Haemato-imunologi dan histo-arsitektur perubahan Labeo rohita benih: efek aflatoksin makanan dan cetakan inhibitor

Abstrak Sebuah jejak memberi makan 60 hari dilakukan untuk menggambarkan pengaruh aflatoksin diet (AFB1) dengan atau tanpa suplementasi campuran cetakan inhibitor (0,25% minyak cengkeh? 0,32% natrium propionat) pada hematologi, aktivitas ledakan pernapasan dan histologi Labeo rohita benih. Tiga ratus enam puluh ikan (rata-rata berat. 1,48-1,54 g) secara acak didistribusikan ke dalam delapan kelompok perlakuan. Delapan diet eksperimental dengan empat tingkatan yang berbeda aflatoksin (0, 10, 20 dan 40 ppb) dengan atau tanpa cetakan inhibitor disiapkan. Parameter hematologis seperti protein serum total, albumin, globulin dan A: G ratio secara signifikan (P \ 0,05) dikurangi dengan peningkatan tingkat aflatoxin dalam makanan. Namun, suplementasi cetakan inhibitor menunjukkan nilai ditingkatkan bila dibandingkan dengan non-dilengkapi bagian counter menunjukkan efek ameliorating cetakan inhibitor pada aflatoksin. Total jumlah leukosit lebih tinggi pada kelompok aflatoksin yang diobati. Pengamatan histologi yang melengkapi parameter hematologis. Kegiatan meledak pernapasan secara signifikan (P \ 0,05) menurun pada kelompok aflatoksin yang diobati lebih tinggi tetapi tidak terpengaruh secara signifikan (P [0,05) karena masuknya inhibitor sendiri dan / atau interaksi tingkat aflatoksin dan inhibitor dalam makanan. Dari penelitian ini, disimpulkan bahwa hingga 20 ppb tingkat aflatoxin dalam makanan parameter Haemato-imunologi dilindungi.

Pengenalan Mycotoxin kontaminasi pakan Ternak merupakan masalah di seluruh Utama Dunia. Kontaminasi pakan Dan Pangan Artikel Baru mikotoksin mungkin Hasil Bahasa Dari penyimpanan sampai / atau penanganan Produk Panen Yang regular tidak Pantas. Di ANTARA mikotoksin, aflatoksin, metabolit toksik Produk Bahasa Dari Aspergillus flavus Dan A. parasiticus menjadi perhatian aquaculturists * Bagi Besar KARENA mereka mempengaruhi BAIK HEWAN Dan Kesehatan manusia (Bullerman 1986). Aflatoksin B1 (AFB1) dikenal memucat sering * Semua aflatoksin Dalam, MAKANAN Yang terkontaminasi (IARC 1993; Kennedy et al.

1998; Hussein dan Brasel 2001) dan paling ampuh menunjukkan karakteristik karsinogenik dan mutagenik pada sejumlah hewan (Alpert et al. 1971). Banyak penelitian telah dilakukan berfokus pada karsinogenik, mutagenik dan hepatotoksik efek aflatoksin (Hussein dan Brasel 2001). Beberapa tanda-tanda patologis yang diamati karena mikotoksin dalam ikan dikurangi pertumbuhan, hati yang rusak dan organ tubuh lainnya, imunosupresi dan peningkatan mortalitas. Selain efek beracun ini, pakan mikotoksin terkontaminasi bahkan dapat mengakibatkan kerugian ekonomi yang signifikan dalam hal miskin rasio konversi pakan, pertambahan bobot badan berkurang, penolakan pakan dan kerentanan penyakit (CAST 1989).

Kerentanan ikan untuk aflatoksin diet bervariasi. Trouts dilaporkan paling sensitif terhadap aflatoxicosis (CAST 1989). Coho salmon (Onchorhyncus kisutch), Chinook salmon (Onchorhyncus tschawytscha) dan sockeye salmon (Onchorhyncus nerka) relatif kurang sensitif terhadap aflatoksin dari rainbow trout (Hendricks dan Bailey 1989). Namun, ikan air hangat seperti ikan lele yang dilaporkan kurang peka terhadap aflatoksin (Lovell 1989). Hendricks (1994) melaporkan bahwa hati adalah organ yang paling rentan terhadap AFB1 cedera pada ikan. Pekerja lain telah mengamati efek

imunosupresif dari AFB1. El-Enbaawy et al. (1994) telah diamati mengurangi aktivitas fagosit makrofag di ikan nila yang disuntik dengan 0,5 mg / kg aflatoksin. Penekanan aktivitas bakterisidal serum, fungsi neutrofil, respon dan globulin tingkat imun humoral setelah terpapar aflatoksin kronis Rohu (Labeo rohita) menunjukkan pentingnya aflatoksin sebagai kontaminan ampuh pakan (Sahoo dan Mukherjee 2002).

Perubahan patologis seperti nekrosis, fibrosis dan lymphocytolysis dalam hati dan organ lainnya telah diamati karena paparan aflatoksin pada spesies yang berbeda dari ikan (Ashley 1965; Sato et al 1973;. Ghittino 1976; Lovell 1989; Jantrarotai dan Lovell 1990; Cha'vez- Sa'nchez et al 1994;. Hendricks 1994). Mild untuk menyelesaikan kerusakan parenkim hati, nekrosis hemoragik dan kerusakan nuklir ditandai telah dijelaskan oleh Halver (1969) karena aflatoxicosis. Respon patologis untuk aflatoksin telah dilaporkan dalam nila, Serotherodon spirulus spirulus (Haller dan Roberts 1980). Menjaga dalam pandangan ini efek samping dari mikotoksin dalam pakan, beberapa strategi telah disarankan oleh peneliti untuk mencegah pertumbuhan jamur ini, seperti pencantuman herbal tertentu senyawa dan asam organik. Di antara senyawa herbal, minyak cengkeh di tingkat inklusi 0,5% dilaporkan telah benar-benar menghambat pertumbuhan jamur (Gowda et al. 2003). Neem minyak sebesar 0,5% juga dilaporkan memiliki aktivitas antijamur moderat (Gowda et al. 2003). Di antara senyawa kimia, penghambatan lengkap pertumbuhan jamur dan biosintesis aflatoksin dilaporkan pada masuknya 0,5% asam propionat dilaporkan oleh Ghosh et al. (1996). El-Far et al. (1992) melaporkan penghambatan lengkap pertumbuhan flavus dan produksi aflatoksin A. pada tingkat inklusi 0,64% natrium propionat. Meskipun inhibitor cetakan ini memeriksa pertumbuhan jamur tetapi efeknya pada parameter-immuno fisiologis ikan perlu diteliti secara mendalam.

Meskipun minyak dan natrium propionat cengkeh dalam isolasi memiliki aktivitas antijamur tetapi efek gabungan mereka belum pernah dicoba seperti yang muncul untuk menjadi sinergis. Dalam studi ini, kami telah memilih campuran 0,25% minyak cengkeh dan 0,32% natrium propionat inklusi dari studi screening awal sebagai adsorben untuk menghambat pertumbuhan jamur. Oleh karena itu, tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh menghambat campuran ini pada parameter Haemato-imunologi bersama dengan beberapa perubahan histologis di Labeo rohita benih.

Bahan dan metode situs Eksperimental Penelitian dilakukan selama 60 hari di Nutrisi Ikan dan Biokimia pembagian Central Institute of Education Perikanan (CIFE), Mumbai, India. Tank-tank eksperimental dipertahankan di laboratorium basah divisi Aquaculture, dan analisis biokimia dilakukan di Divisi Biokimia Nutrisi dan masing-masing. Benih hewan percobaan dari Labeo rohita (Hamilton) yang diperoleh dari Powerkheda Fish Farm (Madhya Pradesh, India), Central Institute of Education Perikanan, Mumbai. Saham tersebut diaklimatisasi pada kondisi aerasi selama 25 hari sebelum awal percobaan. Suhu air, pH, oksigen terlarut, karbon dioksida bebas, kekerasan karbonat, amonia-N, nitrit-N dan nitrat-N tercatat berikut APHA (1998) pada setiap interval 15 hari selama periode eksperimental dan dipertahankan dalam kisaran yang cocok.

Produksi Aflatoksin Aspergillus flavus (MTCC: 277) yang diperoleh dari Mikroba Type Culture Collection dan Gene Bank, Chandigarh, India. Budaya Aspergillus flavus dilakukan dalam medium pertumbuhan 117 [Komposisi Czapek Yeast Extract Agar (CYA): Czapek berkonsentrasi 10,0 ml, K2HPO4, Yeast Extract 5.0 g, Sukrosa 30,0 g, 15,0 g Agar dan suling air 1,0 L] dalam kondisi aerobik pada suhu 30_C selama 7 hari. Subkultur strain jamur dilakukan selama 30 hari. Aflatoxin diproduksi oleh Aspergillus flavus yang tumbuh pada bungkil kedelai

selama 7 hari. Kemudian, kandungan aflatoksin diukur dengan menggunakan fluorometer (VICAM4, BBI-Sumber Ilmiah, USA).

Cetakan inhibitor Percobaan awal dilakukan untuk menyaring kombinasi yang tepat dari minyak cengkeh dan natrium propionat untuk pengendalian yang efektif pertumbuhan Aspergillus. Kombinasi terbaik dari 0,25% minyak cengkeh dan 0,32% natrium propionat digunakan sebagai adsorben untuk penghambatan pertumbuhan jamur dan karenanya pengurangan produksi aflatoksin. Desain eksperimental Percobaan faktorial (2 level 9 4 dosis) dilakukan dengan tiga ratus enam puluh benih Labeo rohita didistribusikan dalam delapan kelompok eksperimental, dalam rangkap tiga. Lima belas ikan (rata-rata berat. 1,48-1,54 g) ditebar dalam tangki plastik (150 L) dengan air sumur bor bebas klorin dan ditutupi dengan tutup berlubang. Delapan diet eksperimental dengan empat tingkatan yang berbeda aflatoksin (0, 10, 20 dan 40 ppb) dengan atau tanpa inhibitor cetakan (minyak cengkeh 0,25%? 0,32% natrium propionat) yang diumpankan ke kelompok masing-masing. Setiap diet diberi makan dua kali sehari (08:00 dan 18:00 h) untuk pemuas jelas selama 60 hari.

Persiapan Diet Delapan diet percobaan yang berbeda disiapkan. Tepung ikan (114 g / kg pakan) dan bungkil kedelai (420 g / kgpakan) digunakan sebagai sumber protein, sedangkan minyak bunga matahari (40 g / kg pakan) dan cod liver oil (40 g / kg pakan) yang digunakan sebagai sumber lipid dan dedak gandum (110 g / kg pakan), beras polish (130 g / kg pakan) dan tepung jagung (100 g / kg pakan) sebagai sumber karbohidrat. Karboksimetil selulosa (10 g / kg pakan) digunakan sebagai pengikat. Semua bahan kecuali bungkil kedelai, campuran vitamin mineral, vitamin C, vitamin B kompleks, minyak, BHT dan glisin dicampur dalam lebar mulut wadah plastik besar. Kemudian, jumlah yang dibutuhkan aflatoksin terkontaminasi bungkil kedelai ditambahkan menggantikan jumlah yang sama dari bungkil kedelai sehingga untuk mendapatkan 10, 20 dan 40 tingkat ppb aflatoksin dalam pakan. Dalam diet, T2, T3 dan T4 bungkil kedelai mengandung kadar aflatoksin yang diinginkan ditambahkan sebelum tekanan memasak di 15 psi selama 15 menit untuk pembentukan adonan. Tekanan memasak dilakukan untuk memeriksa pertumbuhan lebih lanjut dari jamur, dengan demikian, hanya mempertahankan konsentrasi yang diinginkan aflatoksin dalam makanan. Namun, dalam perawatan T6, T7 dan T8, aflatoksin terkontaminasi bungkil kedelai bersama dengan adsorben (0,25% minyak cengkeh dan 0,32% natrium propionat) ditambahkan setelah memasak tekanan dan pembentukan adonan dengan bahan-bahan lainnya. Perlakuan, T1 disiapkan tanpa penambahan aflatoksin terkontaminasi bungkil kedelai, dan pengobatan, T5 juga dibuat dengan cara yang sama seperti T1, tetapi dengan masuknya tambahan dari jumlah yang sama dari adsorben (0,25% minyak cengkeh dan 0,32% natrium propionat). Campuran vitamin mineral (30 g / kg pakan), vitamin C (1 g / kg pakan), vitamin B kompleks (pakan 1 g / kg), minyak (pakan 80 g / kg), BHT (2 g / kg pakan) dan glisin (2 g / kg pakan) dicampur setelah pendinginan adonan disiapkan dalam semua delapan diet eksperimental. Diet yang disimpan di 4_C sampai digunakan

Pengumpulan darah Pada akhir percobaan makan, sembilan ikan dari masing-masing kelompok (tiga dari masing-masing ulangan) dibius dengan minyak cengkeh (50 ll-L 1), dan darah dikumpulkan dari ekor vena menggunakan jarum suntik medis, yang sebelumnya dibilas dengan 2,7% etilen diamin tetraacetic (EDTA) solusi. Darah kemudian dipindahkan segera ke tabung Eppendorf yang berisi sejumput bubuk EDTA (sebagai antikoagulan) dan dikocok perlahan. Darah ini digunakan untuk penentuan kadar hemoglobin, jumlah eritrosit dan angka leukosit dan NBT assay. Untuk serum, tiga ikan dari masing-masing kelompok dibius, dan darah dikumpulkan tanpa antikoagulan dan dibiarkan

menggumpal selama 2 jam, disentrifugasi (30009g selama 5 menit) dan kemudian disimpan di -20 derajat C sampai digunakan

Parameter hematologis Sel darah merah (RBC) dan sel-sel darah putih (WBC) menipiskan cairan yang digunakan untuk menentukan jumlah eritrosit dan leukosit dihitung. Hal itu dilakukan dengan mencampurkan 20 ll darah dengan 3980 ll sesuai menipiskan cairan dalam tabung reaksi yang bersih. Jumlah sel dilakukan menggunakan Neubauer yang menghitung ruang. Tingkat hemoglobin darah dianalisis mengikuti metode cyanmethaemoglobin menggunakan Drabkins Fluid (Qualigens Diagnostics). Absorbansi diukur menggunakan spektrofotometer pada 540 nm, dan konsentrasi akhir dihitung dengan membandingkan dengan standar cyanmethaemoglobin (Qualigens Diagnostics). Konsentrasi hemoglobin kemudian dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut: hemoglobin (g / dl) = [OD (T) / OD (S)] 9 [251/1000] 9 60 dimana OD (T) adalah absorbansi tes, OD (S) adalah absorbansi standar. Protein serum diperkirakan dengan metode Biuret (Reinhold 1953) menggunakan kit (total protein dan albumin kit, Qualigens Diagnostics, Glaxo SmithKline). Albumin diperkirakan dengan metode mengikat hijau Bromocresol (Doumass et al. 1971). Absorbansi standar dan uji diukur terhadap kosong dalam spektrofotometer pada 630 nm. Globulin dihitung dengan mengurangkan nilai albumin dari total protein serum. A / G ratio dihitung dengan membagi nilai albumin oleh nilai-nilai globulin.

Kegiatan meledak pernapasan Kegiatan ledakan pernapasan dari fagosit dilakukan dengan tetrazolium nitroblue (NBT) assay mengikuti metode Secombes (1990), kemudian dimodifikasi oleh Stasiack dan Bauman (1996). Darah (50 ll) ditempatkan ke dalam sumur U bawah piring microtitre dan diinkubasi pada37_C selama 1 jam untuk memungkinkan adhesi sel. Kemudian, supernatan telah dihapus, dan sumur dicuci tiga kali dalam PBS. Setelah mencuci, 50 ll dari 0,2% NBT ditambahkan dan diinkubasi selama lebih 1 jam. Sel-sel kemudian tetap dengan 100% metanol selama 2-3 menit dan dicuci tiga kali dengan 30% metanol. Lempeng airdried, dan 60 ll 2 N kalium hidroksida dan 70 ll dimetil sulfoksida ditambahkan ke setiap sumur. OD (optical density) tercatat dalam sebuah reader ELISA (l Quant, Bio-Tek Instrumen INC, USA) pada 540 nm. Histopatologi Hati ikan, ginjal, insang dan usus irisan segera diperbaiki dalam formalin netral-buffered, tertanam dalam lilin parafin, dipotong pada 5 lm, dan diwarnai dengan hematoksilin dan eosin (H & E) seperti yang dijelaskan oleh Roberts (1989). Slide Disiapkan diperiksa dan difoto di bawah mikroskop cahaya.

Analisis statistik efek utama tingkat aflatoksin dan cetakan inhibitor dianalisis dengan analisis dua arah varians (ANOVA). Perbandingan antara dua perlakuan dilakukan dengan Multiple Range Test Duncan (DMRT). Perbandingan dibuat pada tingkat probabilitas 5%. Data dianalisis secara statistik dengan paket statistik SPSS versi 14. Hasil Inklusi tingkat aflatoksin yang berbeda dalam diet secara signifikan (P \ 0,01) mempengaruhi jumlah eritrosit dihitung dengan nilai tertinggi yang tercatat dalam kelompok T1 (2,81 ± 0,01 9 106cells/ll ) (Tabel 1). Jumlah total eritrosit menurun secara signifikan (P \ 0,05) dengan semakin tingginya tingkat aflatoksin. Suplementasi cetakan inhibitor dipamerkan lebih tinggi (P \ 0,05) jumlah eritrosit daripada mitranya non-suplemen. Pengaruh interaksi yang signifikan (P \ 0,01) cetakan inhibitor dan tingkat aflatoksin juga diamati pada jumlah eritrosit, nilai tertinggi berada dalam kelompok T5 (Tabel 1). Jumlah total leukosit secara signifikan (P \ 0,01) terpengaruh karena efek interaksi cetakan inhibitor dan tingkat aflatoksin. Nilai tertinggi (117.00 ± 1.01 9 103 sel / ll) dari jumlah total leukosit diamati pada kelompok T1, yang secara signifikan berbeda dari semua kelompok lain. Secara umum, kandungan hemoglobin dari inhibitor

ditambah kelompok cetakan secara signifikan lebih tinggi (P \ 0,01) bila dibandingkan dengan mereka yang non-ditambah

Tabel 1 tingkat aflatoksin, inhibitor dan interaksi mereka pada jumlah total eritrosit (RBC), jumlah total leukosit (WBC), jumlah hemoglobin dan nitroblue tetrazolium (NBT) benih L. rohita makan dengan diet percobaan yang berbeda

* P \ 0,05, ** P \ 0,01, NS Non-signifikan (Data dinyatakan sebagai mean ± SE pengukuran rangkap tiga) Nilai rataan dalam kolom di bawah setiap kategori bantalan superscript yang sama tidak berbeda secara signifikan (P \ 0,05) Satuan: RBC- 9106 sel / ll, sel WBC-9103 / ll, Haemoglobin-g/dl, NBT-A620

counterpart. Pengaruh interaksi yang signifikan (P \ 0,05) cetakan inhibitor dan tingkat aflatoksin pada konten hemoglobin darah tercatat, nilai tertinggi berada dalam kelompok T5 (Tabel 1). Protein total serum, albumin, globulin dan rasio A / G secara signifikan (P \ 0,05) dikurangi dengan peningkatan tingkat tingkat aflatoksin dalam diet (Tabel 2). Kelompok Mould inhibitor dilengkapi menunjukkan signifikan (P \ 0,05) nilai yang lebih tinggi dari protein serum total, albumin dan globulin nilai bila dibandingkan dengan kelompok-kelompok, yang tidak dilengkapi dengan cetakan inhibitor. Interaksi yang nyata (P \ 0,05) pengaruh cetakan inhibitor dan tingkat aflatoksin pada protein serum total, albumin dan globulin juga diamati. Nilai tertinggi protein serum total dan albumin ditemukan pada kelompok T5. Nilai tertinggi globulin diamati pada T5 diikuti oleh kelompok T7. Serum albumin untuk rasio globulin (A / G rasio) tidak signifikan (P [0,05) terpengaruh karena adanya inhibitor dan / atau efek interaksi cetakan inhibitor dan aflatoxin dalam makanan. Kegiatan meledak pernapasan (NBT nilai Reduction) neutrofil dari Labeo rohita remaja dari kelompok eksperimen berbeda disajikan pada Tabel 1. Ada pengaruh yang signifikan (P \ 0,05) dari tingkat aflatoksin dalam makanan pada aktivitas meledak pernapasan. Kegiatan meledak pernapasan dipamerkan penurunan aktivitas dengan peningkatan tingkat tingkat aflatoksin dalam makanan. Tidak ada pengaruh signifikan dari cetakan inhibitor dan / atau interaksi tingkat aflatoksin dan jamur

inhibitor aktivitas meledak pernapasan. Setelah 60 hari percobaan makan, tidak ada perubahan histologis ditemukan di hati, ginjal, insang dan usus ikan eksperimental diberi makan dengan diet yang mengandung 0 dan 10 ppb tingkat aflatoksin dengan / tanpa inhibitor cetakan. Histologi hati dari kelompok T4 (40 ppb aflatoksin) menunjukkan edema ringan (Gambar 1). Itu

Tabel 2 tingkat aflatoksin, inhibitor dan interaksi mereka pada total protein serum, albumin, globulin (g%) dan albumin untuk globulin rasio benih L. rohita makan dengan diet percobaan yang berbeda

** P \ 0,01, NS Non-signifikan (Data dinyatakan sebagai mean ± SE pengukuran rangkap tiga) Nilai rataan dalam kolom di bawah setiap kategori bantalan superscript yang sama tidak berbeda secara signifikan (P \ 0,05) Satuan: g%

jaringan hati dari T8 (40 ppb aflatoksin dengan cetakan inhibitor) menunjukkan hepatosit bengkak bersama dengan sinusoid terbatas (Gambar 2). Jaringan hati dari sisa kelompok perlakuan tidak menunjukkan perubahan yang signifikan dari penampilan normal. Histologi jaringan ginjal dari kelompok T3 menunjukkan pendarahan ringan (Gambar 3). Spread pendarahan lebar tampak dari jaringan ginjal kelompok T4 dengan akumulasi massa homogen dalam tubulus di beberapa tempat (Gambar 4). Sisa dari kelompok tidak menunjukkan perubahan yang signifikan dari penampilan normal mereka. Jaringan insang kelompok perlakuan T3 menunjukkan degenerasi ringan filamen sekunder di dasar (Gambar 5). Jaringan Gill kelompok T4 juga dipamerkan kehilangan filamen sekunder di dasar (Gambar 6). Kecuali untuk T3 dan T4 kelompok, jaringan insang dari kelompok lain tidak menunjukkan perubahan dalam penampilan mereka. Histologi jaringan usus dari grup T7 menunjukkan aktif sel goblet (Gambar 7). Jaringan usus kelompok perlakuan lainnya tidak menunjukkan perubahan dibedakan dari penampilan normal. Diskusi Stres memainkan peran utama dalam imunosupresif organisme air, yang mungkin memiliki efek merusak pada kesehatan ikan, restrukturisasi sumber energi, ketahanan terhadap penyakit seluler adalah energi menuntut (Schreck 1996). Hormon yang terkait dengan stres mempengaruhi respon imun spesifik dan non-spesifik

(Weytes et al. 1999). Aflatoksin diketahui telah menunjukkan ditandai efek penekanan pada pengembangan kekebalan yang diperoleh melalui tindakan imunitas diperantarai sel nya. Paparan hasil AFB1 dalam pengurangan dalam makrofag (Kurtz dan Czuprynski 1992) dan T-sel (Marin et al. 1996).

Gambar. 1 Hati benih Labeo rohita makan dengan diet T4 menunjukkan edema ringan (H & E, 1609)

Gambar. 2 Hati benih Labeo rohita makan dengan diet T8 menunjukkan hepatosit bengkak dan sinusoid terbatas (H & E, 1609)

Gambar. 3 Ginjal benih Labeo rohita makan dengan diet T3 menunjukkan pendarahan ringan (H & E, 1609)

Gambar. 4 Ginjal benih Labeo rohita makan dengan diet T4 menunjukkan penyebaran perdarahan yang luas. Akumulasi massa homogen juga terlihat dalam lumen tubular (H & E, 1609)

Gambar. 5 Gill benih Labeo rohita makan dengan diet T3 menunjukkan degenerasi filamen sekunder (H & E, 1609)

Gambar. 6 Gill benih Labeo rohita makan dengan diet T4 menunjukkan kerugian besar filamen sekunder di dasar insang lamellae (H & E, 1609)

Gambar. 7 Usus benih Labeo rohita makan dengan sel T7 diet menunjukkan piala diaktifkan (H & E, 1609)

Dalam penelitian ini, kadar total protein serum secara signifikan lebih rendah pada kelompok yang diobati dengan aflatoksin saja bila dibandingkan dengan kelompok perlakuan dengan cetakan inhibitor dan aflatoksin. Penurunan kadar total protein serum dalam kelompok aflatoksin yang diobati mungkin karena efek hepatotoksik dari AFB1 di Labeo rohita (Sahoo et al. 1998). Pengaruh interaksi yang signifikan aflatoksin dan cetakan inhibitor diamati total serum protein, nilai tertinggi berada di tingkat 0 ppb aflatoksin dilengkapi dengan cetakan inhibitor. Serum albumin dan globulin konten dari kelompok eksperimen menunjukkan nilai-nilai dalam kelompok aflatoksin yang diobati berkurang bila dibandingkan dengan cetakan inhibitor kelompok dilengkapi. Penurunan konsentrasi albumin mungkin karena perubahan dalam sintesis protein diamati dalam aflatoxicosis (Kubena et al 1993;.. Jindal et al 1994 dan Abo-Norag et al 1995.). Penurunan lebih lanjut dalam tingkat globulin dalam ikan aflatoksin diobati mungkin telah hasil dari lymphocytolysis. Hal ini didukung oleh temuan Sahoo dan Mukherjee (2002), yang melaporkan penekanan yang signifikan dari tingkat globulin dengan perlakuan aflatoksin. Dalam penelitian ini, pengaruh interaksi yang signifikan aflatoksin dan cetakan inhibitor pada tingkat globulin diamati, nilai tertinggi berada di tingkat 0 ppb aflatoksin dilengkapi dengan inhibitor cetakan, yang tidak bervariasi secara signifikan dari 20 ppb tingkat aflatoksin dengan inhibitor. Peningkatan protein serum, albumin atau tingkat globulin dalam kelompok dilengkapi cetakan inhibitor diduga terkait dengan respon kekebalan yang lebih kuat (Wiegertjes et al. 1996). Rasio / G adalah komponen humoral terukur dari mekanisme pertahanan non-spesifik pada ikan. Dalam penelitian kami, tidak ada pengaruh yang signifikan inhibitor cetakan dan / atau efek interaksi tingkat aflatoksin dan jamur inhibitor pada rasio A / G. Sahoo dan Mukherjee (2002) telah melaporkan penindasan yang signifikan dalam tingkat globulin meskipun total protein, albumin dan rasio A / G tidak signifikan dipengaruhi oleh perlakuan aflatoksin 1,25 mg kg-1 AFB1 ikan di Labeo rohita. RBC count dalam kelompok eksperimen berbeda secara signifikan

dipengaruhi oleh perlakuan aflatoxin, nilai tertinggi berada di 0-ppb kelompok aflatoksin. RBC count menurun dengan meningkatnya kadar aflatoksin dalam makanan. Secara signifikan, jumlah yang lebih tinggi dari WBC diamati pada kelompok aflatoksin dilengkapi, yang mungkin dikaitkan dengan efek imunosupresif dari aflatoksin pada ikan. Konsentrasi Hemoglobin juga menunjukkan nilai yang lebih rendah pada kelompok aflatoksin yang diobati tanpa inhibitor. Penurunan ini di RBC dan konsentrasi hemoglobin mungkin karena faktor-faktor seperti penghambatan sintesis protein yang dibuktikan dengan protein rendah serum dalam kelompok aflatoksin-diobati tanpa inhibitor (Kaneko 1989) dan cacat seluler haematopoetic aflatoksin (Van Vleet dan Ferrans 1992). Dalam sebuah penelitian serupa, Jantrarotai dan Lovell (1990) mengamati penurunan kadar hemoglobin dan jumlah eritrosit dan jumlah leukosit meningkat pada lele Saluran terkena 10 ppm AFB1 selama 10 minggu. Mereka mengamati anemia hemolitik dalam hubungan dengan nekrosis dalam jaringan haematopoetic. Dalam penelitian ini, konsentrasi hemoglobin tertinggi ditemukan pada kelompok T5 (0 ppb AFB1? Cetakan inhibitor), yang mungkin disebabkan oleh efek dari inhibitor cetakan. Kegiatan meledak pernapasan (NBT) secara signifikan menurun dalam kelompok aflatoksin makan lebih tinggi. Hasil serupa penekanan kekebalan akibat aflatoksin dilaporkan oleh Sahoo dan Mukherjee (2001) dan El-Enbaawy et al. (1994). Namun, NBT tidak signifikan (P [0,05) terpengaruh karena masuknya cetakan inhibitor sendiri dan / atau interaksi cetakan inhibitor dan tingkat aflatoksin dalam makanan.

Dalam penelitian kami, histologi jaringan hati dan ginjal mengungkapkan perubahan dalam arsitektur mereka karena suplementasi 40 ppb aflatoksin dalam makanan. Halver (1969) telah menggambarkan hati menjadi organ utama untuk tindakan metabolisme aflatoksin. Menurut dia, kerusakan hati dipamerkan ditandai vacuolization nuklir dan sitoplasma dan haemorrhagic nekrosis kerusakan ringan. Dalam studi saat ini, 40 ppb AFB1 dalam diet menunjukkan edema ringan pada hati tetapi ketika dilengkapi dengan adsorben menunjukkan hepatosit bengkak. Jaringan ginjal yang terpengaruh bahkan pada 20 ppb dimasukkannya AFB1 diet menunjukkan perdarahan ringan. Perdarahan luas di ginjal ikan eksperimental yang nyata dalam 40 ppb diet kelompok AFB1-diobati. Ashley (1965) mengamati ginjal haematopoetic dengan hiperemi fokus dan hiperplasia ringan jaringan korteks adrenal. Jantraratoi et al. (1990) melaporkan bahwa sinusoid dalam ginjal kepala Bahasa Dari ikan lele Yang melebar Dan melingkar akibat paparan aflatoksin. Namun, PENELITIAN Dalam, Suami, HANYA perdarahan diamati. Namun, ketika dilengkapi Artikel Baru adsorben, jaringan ginjal PADA 20 ppb diet tingkat inklusi AFB1 regular tidak menunjukkan perubahan bahasa Dari penampilan sedangkan normal, PADA 40 ppb tingkat AFB1 HANYA pendarahan Ringan Yang terlihat, menunjukkan bahwa telah ADA EFEK beberapa detoksifikasi adsorben PADA aflatoksin. Histologi jaringan insang, mengungkapkan hilangnya filamen sekunder di ditempatkan dan KARENA AFB1 diet PADA 20 Dan 40 ppb tingkat inklusi. Verma (1997) melaporkan sel epitel Bengkak edema Dan atrofi Bahasa Dari lamellae sekunder selama toksisitas aflatoksin Akut PADA Channa punctatus. Jantraratoi et al. (1990) mengamati Lipat Bahasa Dari insang lamellae terhadap filamen Dalam, ikan lele disuntikkan intra-peritoneal berat untuk Artikel Baru 12 mg AFB1/kg TUBUH. Regular tidak ADA perubahan bahasa Dari penampilan yang normal diamati Dalam, Struktur insang Bila dilengkapi Artikel Baru adsorben Dalam, MAKANAN. Verma (1997) mengamati mukosa peluruhan Bersama Artikel Baru hiperplasia sub-mukosa di USUS. Dalam, penyusunan Tugas SAAT Suami, jaringan USUS menunjukkan sel goblet Aktif PADA 40 ppb inklusi diet AFB1 tetapi Muncul biasa ketika adsorben diberikan Dalam, diet.

Sebagai kesimpulan, penelitian ini mungkin menemukan kegunaan penting dalam aplikasi praktis makan. Ini menyimpulkan bahwa RBC, hemoglobin, protein total serum, albumin dan globulin konten menurun sehubungan dengan tingkat aflatoksin makanan. Nilai-nilai ini menunjukkan tren peningkatan karena penambahan cetakan inhibitor, menunjukkan efek ameliorating inhibitor cetakan terhadap produksi aflatoksin. The NBT nilai tidak terpengaruh karena suplementasi cetakan inhibitor. Hal ini menunjukkan bahwa cetakan inhibitor melindungi kekebalan non-spesifik, yang dinyatakan diaktifkan karena paparan aflatoksin. Temuan histopatologi juga melengkapi parameter Haemato-imunologi. Penambahan cetakan inhibitor melindungi perubahan histo-arsitektur seperti yang terlihat karena pengaruh aflatoksin. Ginjal tampaknya lebih sensitif karena perubahan itu tidak banyak dikembalikan karena cetakan inhibitor. Hal ini menemukan bahwa hingga 20 ppb aflatoksin makanan di Labeo rohita bibit, parameter Haemato-imunologi dilindungi. fasilitas untuk melaksanakan pekerjaan penelitian. Penulis pertama adalah berterima kasih kepada Central Institute of Education Perikanan, Mumbai, untuk dukungan keuangan dengan memberi Kelembagaan Fellowship.