INDUKSI KALUS Agave sisalana DENGAN MENGGUNAKAN...
Transcript of INDUKSI KALUS Agave sisalana DENGAN MENGGUNAKAN...
INDUKSI KALUS Agave sisalana DENGAN MENGGUNAKAN
KINETIN DAN 2,4-D ( 2,4-Dichlorophenoxyacetic Acid )
SECARA IN VITRO
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan
Mencapai Derajat Sarjana S1
Jurusan Agronomi
Diajukan Oleh :
SISKA PRAMUDYA ANGRAENI
Nim. 201410200311062
PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI
JURUSAN AGRONOMI
FAKULTAS PERTANIAN PETERNAKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
MALANG
2018
ii
iii
iv
v
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan pada tanggal 19 Juli 1996, sebagai
putri pertama dari dua bersaudara. Ayahanda bernama Kusnan
dan Ibunda Sriwahyuni. Penulis menyelesaikan
pendidikan Sekolah Dasar di SDN Sidomulyo 03 Batu pada
tahun 2008, kemudian melanjutkan ke jenjang Sekolah Menengah Pertama di
SMP Negeri 01 Batu lulus tahun 2011, dan masuk Sekolah Menengah Atas SMA
Negeri 01 Batu lulus tahun 2014.
Penulis melanjutkan pendidikan di Program Studi Agroteknologi, Jurusan
Agronomi, Fakultas Pertanian Peternakan, Universitas Muhammadiyah Malang
pada tahun 2014. Semasa perkuliahan penulis aktif pada beberapa kegiatan
kampus, diantaranya adalah sebagai asisten Laboratorium Agronomi pada tahun
2016, anggota muda Himpunan Mahasiswa Jurusan Agronomi (HIMAGRO) pada
periode 2014 – 2015, dan sekretaris bidang kewirausahaan sosial Himpunan
Mahasiswa Jurusan Agronomi (HIMAGRO) pada periode 2015 – 2016.
vi
PERSEMBAHAN
Skripsi ini saya persembahkan :
Sebagai bentuk rasa syukur kepada Allah SWT atas berkat rahmatNya
akhirnya penulis dapat menyelesaikan Skripsi dengan judul “Induksi Kalus
Agave sisalana dengan Menggunakan Kombinasi Kinetin dan 2,4 D (2,4-
Dichlorophenoxyacetic Acid) Secara In Vitro”.
Sebagai rasa hormat dan ucapan terima kasih kepada Ibu Fatimah
Nursandi dan Ibu Erny Ishartati, dan segenap dosen-dosen Agronomi yang
telah membimbing serta memberikan ilmu pengetahuan yang bermanfaat
dengan keikhlasan dan kesabaran.
Sebagai tanda bakti, hormat dan rasa terimakasih yang tiada tara
dipersembahkan kepada Ayahanda, Ibunda, dan adik tercinta yang telah
memberikan doa, kasih sayang, segala dukungan baik moril maupun
materil, dan cinta kasih yang tiada terhingga.
Teruntuk Mas Agus, Indri, Sinta, Mas Deni, Para Miss, Partner
seperjuangan Tim Agave Uma dan Ziza, Bu Prapti, Bu Rina, Pak Joko,
Pak Udin, Dina, Vita, Agnes, Tim Apel, Mas Reca, Mbak Dinar, Mbak
Nisa, Mbak Vebri serta sahabat-sahabat yang tidak dapat disebutkan satu
persatu, terimakasih atas bantuan ilmu, nasihat, semangat, dukungan dan
kebersamaannya selama ini.
vii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Warahmatullohi Wabarakatuh
Syukur Alhamdulillah penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas
limpahan rahmat dan hidayahNya, sehingga penulis mampu menyelesaikan
laporan penelitian dengan judul “Induksi Kalus Agave sisalana dengan
Menggunakan Kombinasi Kinetin dan 2,4 D (2,4-Dichlorophenoxyacetic Acid)
Secara In Vitro”. Laporan penelitian ini merupakan salah satu persyaratan untuk
menyelesaikan pendidikan tingkat Sarjana pada Jurusan Agronomi, Fakultas
Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih atas segala
bantuan baik berupa tenaga dan pikiran, kepada yang terhormat :
1. Dr. Ir. Fatimah Nursandi, MSi. dan Dr. Ir. Erny Ishartati, MP. sebagai
pembimbing saya yang telah bersedia membimbing dengan sabar dan
mengarahkan selama penyusunan skripsi ini hingga selesai.
2. Ir. Dyah Titi Muhardini, MP. dan Dr. Ir. Muhidin, MSi. sebagai penguji yang
telah banyak membantu penulis dan dengan sabar membimbing dan
mendampingi pada proses penyempurnaan skripsi ini hingga selesai.
3. Ir. Sufianto, MM. dan Agus Dwi Sulistyono, SSi, MSi, yang telah
memberikan bimbingan analisis data skripsi penelitian.
4. Laboratorium Kultur Jaringan Balai Penelitian Tanaman Pemanis dan Serat
yang telah membantu dengan memberikan planlet Agave sisalana sebagai
bahan penelitian skripsi.
5. Teman-teman Tim Lab MAI, teman – teman Agronomi angkatan 2014 yang
selama ini membantu dalam pelaksanaan penelitian ini hingga selesai.
Akhir kata, penulis menyadari bahwa laporan penelitian ini masih jauh dari
kesempurnaan. Penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang bersifat
membangun demi sempurnanya penulisan skripsi ini. Semoga bermanfaat.
Wassalamu’alaikum Warahmatullohi Wabarakatuh
Malang, 20 Juli 2018 Penulis
viii
DAFTAR ISI
SKRIPSI .................................................................................................................. ii
HALAMAN PERSETUJUAN ............................................................................... iii
SURAT PERNYATAAN....................................................................................... iv
RIWAYAT HIDUP ................................................................................................. v
PERSEMBAHAN .................................................................................................. vi
KATA PENGANTAR .......................................................................................... vii
DAFTAR ISI ........................................................................................................ viii
DAFTAR TABEL ................................................................................................... x
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii
RINGKASAN ...................................................................................................... xiii
I. PENDAHULUAN ........................................................................................... 1
1.1. Latar Belakang ......................................................................................... 1
1.2. Rumusan Masalah .................................................................................... 2
1.3. Tujuan Penelitian ...................................................................................... 3
1.4. Hipotesis Penelitian .................................................................................. 3
II. TINJAUAN PUSTAKA .................................................................................. 4
2.1. Tanaman Agave sisalana ...................................................................... 4
2.2. Induksi Kalus Agave sisalana ............................................................... 7
2.3. Pengaruh Kinetin dan 2,4 D Pada Induksi Kalus Agave sisalana ........ 9
III. BAHAN DAN METODE ............................................................................... 11
3.1. Tempat dan Waktu ................................................................................. 11
ix
3.2. Alat dan Bahan ....................................................................................... 11
3.3. Rancangan Penelitian ............................................................................. 11
3.4. Pelaksanaan Penelitian ........................................................................... 13
3.5. Parameter Pengamatan ........................................................................... 16
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................................... 18
4.1. Hasil ........................................................................................................ 18
4.1.1. Saat Inisiasi ..................................................................................... 18
4.1.2. Saat Berkalus ................................................................................... 18
4.1.3. Tekstur Kalus .................................................................................. 20
4.1.4. Warna Kalus .................................................................................... 21
4.1.5. Pencoklatan Kalus ........................................................................... 24
4.1.6. Hasil Pengamatan Mikroskopis ...................................................... 25
4.2. Pembahasan ............................................................................................ 29
V. KESIMPULAN ................................................................................................ 38
5.1. Kesimpulan ............................................................................................. 38
5.2. Saran ....................................................................................................... 38
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 39
LAMPIRAN .......................................................................................................... 43
x
DAFTAR TABEL
No Tabel Hal
1. Skoring Warna Munsell ............................................................................ 16
2. Saat Inisiasi Eksplan (hsi) Agave sisalana ............................................... 18
3. Eksplan Saat Berkalus (hsi) Agave sisalana ............................................ 19
4. Rerata tekstur kalus Agave sisalana umur 4 msi pada perlakuan komposisi ZPT Kinetin dan 2,4 D ........................................... 20
5. Rerata Warna Kalus Agave sisalana umur 4 MSI pada perlakuan komposisi ZPT Kinetin dan 2,4 D ......................................... 23
6. Rerata Pencoklatan Kalus Agave sisalana umur 2 MSI, 3
MSI, 4 MSI pada perlakuan komposisi ZPT Kinetin dan 2,4 D .............. 25
xi
DAFTAR GAMBAR
No Gambar Hal
1. Denah Percobaan ..................................................................................... 12
2. Tekstur Kalus .......................................................................................... 21 3. Notasi Warna Kalus ................................................................................ 24
4. Kalus Kompak pada Pengamatan Menggunakan Kamera DSLR
dan Mikroskop Digital ............................................................................ 26
5. Kalus Remah pada Pengamatan Menggunakan Kamera DSLR dan Mikroskop Digital ........................................................................... 26
6. Penampang Melintang Kalus Umur 4 MSI dengan perlakuan
komposisi kinetin 3,5 ppm + 2,4 D 1 ppm ............................................. 27 7. Penampang Melintang Kalus Umur 4 MSI dengan perlakuan
komposisi kinetin 3,5 ppm + 2,4 D 1 ppm .............................................. 28 8. Penampang melintang daun Agave sisalana ........................................... 28
9. Proses pembentukan kalus Agave sisalana ............................................. 35
10. Senyawa fenol pada Agave sisalana ....................................................... 35
xii
DAFTAR LAMPIRAN
No Lampiran Hal
1. Analisis Ragam Saat Inisiasi Eksplan ..................................................... 43
2. Analisis Ragam Saat Berkalus Eksplan .................................................. 43 3. Analisis Ragam Tekstur Kalus Kompak Agave sisalana........................ 44
4. Analisis Ragam Tekstur Kalus Remah Agave sisalana .......................... 44
5. Analisis Ragam Pencoklatan Kalus 2 MSI Agave sisalana .................... 45
6. Analisis Ragam Pencoklatan Kalus 3 MSI Agave sisalana .................... 45
7. Analisis Ragam Pencoklatan Kalus 4 MSI Agave sisalana .................... 46
8. Komposisi Media MS ............................................................................. 47
9. Dokumentasi ........................................................................................... 48
39
DAFTAR PUSTAKA
Abarca, Norma A., E.A.D. Alvarado, J.A.A. Reyes, J. N. U. Soto, and L.S.G.
Valdes. 2013. The Phenols of The Genus Agave (Agaveceae). Journal of
Biomaterials and Nanobiotechnology. 4 (1) : 9 - 16
Admojo, Lestari, A. Indrianto, dan H. Adi. 2014. Perkembangan Penelitian
Induksi Kalus Embriogenik Pada Jaringan Vegetatif Tanaman Karet
Klonal (Hevea brasiliensis Muell. Arg). Jurnal Warta Perkaretan. 33 (1) :
19 – 28.
Alitalia, Yayu. 2008. Pengaruh Pemberian BAP dan NAA terhadap Pertumbuhan
dan Perkembangan Tunas Mikro Kantong Semar (Nepenthes mirabilis)
Secara In Vitro. Skripsi. Program Studi Hortikultura Fakultas Pertanian
Institut Pertanian Bogor.
Arum, S. Wulandari, dan S.S. Nasution. 2014. Pengaruh Bahan Sterilan terhadap
Keberhasilan Inisiasi Eksplan Paulownia (Paulownia elongata SY Hu)
secara In Vitro. Jurnal Silvikultur Tropika. 5 (1): 1 – 6.
Astutik. 2007. Kajian Zat Pengatur Tumbuh Dalam Pengembangan Kultur
Jaringan Krisan. Jurnal Buana Sains. 7 (2): 113 – 121.
Blunden, George, and Yi yi. 1973. The Comparative Leaf Anatomy of Agave,
Beschorneria, Doryanthes, and Furcaea Species (Agave : Agaveceae).
Botanical Journal. 66 (1) : 157 - 179
BPS. 2016. Tingkat Produktivitas Tanaman Tahun 2016. Diakses dari
http://www.bps.go.id. Pada tanggal 15 Mei 2017.
Carneiro, F. dos Santos, S. R. O. D. Queiroz, A. R. Passos, M. N. D. Nascimento,
and K. S. D. Santos. 2014. Embriogênese somática em Agave sisalana
Perrine: indução, caracterização anatômica e regeneração. Jurnal Pesq.
Agropec. Trop., Goiânia. 44 (3) : 294-303
Dwi, Widiastoety, S. Kartikaningrum, dan Purbadi. 2005. Pengaruh pH Media
terhadap Pertumbuhan Plantlet Anggrek Dendrobium. Jurnal Horti. 15 (1)
: 18 - 21
DynaGro. 2018. Chlorine Benefits to Plants. Diakses dari https://dyna-
gro.com/chlorine-benefits-to-plants-2/. Pada tanggal 29 Juni 2018
Evans, David, J. Coleman, and A. Kearns. 2003. Plant Cell Culture, Bio Scientific
Publishers, New York.
40
Fatmawati, Ayu. 2008. Kajian konsentrasi BAP dan 2,4-D terhadap induksi kalus
tanaman Artemisia annua L. Secara in vitro. Skripsi Fakultas Pertanian
UNS . Surakarta.
Fitrianti, Alia. 2006. Efektivitas Asam 2,4-Diklorofenoksiasetat (2,4- D) Dan
Kinetin Pada Medium Ms Dalam Induksi Kalus Sambiloto Dengan
Eksplan Potongan. Skripsi. Universitas Negeri Semarang.
Franceschi, Vincent, and P. Nakata. 2005. Calcium Oxalate in Plants: Formation
and Function. Jurnal Annual Review Plant Biology. 56 (1) : 46-48
Hazra, Sudipta Kapoor, S. Das, and A.K. Das. 2002. Sisal plant regeneration via
organogenesis. Plant Cell Tissue Organ Journal. Vol 70(3): 235-240.
Hutami, Sri. 2008. Masalah Pencoklatan Pada Kultur Jaringan. Jurnal
AgroBiogen. 4 (2): 83 – 88.
Indah, Putri Nur, dan D. Ermavitalini. 2013. Induksi Kalus Daun Nyamplung
(Calophyllum inophyllum Linn.) pada Beberapa Kombinasi Konsentrasi 6-
Benzylaminopurine (BAP) dan 2,4-Dichlorophenoxyacetic Acid (2,4-D).
Jurnal Sains dan Seni Pomits. 2(1): E1-E6.
ITIS. 2017. Taxonomic hierarchy of sisal (Agave sisalana). Diakses dari
https://www.itis.gov/servlet/SingleRpt/SingleRpt?search_topic=TSN&sear
ch_value=182694#null. Pada tanggal 28 Agustus 2017.
Karyadi, Soedarmo. 2005. Budidaya Agave. Yogyakarta.: Penerbit Kanisius.
Kasi, P. Destinugrainy, dan Sumaryono. 2008. Perkembangan Kalus Embriogenik
Sagu (Metroxylon sagu Rottb.) Pada Tiga Sistem Kultur in vitro. Jurnal
Menara Perkebunan. 76 (1) : 1-10.
Laukkanen, Hanna, H. Haggman, S.K. Soppela, and A. Hohtola. 1999. Tissue
browning of in vitro cultures of Scots pine: Role of peroxidase and
polyphenol oxidase. Physiology Plant. 106(3):337-343
Lizawati. 2012. Induksi Kalus Embriogenik Dari Eksplan Tunas Apikal Tanaman
Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Dengan Penggunaan 2,4 D dan TDZ.
Jurnal Bioplante. 1 (2) : 75-87.
Manuhara. 2001. Pengaruh manipulasi media terhadap kandungan alkaloid
vinkristin kalus daun Catharanthus roseus (L.) G. Don. Jurnal Berkala
Penelitian Hayati. 1(1) : 1-7.
Mawarni, Retno Indah. 2016. Multiplikasi Kalus Beberapa Varietas Apel Pada
Media Dengankomposisi Zat Pengatur Tumbuh Yang Berbeda. Skripsi.
Universitas Muhammadiyah Malang.
41
Nugraheni, S. Dwi dan M. Murianingrum. 2003. Pengembangan Agave (Agave
sisalana) Di Madura. Balittas. 1 (1) : 1 – 6
Nugroho, Hartanto. 2012. Struktur dan perkembangan tumbuhan. Jakarta :
Penebar Swadaya
Pierik. 1987. In Vitro Culture of higher Plants. Martinus Nijhoff Publisher.
London. 207 p.
Ramawat. 1999. Secondary Plant Product in Nature in Biotechnology Secondary
Metabolites. U.S.A: Science Publisher, inc. pp: 11-37.
Ridhawati, T.D.A. Anggraeni, R.D. Purwati. 2017. Pengaruh Komposisi Media
Terhadap Induksi Tunas dan Akar Lima Genotipe Tanaman Agave Pada
Kultur In Vitro. Buletin Tanaman Tembakau, Serat & Minyak Industri. 9(1)
: 1-9
Santoso, Budi. 2009. Peluang Pengembangan Agave Sebagai Sumber Serat Alam.
Jurnal Perspektif. 8 (2) : 84-95
Sari, Rizkia, 2012. Pengaruh Berbagai Bagian Benih Sebagai Sumber Eksplan
dengan Umur Kecambah Enam Hari Terhadap Induksi Embrio Somatik
Dua Varietas Kacang Tanah (Arachis hypogea Liin.). Skripsi. Universitas
Negeri Lampung. Lampung
University Of West Indies. 2011. Support Tissue Agave sisalana. Diakses dari.
http://sta.uwi.edu/fst/lifesciences/bl11f/IMAGES/Support%20Tissue%20C
/01%20Agave%20fibers.html. Pada tanggal 28 Agustus 2017.
Sujatno, Agus, R. Salam, Bandriyana, A. Dimyati. 2015. Studi Scanning Electron
Microscopy (SEM) untuk Karakterisasi Proses Oxidasi Paduan Zirkonium.
Jurnal Forum Nuklir (JFN). 9 (2) :44-50
Turhan, Hatice. 2004. Callus Induction And Growth In Transgenic Potato
Genotype. Africa Journal of Biotechnology. 3 (8) : 375-378
Wardatutthoiyyibah, R. S. Wulandari, dan H. Darwati. 2015. Penambahan Auksin
Dan Sitokinin Terhadap Pertumbuhan Tunas Dan Akar Gaharu (Aquilaria
Malaccensis Lamk) Secara In Vitro. Jurnal Hutan Lestari. 3 (1) : 43-45
Wattimena, dan Mattjik. 1992. Pemuliaan tanaman secara in vitro. Dalam Tim
Laboratorium Kultur Jaringan (Ed.). Bioteknologi Tanaman. PAU
Bioteknologi, Institut Pertanian Bogor.
Wulansari, Setia Dewi. 1988. Percobaan Penumbuhan Kalus Agave amanuensis
Trell. Dan Nowell Serta Deteksi Steroidnya. Skripsi, Universitas Airlangga :
Surabaya
42
Yeintitis, dan T.E. Komar. 2010. Upaya Induksi Kalus Embriogenik Dari
Potongan Daun Ramin. Bogor : Indonesia’s Work Programme For 2008
ITTO CITES Project, Kementerian Kehutanan, Indonesia
Yudhanto, Ferriawan. 2010. Pengaruh Perlakuan Alkali Pada Serat Agave dan
Ketebalan Inti Terhadap Kekuatan Bending Komposit Sandwich Serat
Agave-Polyester dengan Inti Kayu Olahan (Engineering Wood). Jurnal
Penelitian UMY. 1 (1) : 1-12