAILABILITAS KLOMIPRAMIN ........................................................................................ 17

PENGGUNAAN SERBUK BIJI ALPUKAT (Persea gratissima Gaertn) DALAM

FORMULA PEWARNA RAMBUT .......................................................................................... 26

UJI AKTIVITAS DAN DAN DAYA PELEMBAB ........................................................................... 6

PENGGUNAAN ZAT WARNA KAYU SECANG ........................................................................... 1

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 13


FORMULASI SEDIAAN LIPSTIK MENGGUNAKAN .................................................................. 5

FORMULASI ORALLY DISINTEGRATING TABLET (ODT) METOKLOPRAMIDA HCL

METODE FREEZE DRYING ...................................................................................................... iv

FORMULASI ORALY DISINTEGRATING TABLET (ODT) METOKLOPRAMIDA HCL

MENGGUNAKAN KROSPOVIDON DAN AC-DI-SOL DENGAN METODE

CETAK LANGSUNG .................................................................................................................. 4

PENGGUNAAN HASIL MODIFIKASI FISIKA............................................................................. 13

PENGARUH KONSENTRASI PATI DAN PH TERHADAP ......................................................... 21

PEMANFAATAN PATI JAGUNG HASIL ISOLASI ..................................................................... 29

OPTIMASI FORMULA SEDIAAN TABLET HANCUR DI MULUT

METOKLOPRAMID DENGAN EKSIPIEN SARI TAPE PADAT, CORN STARCH

DAN AVICEL ............................................................................................................................. 35

PENGARUH PENAMBAHAN ASAM TARTRAT TERHADAP PENINGKATAN

NILAI SPF (SUN PROTECTING FACTOR) SEDIAAN TABIR SURYA

KOMBINASI OKSIBENZON DAN OKTILMETOKSISINAMAT......................................... 53

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 135


B16

PRODUKSI BIOMASSA SECARA IN VITRO PADAPEGAGAN (Centella asiatica)

Noverita Sprinse Vinolina

Fakultas Pertanian Universitas Sisingamangaraja XII Medan

ABSTRAK

Penggunaan tumbuhan sebagai obat, berkaitan dengan kandungan kimia yang terdapat dalam

tumbuhan tersebut terutama zat bioaktif. Tanpa adanya suatu senyawa bioaktif dalam tumbuhan

secara umum tumbuhan itu tidak dapat digunakan sebagai obat. Senyawa bioaktif yang terdapat

dalam pegagan merupakan senyawa metabolik sekunder centellosida dan lain-lain. Media terbaik

untuk induksi kalus dari daun adalah: [MS + IAA (2 mg/L) + Kn (0,2 mg/L); MS + IBA (0,1 mg/L)

+ BA (2 mg/L) dan MS + NAA (2 mg/L) + BA (2 mg/L)]. Ketiga media digunakan untuk

menginduksi kalus-kalus dari eksplan tangkai daun tetapi bahan ini terbukti kurang efektif untuk

induksi eksplan dari daun. Pada media [MS + IAA (2 mg/L) + Kn (0,2 mg/L)], induksi kalus baik

tetapi pertumbuhannya sedikit. Pada media [MS + IBA (0,1 mg/L) + BA (2 mg/L)] dan [MS +

NAA (2 mg/L) + BA (2 mg/L)] diamati pembentukan kalus yang subur. Pada media dengan NAA,

IAA dan IBA akan dihasilkan kalus-kalus yang keras dan kompak, yang tidak diinginkan.

Sebaliknya, media yang mengandung 2,4-D (1 mg/L) dengan kombinasi Kn (0,1 mg/L) akan

dihasilkan kalus-kalus yang remah, tapi pertumbuhan yang signifikan tidak diinduksi, dan ketika

digunakan Kn 1 mg/L tidak ada induksi kalus. Centellosida yang terbanyak dalam kultur kalus

adalah madekakosida dan asiatikosida. Jika pada media digabungkan NAA dan BA maka

kandungan dari kedua centellosida ini sama. Kandungan dalam kalus kira-kira sepuluh kali lebih

rendah daripada tanaman in vitro, kandungannya berkisar antara 1,3-2,5 mg/g berat kering setelah

elisitasi. Kandungan asiatikosida pada tanaman in vitro dilaporkan sekitar 50% lebih rendah

daripada tanaman yang tumbuh di lapangan.

Kata kunci: Produksi biomassa, in vitro, centellosida, pegagan

PENDAHULUAN

Pegagan (Centella asiatica)

merupakan tanaman liar yang banyak tumbuh

di perkebunan, ladang, tepi jalan, pematang

sawah ataupun di ladang yang agak basah.

Tanaman ini berasal dari daerah Asia tropik,

tersebar di Asia Tenggara, termasuk

Indonesia, India, Tiongkok, Jepang dan

Australia kemudian menyebar ke berbagai

negara-negara lain. Nama yang biasa dikenal

untuk tanaman ini selain pegagan adalah daun

kaki kuda dan antanan.

Pegagan (Centella asiaticaI (L)

Urban) telah lama dimanfaatkan sebagai obat

tradisional baik dalam bentuk bahan segar,

kering maupun yang sudah dalam bentuk

ramuan (jamu). Di Australia telah dibuat obat

dengan nama ―Gotu Kola‖ yang bermanfaat

sebagai anti pikun dan juga sebagai anti

stress. Di Indonesia pegagan telah banyak

dimanfaatkan sebagai obat untuk

penyembuhan penyakit HIV melalui

peningkatan ketahanan tubuh pasien. Secara

empirik, pegagan bermanfaat sebagai

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 136


penyembuh luka, radang, reumatik, asma,

wasir, tuberkulosis, lepra, disentri, demam

dan penambah selera makan. Di Cina,

pegagan bermanfaat untuk memperlancar

sirkulasi darah, bahkan dianggap lebih

bermanfaat dibandingkan dengan ginkgo

biloba atau ginseng yang berasal dari Korea.

Senyawa bioaktif Centella asiatica

adalah triterpenoid saponin dan sapogenin

dengan kerangka ursane yaitu asiatikosida dan

madekasosida yang sangat menarik, demikian

juga asam madecassic dan asam asiatik.

Asiatikosida dapat mempercepat proses

penyembuhan luka dan berguna dalam

pengobatan kusta dan TBC, sementara

madekasosida memiliki sifat antiinflamatory

dan secara signifikan mampu meningkatkan

sekresi kolagen III. Pegagan berasa manis,

bersifat mendinginkan, memiliki fungsi

membersihkan darah, melancarkan peredaran

darah, peluruh kencing (diuretika), penurun

panas (antipiretika), menghentikan

pendarahan (haermostatika), meningkatkan

syaraf memori, anti bakteri, tonik, antispasma,

antiinflamasi, hipotensis, insektisida,

antialergi dan stimulan. Saponin yang ada

menghambat produksi jaringan bekas luka

yang berlebihan (menghambat terjadinya

keloid).

Karena sifatnya sebagai obat, minat

pada tanaman ini telah meningkat beberapa

tahun belakangan dan termasuk dalam studi

literatur yang menggambarkan produksi

triterpenoid saponin pada berbagai bagian

tanaman pada berbagai tanaman dan juga

dalam kultur suspensi. Dengan demikian

pegagan merupakan tumbuhan yang sangat

bermanfaat untuk kehidupan.

Bertitik tolak dari ini maka penulis

tertarik dan ingin mengetahui produksi

biomassa secara in vitro pada pegagan.

Penelitian Kultur Teknis Dan Efek

Farmakologis Pegagan

Penelitian yang bertujuan untuk

menghasilkan bahan pemuliaan yang akan

dimanfaatkan untuk pembentukan varietas

unggul, perlu dilakukan karakterisasi dan

evaluasi pada kondisi Iingkungan yang sesuai,

dengan teknik budidaya yang mampu

mendukung munculnya nomor nomor aksesi

dengan potensi genetik yang optimal.

1. Studi Keragaman Pegagan (Centella

asiatica L. (Urban.) Berdasarkan

Karakter Morfologi dan Agronomi

Melalui Percobaan Lapang

Hasil penelitian Studi Keragaman

Pegagan (Centella asiatica L (Urban.)

Berdasarkan Karakter Morfologi dan

Agronomi Melalui Percobaan Lapang

menunjukkan bahwa jenis aksesi nyata

mempengaruhi semua peubah

pertumbuhan. Artinya aksesi yang ada

mempunyai Keragaman pertumbuhan

yang berbeda. Dari hasil analisa diperoleh

bahwa 8 aksesi memiliki kadar

asiatikosida di atas rata-rata, yaitu aksesi

Bengkulu , Malaysia, Ciwidey, Smukren,

Boyolali , Karanganyar, Cilember, dan

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 137


Smugrim (0,72; 0,80; 0,77; 0,67; 0,91;

0,68; 0,77 dan 0,81 %).

2. Studi Keragaman Pegagan (Centella

asiatica L. (Urban.) Melalui

Pendekatan Molekuler

Hasil penelitian Studi Keragaman

Pegagan (Centella asiatica L. (Urban.)

melalui Pendekatan Molekuler

menunjukkan bahwa isolasi DNA untuk

pegagan telah berhasil yang ditunjukkan

dari hasil elektroforesis. Untuk

mendapatkan DNA yang berkualitas

sebaiknya ekstraksi diambil dari

sampel daun muda, dan waktu

pengambilannya sebelum matahari

terbit. Dari 22 primer (10-mer) yang

digunakan untuk mengamplifikasi DNA

bulk terdapat tujuh primer yang mampu

menghasilkan produk amplifikasi, yaitu:

OPE-15, OPE-19, OPE-20, OPH-05,OPH-

19, OPM-l2 dan OPM-24.Dari 18 aksesi

pegagan yang dianalisis berdasarkan

penanda RAPD pada tingkat kesamaan

0,73 terdapat 6 kelompok, yaitu (1)

Cibodas, Cianjur, Sumedang, Cicurug,

Bali, Karanganyar, Smugrim; (2)

Cilember, (3) Malaysia; (4) Majalengka,

Smukren, Boyalali; (5) Banjaran,

Bengkulu, Majalengka, Ungaran,

Ciwidey; (6) Manoko.

3. Tanggap Tanaman Pegagan (Centella

asiatica L (Urban.) dari Berbagai

Ketinggian, Naungan dan Aksesi

terhadap Pertumbuhan dan Produksi

Triterpenoid dan Asiatikosida

Sedangkan pada penelitian Tanggap

Tanaman Pegagan (Centella asiatica L

(Urban.) dari Berbagai Ketinggian,

Naungan dan Aksesi terhadap

Pertumbuhan dan Produksi Triterpenoid

dan Asiatikosida telah diperoleh 5 aksesi

dengan kandungan asiatikosida tinggi

(Boyolali, Smugrim, Malaysia, Ciwidey,

dan Cilember).

4. Tanggap Tanaman Pegagan (Centella

asiatica L. (Urban.) dari Berbagai

Ketinggian Tempat dan Pemupukan P,

dan Waktu Panen terhadap

Pertumbuhan dan Produksi

Triterpenoid dan Asiatikosida.

Penelitian ini menunjukkan bahwa di

dataran tinggi pada umur 2 bulan di tanah

Andosol, pemupukan P terhadap

pertumbuhan tanaman pegagan hanya

nyata mempengaruhi panjang tangkai

bunga induk. Pemberian pupuk P

menurunkan panjang tangkai bunga induk

. Pemupukan P nyata mempengaruhi

warna daun. Pemberian pupuk P

semakin meningkatkan nilai warna

daun Pemupukan P nyata

mempengaruhi tangkai daun, sulur

daun, bobot panen, dan kandungan

asiatikosida. Pemberian pupuk P

semakin meningkatkan bobot tangkai

daun, sulur daun, bobot panen, dan

kandungan asiatikosida. Bobot panen

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 138


tertinggi diperoleh pada perlakuan 72 kg

P205/ha, tetapi kandungan asiatikosida

tertinggi diperoleh pada perlakuan 36 kg

P205/ha. Sedangkan di dataran rendah

pada umur 2 bulan di tanah Latosol,

pemupukan P terhadap pertumbuhan

tanaman pegagan hanya nyata

mempengaruhi jumlah daun per

tanaman, panjang tangkai daun,

panjang sulur, dan panjang tangkai

bunga induk. Pemberian pupuk P

menurunkan jumlah daun, panjang

sulur, dan panjang tangkai bunga

induk, tetapi meningkatkan panjang

tangkai daun. Pemupukan P tidak nyata

mempengaruhi warna daun. Pemupukan P

nyata memengaruhi sulur daun, bobot

panen, dan kandungan asiatiksia tetapi

tidak nyata mempengaruhi bobot daun dan

tangkai daun. Pemberian pupuk P semakin

meningkatkan bobot sulur daun. Bobot

panen tertinggi diperoleh pada perlakuan

108 kg P205/ha, tetapi kandungan

asiatikosida tertinggi diperoleh pada 36 kg

P205/ha. Di dataran tinggi produksi

tanaman pegagan lebih rendah , tetapi

kandungan asiatikosida lebih tinggi

dibandingkan dataran rendah

(Ghulamahdi, M., Sandra Arifin Aziz dan

Nurliani Bermawie, 2007).

Triterpen Saponin pada Pegagan

Penggunaan tumbuhan sebagai obat,

berkaitan dengan kandungan kimia yang

terdapat dalam tumbuhan tersebut terutama

zat bioaktif. Tanpa adanya suatu senyawa

bioaktif dalam tumbuhan secara umum

tumbuhan itu tidak dapat digunakan sebagai

obat. Senyawa bioaktif yang terdapat dalam

tumbuhan biasanya merupakan senyawa

metabolik sekunder seperti alkaloid,

flavonoid, steroid, terpenoid, saponin dan

lain-lain.

Senyawa Terpen

Senyawa terpen, pada awalnya

merupakan suatu golongan senyawa yang

hanya terdiri dari atom C dan H, dengan

perbandingan 5 : 8 dengan rumus empiris

C5H8 (unit isoprena), yang bergabung secara

head to tail (kepala ekor). Oleh sebab itu

senyawa terpen lazim disebut isoprenoid.

Terpen dapat mengandung dua, tiga atau lebih

suatu isoprena. Molekul-molekulnya dapat

berupa rantai terbuka atau siklik. Mereka

dapat mengandung ikatan rangkap, gugus

hidroksil, gugus karbonil atau gugus

fungsional lain. Struktur mirip yang

mengandung unsur-unsur lain disamping C

dan H disebut terpenoid. Dewasa ini baik

terpen maupun terpenoid dikelompokkan

sebagai senyawa terpenoid (isoprenoid).

Biosintesis terpen adalah kondensasi

ester secara enzimatik dari porsil-porsil asetil

dari asetilkoenzime A. Zat antara dalam

pembentukan terpen adalah pirofosfat

(difosfat) dari asam mevalonat dan sepasang

isopenteril alkohol.

Saponin merupakan senyawa glikosida

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 139


kompleks yaitu senyawa hasil kondensasi

suatu gula dengan suatu senyawa hidroksil

organik yang apabila dihidrolisis akan

menghasilkan gula (glikon) dan non-gula

(aglikon). Saponin ini terdiri dari dua

kelompok : saponin triterpenoid dan saponin

steroid. Saponin banyak digunakan dalam

kehidupan manusia, salah satunya banyak

terdapat dalam letak yang dapat digunakan

untuk bahan pencuci kain (batik) dan sebagai

shampo. Saponin dapat diperoleh dari

tumbuhan melalui metoda ekstraksi. Hasil

penelitian yang telah dilakukan, disimpulkan

tumbuhan pegagan (Centella asiatica)

mengandung alkaloid, flavonoid, senyawa

terpen dan steroid.

Struktur terpenoid yang bermacam

ragam itu timbul sebagai akibat dari reaksi-

reaksi sekunder berikutnya seperti hidrolisa,

isomerisasi, oksidasi, reduksi dan siklisasi

atas geranil-, farnesil -- dan geranil-geranil

pirofosfat. Lebih dari 4000 jenis triterpenoid

telah diisolasi dengan lebih dari 40 jenis

kerangka dasar yang sudah dikenal dan pada

prinsipnya merupakan proses siklisasi dari

skualen.

Biosintesis

Centellosida adalah senyawa

triterpenoid yang dibiosintesis melalui yang

jalur mevalonate dalam sitoplasma, (lihat

Gambar 1). Biosintesisnya dapat dibagi dalam

tiga tahap:

1. Sintesis prekursor universal dari

semua terpenoid, isopentenyl

difosfat (IPP).

2. Sintesis pertama triterpene, squalene.

3. Sintesis Centellosida.

Gambar 1. Biosintesis triterpen saponin

(Mangas et al., 2008)

Keterangan: SQS = squalene synthase, CYS

= cycloartenol synthase, βAS = β-amyrin

synthase

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 140


Pada Gambar 2 dapat dilihat struktur kimia

dari triterpen pentasiklik, R1 = H

(asiatikosida) atau OH (untuk madekasosida),

R2= glucose-glukose-rhamnose (Aziz et al.,

2007).

Gambar 2. Hubungan antara sterol dan

triterpen saponin pada Centella asiatica

Baru-baru ini, Kim et al. (dalam

Mangas, et. al, 2009) telah mengkloning

beberapa gen yangterlibat dalam jalur

biosintesis dari triterpenoid saponin dalam C.

asiatica, -amyrin sintase (CabAs), seperti

cycloartenol sintase (CaCYS), squalene

sintase (CaSQS) dan farnesyl difosfat sintase.

Dalam konteks ini, data kuantitatif ekspresi

gen ini dapat memberikan wawasan keaktifan

dan ketidak aktifan gen serta pengaturan gen-

gen dalam jalur biosintetik C. asiatica.

Para penulis ini menunjukkan bahwa

tingkat perkembangan mRNA CabAS pada

daun mencapai puncaknya di usia 2-3

minggu dan menurun setelah 4 minggu. Akan

tetapi, meskipun terjadi penurunan tingkat

mRNA CabAS, kandungan asiatikosida daun

meningkat dari waktu ke waktu. Untuk

menjelaskan hal ini hubungan terbalik antara

tingkat mRNA CabAS dan kandungan

saponin dalam jaringan, telah diusulkan

bahwa triterpene aglycones bertindak sebagai

komponen struktural membrane selama

pertumbuhan dan perkembangan tanaman.

Oleh karena itu, karena jumlah transkrip

CabAS meningkat pada awal tahap

perkembangan daun C. asiatica, diperkirakan

bahwa CabAS mungkin memainkan peran

dalam mensintesis komponen struktural

membran. Penulis juga telah menentukan

bahwa jasmonate metil 0.1mM cukup untuk

meningkatkan mRNA CabAS dan t CaSQS

dan dengan demikian akan kandungan

triterpene saponin.

Produksi Triterpen Saponin Pegagan

Secara In Vitro

Media Untuk Mendapatkan Kalus yang Besar

dan Remah

Sebelum membentuk kultur

suspensi sel, perlu untuk mendapatkan

biomassa yang baik dari kultur kalus yang

remah. Berdasarkan beberapa penelitian,

pengaturan pertumbuhan akan berbeda

dalam medium MS yang diuji untuk

memperoleh kalus-kalus dari eksplan

daun dan tangkai daun. Eksplan dari daun

muda dan petioles itu disterilisasi dan

dikulturkan dalam media MS yang

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 141


mengandung kombinasi konsentrasi

auksin dan sitokinin yang berbeda

(Table2). Media yang diuji untuk induksi

kalus ditulis dengan huruf miring dalam

Tabel 2. Eksplan diinkubasi dalam gelap

pada suhu 25 º C dalam cawan petri.

Kalus-kalus mulai tumbuh setelah

dua minggu dan telah dikembangkan pada

minggu keempat. Induksi persentase

kalus-kalus dari daun eksplan pada media

diuji seperti yang tertera pada Tabel 2.

Tabel 2. Induksi dan morfologi dari

eksplan C. asiatica dalam medium MS

a. PGR: pengatur pertumbuhan tanaman,

IAA: indoleacetic acid; 2,4-D: 2,4-asam

asetat dichlorophenoxy; IBA: indole-3 - -

naphtaleneacetic asam; KIN: kinetin; BA:

6-benzyladenine; 4PU-30: N-(2-cloro-4 -

asam butirat; NAA: piridil)-N '-

fenilurea.

b. Data mewakili rata 20 bereplikasi /

menengah dalam dua mengulangi

eksperimen. Italic: Media diuji untuk

induksi kalus (Mangas et al., 2009)

Media terbaik untuk induksi kalus

dari daun adalah: [MS + IAA (2 mg/L) +

Kn (0,2 mg/L); MS + IBA (0,1 mg/L) +

BA (2 mg/L) dan MS + NAA (2 mg/L) +

BA (2 mg/L)]. Ketiga media digunakan

untuk menginduksi kalus-kalus dari

eksplan tangkai daun tetapi bahan ini

terbukti kurang efektif untuk induksi

eksplan dari daun. Pada media [MS + IAA

(2 mg/L) + Kn (0,2 mg/L)], induksi kalus

baik tetapi pertumbuhannya sedikit. Pada

media [MS + IBA (0,1 mg/L) + BA (2

mg/L)] dan [MS + NAA (2 mg/L) + BA

(2 mg/L)] diamati pembentukan kalus

yang subur. Pada media dengan NAA,

IAA dan IBA akan dihasilkan kalus-kalus

yang keras dan kompak, yang tidak

diinginkan. Sebaliknya, media yang

mengandung 2,4-D (1 mg/L) dengan

kombinasi Kn (0,1 mg/L) akan dihasilkan

kalus-kalus yang remah, tapi pertumbuhan

yang signifikan tidak diinduksi, dan ketika

digunakan Kn 1 mg/L tidak ada induksi

kalus.

Induksi jaringan kalus bertujuan

untuk mendapatkan kalus-kalus yang

besar, putih dan remah. Ketiga media

yang dipilih untuk induksi yang diuji

adalah [MS + NAA (2 mg/L) + BA (2

mg/L)] dan [MS + IAA (2 mg/L) + Kn

(0,2 mg / L)] akan terbentuk Kalus-kalus

yang kompak dan tanpa pertumbuhan

yang signifikan, bila menggunakan media

yang mengandung BA dalam kombinasi

dengan NAA. Pada media dengan [MS +

IBA (0,1 mg/L) + BA (2 mg/L)] untuk

multiplikasi in vitro C. asiatica, kalus-

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 142


kalus berwarna putih, besar tapi tidak

remah. Peneliti juga menggunakan ketiga

media ini dengan 1/2 MS garam, di mana

kalus-kalus lebih putih tapi

pertumbuhannya tetap sama dan tetap

tidak remah.

Peneliti mengamati bahwa

pertumbuhan yang lebih besar dengan

mengunakan IBA dibandingkan dengan

auksin (IAA, NAA, 2,4-D), untuk

memperoleh kalus-kalus yang remah, dan

mengubah sitokinin BA menjadi N-(2-

cloro-4-piridil)-N '-phenilurea (4PU-30)

pada konsentrasi yang berbeda. Telah

dilaporkan bahwa sitokinin yang berasal

dari phenylurea merupakan sumplemen

yang terbaik untuk mendukung

pertumbuhan tajuk pada C. asiatica, dan

dalam penelitian sebelumnya dengan

kultur kalus tembakau peneliti mengamati

bahwa 4PU-30 berkembang menjadi

kalus-kalus yang besar dan remah.

Dengan pengecualian media [MS + IBA

(0,1 mg/L) + 4PU-30 (0,2 mg/L)],

konsentrasi 4PU-30 yang lain diuji (1, 2

dan 3 mg/L) dan memberikan

pertumbuhan yang baik, walaupun dalam

tidak ditembukan induksi kalus yang tidak

remah.

Sebelumnya diperoleh kalus-kalus

yang remah dengan menggunakan 2,4-D

(2 mg/L), diputuskan untuk

menggunakannya sebagai pengganti

auksin IBA, mempertahankan kinetin

4PU-30 (3 mg/L). Hasilnya, medium MS

+ 2,4-D (2 mg/L) + 4PU-30 (3 mg/L),

adalah medium yang optimal untuk

mendapatkan kalus-kalus yang besar,

putih dan remah (Gambar 3). Saat ini

penelitian yang sedang dikembangkan di

laboratorium bertujuan untuk

meningkatkan produksi triterpen saponin

dengan kultur suspensi sel C. asiatica.

Gambar 3. Aspek keremahan kalus-kalus yang diperoleh dengan 2,4-D (2 mg / L) + 4PU-

30 (3 mg/L) sebelum pembentukan kultur suspensi sel (Mangas et al., 2009).

Pola Centellosida pada Kalus dan Tanaman In

Vitro

Kandungan madekasosida,

asiatikosida, asam asiatik dan asam

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 143


madekasik pada kultur kalus dalam medium

MS dengan regulator pertumbuhan yang

berbeda ditunjukkan pada Gambar 4. Angka

ini menunjukkan bahwa centellosides yang

terbanyak dalam kultur kalus adalah

madekakosida dan asiatikosida. Jika pada

media digabungkan NAA dan BA maka

kandungan dari kedua centellosides ini sama.

Kandungan dalam kalus kira-kira

sepuluh kali lebih rendah daripada tanaman

in vitro, kandungannya berkisar antara 1,3-

2,5 mg/g berat kering setelah elisitasi

(Gambar 5). Ini mungkin kelihatannya rendah

tetapi, sebagaimana disebutkan sebelumnya,

kandungan asiatikosida pada tanaman in vitro

dilaporkan sekitar 50% lebih rendah daripada

tanaman yang tumbuh di lapangan.

Gambar 4. Kandungan triterpen saponin dalam kalus Centella asiatica (mg/g berat kering) M

: madekasosida A : asiatikosida MA : asam madekasik AA : asam asiatik

(Mangas et al., 2009)

Gambar 5. Kandungan centellosida tertinggi dan terendah pada kalus (C), bagian tajuk

tanaman (AP) dan akar (R) tanaman C. asiatica in vitro (mg/g berat kering) MeJa

= Metil Jasmonat (Mangas et al., 2009)

t a hun

IAI

ISBN 978-602-8892-72-8 144


DAFTAR PUSTAKA

Achmad. S.A, 1986, Kimia Organik Bahan

Alam, Universitas Terbuka, Jakarta.

Ahmad, Fasihuddin dan Hasmah Raji, 1993,

Kimia Hasilan Semula Jadi dan

Tumbuhan Ubatan, Dewan Bahasa

dan Pustaka Kementerian Pendidikan

Malaysia, Kuala Lumpur.

Aziz,Z.A, M.R. Davey, J.B.Power, P.

Anthony, R.M.Smith and K.C.Lowe.

2007. Production of asiatikosida

and madekasosida in Centella asitica

in vitro and in vivo. Plant Sciences

Division, School of Biosciences,

University of Nottingham,UK.

Biologia Plantarum 51(1): 34-42.

Darwis.D. 2001, Teknik Isolasi dan

Karakterisasi Senyawa Metabolit

Sekunder, Workshop Peningkatan

Sumber Daya Manusia Untuk

Pemanfaatan Sumber Daya Alam

Hayati dan Rekayasa Bioteknologi,

FMIPA Universitas Andalas Padang.

Duke.J, 2005, Phytochemical and

Etnobotanical Databases, Maryland,

Beltsuille Agricultural Researah

Center.

Fessenden & fessenden. 1982. Kimia Organik

Jilid II. Jakarta : Erlangga.

Ghulamahdi, M., Sandra Arifin Aziz dan

Nurliani Bermawie. 2007. Evaluasi

Karakter Morfologi Fisiologi dan

Genetik Pegagan Mendukung

Standarisasi Mutu Pegagan. Lab Balai

Besar dan Pengembangan Pasca

Panen, Lab PSPT IPB, Lab Pusat

Studi Biofarmaka IPB Lab Tanah IPB.

Hart, Harold. 1990. Kimia Organik. Jakarta :

Erlangga

Harborne.J.B, 1987, Metode Fitokimia,

Penuntun Modern Menganalisa

Tumbuhan, terbitan ke-2, Terjemahan

Kosasih Padmawinata dan Iwang

Soediro, ITB Bandung.

Januwati, Mariam dan M. Yusron. Budidaya

Tanaman Pegagan. Balai penelitian

dan Pengembangan Pertanian. Balai

Penelitian Tanaman Obat dan

Aromatika.

Koesniobari, Soendoro. 1965. Apotik Hijau.

Surabaya : Fakultas Kedokteran

Universitas Air Langga

Makin. H.L, 1977, Biochemistry of Steroids

Hormones, London, Nlack Well

Scientific Oxford Ikan. R, 1991,

Natural Products to Laboratory Guide,

2nd

edition, University of Jerusalem.

Mannito.P, 1981, Biosynthesis of Natural

Products, Terjemahan PG Sammes,

Chicster Ellis Horwood Ltd.

Mangas, S., Merce, Bonfill, Lidia Osuna,

Elisabeth Moyano, Jaime Tortoriello,

Rosa M. Cusido, M. Teresa Pin˜ol,

Javier Palazo´n The efect of methyl

jasmonate on triterpene and sterol

metabolisms of Centella asiatica,

Ruscus aculeatus and Galphimia

glauca cultured plants.

Phytochemistry 67 (2006) 2041-2049.

Mangas, S., Elisabeth Moyano, Lidia Osuna,

Rosa M. Cusido, Mercedes

Bonfill, Javier Palazo. 2008. Triterpenoid

Saponin Content and The Expression

Level of Some Related Genes In Calli

of Centella asiatica. Lett 30:1853-

1859.

Mangas S., Moyano E., Hernandez-Vazquez

L. and Bonfill M. 2009. Centella

asiatica (L) Urban: An Updated

Approach Terpenoids. Editors: Javier

Palazón and Rosa M. Cusidó

1Laboratorio de Fisiología Vegetal,

Facultad de Farmacia, Universidad de

Barcelona, 08028 Barcelona, Spain.

Departament de Ciencies

Experimentals.

ISBN 978-602-8892-72-8 tahun Seminar Nasional Farmasi...

Documents

Transcript of ISBN 978-602-8892-72-8 tahun Seminar Nasional Farmasi...