Draff usulan penelitian

8/18/2019 Draff usulan penelitian

1/25

I

PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Banyak pihak yang menilai kontribusi sektor perikanan Indonesia terhadap

pembangunan ekonomi rakyat maupun negara masih sangat kecil, sepertiga dari

devisa yang diperoleh dari sektor perikanan adalah dari ekspor udang. Produksi

udang di Indonesia pada tahun 2015 yaitu sebesar 75.!00 ton "BP#$.

%elimpahnya produksi udang ini akan menghasilkan limbah yang banyak &uga

mengingat hasil samping produksi yang berupa kepala, kulit, ekor dan kaki adalah

sekitar '5( ) 50( dari berat a*al. +imbah yang dihasilkan dari proses

pembekuan udang, pengalengan udang, dan pengolahan kerupuk udang berkisar

antara '0( ) 75( dari berat udang.

+imbah udang mempunyai kandungan kitin yang berkisar antara 20 ) '0 (

dari berat kering limbah udang dan keberadaan kitin dalam limbah udang masih

berikatan dengan unsur lain seperti protein, kalsium karbonat dan magnesium.

+imbah udang sebenarnya dapat dimanaatkan untuk pakan ternak namun karena

dibatasi oleh adanya kitin yang mengikat protein dan mineral dalam limbah udang

sehingga perlu diupayakan untuk mengolah limbah udang dahulu sebelum di

&adikan sumber pakan ternak. -egradasi ikatan kitin dan protein serta mineral

yang terkandung dalam limbah udang dapat dilakukan melalui proses ermentasi

secara bertahap dengan menggunakan bantuan mikroba. Proses ermentasi secara

bertahap pada limbah udang bertu&uan untuk melepaskan protein dan glukosa

yang terikat pada kitin.

Pengolahan limbah udang sebagai pakan dapat dilakukan secara isik,

kimia dan biologis. Pengolahan dengan cara biologis adalah pengolahan dengan

cara memanaatkan mikroorganisme, seperti bakteri, &amur dan ragi. Pemilihan

1


2/25

mikroorganisme yang digunakan sangat menentukan produk yang dihasilkan.

%ikroorganisme yang digunakan dalam bioproses limbah udang harus memiliki

siat proteolitik dan dapat menciptakan suasana asam agar kitin didegradasi

men&adi protein dan mineral.

#iat Lactobacillus Sp mampu meningkatkan nilai cerna pada bahan

terermentasi karena dapat melakukan pemotongan pada bahan yang sulit

dicerna,sehingga langsung diserap oleh tubuh, misalnya protein diubah men&adi

asam)asam amino "uerra, 200/$. Bakteri Lactobacillus Sp dapat menghasilkan

enim protease, adanya enim protease dan khitinase diharapkan dapat membantu

memisahkan protein dengan khitin pada limbah udang "la, 200'$. urhidayat

"2002$ men&elaskan bah*a enim protease dapat digunakan untuk memisahkan

nitrogen "$ pada ikatan khitin cangkang udang. #edangkan Saccharomyces

cereviseae adalah khamir yang dapat menghasilkan enim khitinase, amilase,

lipase, protease, dan enim lain yang dapat membantu proses pencernaan at)at

makanan dalam organ pencernaan. 3hamir penghasil enim ekstraseluler dan

khamir ini telah digunakan dalam &angka *aktu yang lama untuk proses

ermentasi dan tidak menghasilkan produk samping berbahaya atau bahan lain

yang bersiat toksik. 3hamir ini memiliki kemampuan menghidrolisis pati

men&adi glukosa.

Berkenaan pada latar belakang, penulis tertarik untuk melakukan

penelitian dengan &udul 4Pengaruh +ama ermentasi +imbah dang oleh

Lactobacillus sp yang -ilan&utkan dengan Saccharomyces cereviseae terhadap

3andungan Protein dan lukosa6.

2


3/25

1.2. Identifikasi Masalah

Berdasarkan latar belakang dapat diidentiikasi masalah sebagai berikut

1. Berapa besar pengaruh *aktu kombinasi ermentasi oleh Lactobacillus sp

yang dilan&utkan Saccharomyces cereviseae terhadap kandungan protein

murni dan kandungan glukosa limbah udang produk ermentasi.

2. 8aktu kombinasi ermentasi berapa oleh Lactobacillus sp yang dilan&utkan

Saccharomyces yang menghasilkan kandungan protein murni dan kandungan

glukosa limbah udang produk ermentasi tertinggi.

1.3. Tuuan Penelitian

Berdasarkan latar belakang dan identiikasi masalah tersebut maka maksud

dan tu&uan dari penelitian ini adalah

1. %engetahui pengaruh *aktu kombinasi ermentasi pada tahapan ermentasi

oleh Lactobacillus sp yang dilan&utkan Saccharomyces cereviseae terhadap

kandungan protein dan glukosa limbah udang produk ermentasi.

2. %endapatkan kombinasi *aktu ermentasi oleh Lactobacillus sp yang

dilan&utkan oleh Saccharomyces yang menghasilkan kandungan protein dan

glukosa limbah udang produk ermentasi tertinggi.

1.!. "egunaan Penelitian

9asil penelitian diharapkan dapat memberikan inormasi dan pengetahuan

tentang *aktu yang optimal pada ermentasi bertahap oleh Lactobacillus sp yang

dilan&utkan oleh Saccharomyces cereviseae terhadap kandungan glukosa dan

protein dalam limbah udang produk ermentasi.

'


4/25

1.#. "erangka Penelitian

3ulit udang sebagian besar terdiri dari kitin, protein dan kalsium karbonat,

kitin merupakan ko)polimer )acetyl -)glucosamin dan -)glucosamin. :urunan

kitin yaitu kitosan dapat dimanaatkan dalam berbagai bidang diantaranya yaitu

bidang kedokteran, industri tekstil, industri kosmetika, industri membran "ilm$,

industri pengolahan pangan, dan penanganan limbah ";ye dan #tevens, 200


5/25

Actinomycetes sp, Sreptomyces sp, &amur pengurai selulosa dan ragi yang

berungsi menguraikan selulosa atau khitin pada limbah udang "3yusey ature

arming #ocieties, 1!!5= Indriani, 200'$.

ermentasi adalah suatu proses perubahan kimia*i dari senya*a)senya*a

organik "karbohidrat, lemak, protein, dan bahan organik lainnya$ baik dalam

keadaaan aerob maupun anaerob melalui ker&a enim yang dihasilkan oleh

mikroba. Proses ermentasi dipengaruhi dosis dan *aktu. :ingkat dosis berkaitan

dengan besaran populasi mikroba yang berpeluang menentukan cepat tidaknya

perkembangan mikroba dalam menghasilkan enim untuk merombak substrat

sehingga pada gilirannya berpengaruh terhadap produk akhir. +ama inkubasi

berkaitan dengan *aktu yang akan digunakan bakteri untuk tumbuh dan

berkembang biak. #elama masa tersebut, bakteri terus menggunakan kompone)

komponen substrat untuk kelangsungan hidupnya. %akin singkat *aktu inkubasi

makin sedikit kesempatan inokulum untuk tumbuh dan berkembang biak sehingga

&umlah komponen susbtrat yang dapat diubah &uga makin sedikit ";bun, 200'$.

Beberapa peneliti melaporkan adanya perubahan substrat melalui

ermentasi dengan bakteri. 3ecepatan tumbuh yang optimum untuk bakteri

Lactobacillus Sp pada media agar dengan suhu '0 ) '7° ? dan tumbuh baik pada

a?l isiologis ' ) 7(. "9olt et al, 1!!


6/25

*aktu ermentasi yaitu 0, 2< &am dan nim yang dihasilkan diantaranya

amilase, glukosidase, glukoamilase, kitinase, osolipase, katalase, invertase,

protease "+ampen, 1!/= +odder, 1!70$. Penelitian mengenai ermentasi

menggunakan khamir telah dilakukan, seperti penelitian 8ulandari, dkk. "2012$

yang menyatakan bah*a mikroorganisme yang memiliki tingkat eektiitas dalam

memanaatkan limbah molas sebagai sumber glukosa adalah Saccharomyces

cerevisiae dengan tingkat eektiitas 12/,< m+@mg. 9al tersebut menun&ukkan

bah*a khamir memiliki kemampuan memanaatkan karbohidrat "monosakarida

ataupun polisakarida$ sebagai sumber energi untuk pertumbuhannya. Pada

ermentasi limbah udang diharapkan Saccharomyces cerevisiae dapat

mendegradasi kitin yang merupakan biopolimer yang tersusun oleh unit)unit )

asetil)-)glukosamin dan termasuk golongan polisakarida, dengan nama lain A)"1)


7/25

menggunakan khamir Saccharomyces cerevisiae yaitu ' hari dengan dosis '(

pada suhu ruang.

Berdasarkan kerangka pemikiran dapat diperoleh hipotesis bah*a *aktu

ermentasi oleh Lactobacillus sp selama 2 hari dan dilan&utkan oleh

Saccharomyces cereviseae selama ' hari menghasilkan kandungan protein murni

dan glukosa tertinggi.

1.$. %aktu dan L&kasi PenelitianPenelitian ini akan dilaksanakan pada bulan %ei 201/ di +aboratorium

utrisi :ernak nggas on uminansia dan Industri %akanan :ernak dan

+aboratorium 3imia %akanan :ernak akultas Peternakan niversitas

Pad&ad&aran, Catinangor, #umedang.

7


8/25

II

BAHAN DAN MET'DE

2.1 Bahan dan Alat Penelitian

2.1.1 Bahan Penelitian

Bahan yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut

1. #ubtrat

#ubstrat yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah limbah udang

segar yang diperoleh dari indramayu.

2. %ikroba

%ikroba yang digunakan adalah bakteri Lactobacillus sp dan khamir

Saccharomyces cereviseae yang akan diperoleh dari +aboratorium

%ikrobiologi Institut :eknologi Bandung.

'. ;Duades


9/25


10/25

2.2 Met&de Penelitian

2.3.1 Persia)an Pen-ediaan Bakteri Lactobacillus sp

1. Pembuatan %edia Berbasis 3aldu +imbah dang " Nutrient Broth Agar $.

#ebanyak 250 gram limbah udang segar akan digunakan dalam penelitian

ini, limbah udang dicuci bersih, kemudian direbus dalam 1000 ml aDuadest

selama '0 menit. #elan&utnya air rebusan disaring dengan kain kasa

bersih, ambil 500 ml kemudian ditambahkan 15 gram a?l 0,!( dan 7

gram agar batang. #etelah itu disterilkan dengan menggunakan autoclave

pada suhu 121°? selama 20 menit tekanan 1 atmdan didinginkan. %edia

ini digunakan untuk perbanyakan Lactobacillus sp. "-*id&oseputro, 1!/


11/25

c$ %enghitung &umlah koloni mikroba minimal 109

?@ml dari

inokulum yang sudah &adi menggunakan metode Total late !ount

":P?$.

2.2.2 Persia)an Pen-ediaan "ha+ir Saccharomyces cereviseae

1. Pembuatan %edia >sktrak :oge ;gar ">:;$

#ebanyak 250 gram toge yang sudah dicuci bersih dimasak dalam 1000 ml

aDuades selama 2,5 &am, kemudian disaring dengan kain kasa dan

ekstraknya diambil 500 ml. >kstrak toge "500 ml$ kemudian ditambah 15

gram sukrosa pada suhu 121°? selama 15 menit tekanan 1 atm dan

didinginkan. %edia ini digunakan untuk perbanyakan khamir

Saccharomyces cereviseae ";bun, 200/$.

2. Perbanyakan 3hamir Saccharomyces cereviseae

Biakan murni Saccharomyces cereviseae diinokulasikan "dengan

menggunakan &arum ose$ ke dalam tabung reaksi yang berisi media

ekstrak toge agar ">:;$ steril, kemudian diinkubasikan pada suhu '5°?

selama


12/25

#elan&utnya substrat diinkubasikan pada suhu '0 ) '5°? selama


13/25

0. %ensterilisasi produk ermentasi dengan autoclave selama 15 menit pada

suhu 121°? dengan tekanan 1 atm.

1. %engeringkan limbah udang produk ermentasi dengan menggunakan

oven pada suhu


14/25

2. :ambahkan 200 ml aDuades lalu digiling menggunakan blender selama 1

menit.

'. -imasukan elektroda kedalam larutan buer < kemudian dibiarkan hingg

stabil.

lektroda dibilas dengan aDuades kemudian dikeringkan.

5. -imasukan elektroda kedalam larutan buer 7 dan dibiarkan hingga stabil.

/. >lektroda dibilas dengan aDuades kemudian dikeringkan.

7. -imasukan elekroda kedalam larutan sampel dan dibiarkan hingga stabil.

. -icatat nilai p9 yang ditun&ukan oleh layar.

2.! 4an5angan Per5&,aan dan Analisi 6tatistik

Penelitian dilakukan dengan metode eksperimental. ancangan yang

digunakan adalah ancangan ;cak +engkap ";+$ dengan 5 perlakuan dan

masing)masing perlakuan diulang < kali sehingga didapat 20 unit percobaan.

Perlakuan pada penelitian ini adalah sebagai berikut

81 H 8aktu kombinasi ermentasi Lactobacillus sp 5 hari dan

Saccharomyces cereviseae 1 hari

82 H 8aktu kombinasi ermentasi Lactobacillus sp < hari dan


8' H 8aktu kombinasi ermentasi Lactobacillus sp ' hari dan

Saccharomyces cereviseae ' hari

8< H 8aktu kombinasi ermentasi Lactobacillus sp 2 hari dan

Saccharomyces cereviseae < hari

85 H 8aktu kombinsi ermentasi Lactobacillus sp 1 hari dan


1


15/25

-ata yang diperoleh diu&i menggunakan sidik ragam "aspers, 1!!5$ dengan

model matematika sebagai berikut

Yij= μ+eij

3eterangan

i& ilai pengamatan dari perlakuan ke)I ulangan ke)&

J ilai tengah populasi

ei& alat percobaan dari perlakuan ke)I ulangan ke K&

i Perlakuan ke)I "1,2,',


16/25

;pabila hasil yang diperoleh berbeda, maka dilakukan u&i lan&ut dengan

menggunakan u&i &arak berganda duncan dengan rumus

+# H ## 'KTg

3eterangan

+# +east #igniicant ange

## #tudentied #igniicant ange

3:g 3uadrat :engah alat

r langan

#elisih antar perlakuan "d$ kemudian dibandingkan dengan perlakuan,

dengan kaidah keputusan

1. ;pabila d M +# maka tidak berbeda nyata "terima 90$

2. ;pabila d N +# maka berbeda nyata atau sangat nyata "tolak 90$.

1/


17/25

DA*TA4 PU6TA"A

;ang, ., ;bun., :&it&a9, ;. 2012. engaruh (osis (an Lama "ermentasi Buah

)etapang %"icus Lyrata& *leh Bacillus Licheniformis Terha+ap

)an+ungan rotein )asar (an Serat )asar. Curnal npad Fol 1 o 1

"2012$. + http@@ &urnal.unpad.ac.id@e&ournal@article@vie*@1'7!.

OOOO. 200'. engaruh (osis nokulum Aspergillus niger +an Lama "ermentasi

Terha+ap erubahan )an+ungan rotein )asar +an Serat )asar

Ampas #mbi -arut. :hesis, Program Pascasar&ana, niversitas

Pad&ad&aran, Bandung.

;bun. 200. Biokonversi Limbah #+ang in+u %naeusmono+on$ oleh Bacillus Licheniformis +an Aspergillus niger Serta mplementasinya Terha+ap

erforman Broiler. -isertasi, niversitas Pad&ad&aran, Bandung.

OOOO. 200!. engolahan Limbah #+ang in+u Secara )imia/i (engan Na*H

+an H0S*1 Terha+ap rotein +an Mineral Terlarut. niversitas

Pad&ad&aran. Catinangor.

-*id&oseputro. 1!/


18/25

La+)iran 1. 4en5ana 7ad8al Penelitian

1

o

raian

3egiatan

Bulan

%;

201/

;P

201/

%>I

201/

C

201/

;

201/

1 2 ' < 1 2 ' < 1 2 ' < 1 2 ' < 1 2 ' <

1 ;dministrasi

2 Bimbingan P

' #eminar P

< Perbaikan P

5 Penelitian

/ ;nalisis data

7 Bimbingan

skripsi

#idang sar&ana

! Perbaikan

skripsi

10 8isuda


19/25

La+)iran 2. 4en5ana Bia-a Penelitian

N&+&r 4in5ian Harga 4)(

1. Pra Penelitian

a. #tudy literatur

b. Pengetikan dan print

c. Perbanyak proposal usulan penelitian

d. #eminar sulan Penelitian "Persiapan

dan akomodasi$

50.000

100.000


20/25

La+)iran 3. Diagra+ alur )enelitian

PENGECILANUKURAN

LIMBAH UDANG

SUHU 121°C, TEKANAN 1 ATM

STERILISASI

SUHU 40°CPENDINGINAN

AUTOSHAKERBATH

BIOPROSES

FERMENTASI oleh

Saccharomyces c DOSIS3%,!"#$ 1,2,3,4 !& '

°

DEGRADASI PROTEIN OLEH

Lactobacillus sp DOSIS 3%,!"#$ 1,2,3,4,' !& ' h!(),

ANALISIS PRODUK PROTEINGLUKOSA

20


21/25

La+)iran !. Per,an-akan dan Perhitungan Total Plate Count TP9(

Bakteri Lactobacillus sp Pada Media

Diinku,asi sela+a !/ a+(

Perhitungan ?@g H Cumlah koloni per ca*an R1

faktor pengenceran

10*1

+ l N!Cl- 1l

10*'

+ l N!Cl- 1l 10*4

10*4

+ l N!Cl- 1l 10*3

10*3

+ l N!Cl- 1l 10*2

10*2

+ l N!Cl- 1l 10*1

10*.

+ l N!Cl- 1l 10*'

10*/

+ l N!Cl- 1l 10*.

10*

+ l N!Cl- 1l 10*/

10*10

+ l N!Cl- 1l 10*+

10*+

+ l N!Cl- 1l 10*

B;S1 ml 10)! B;S1 ml 10)10

21


22/25

La+)iran #. Per,an-akan dan Perhitungan Total Plate Count TP9(

"ha+ir Saccharomyces cerevisiae Pada Media ETA

1 +l 1 +l

10)1 10)2 10)'

! ml a?lS1 gram khamir ! ml a?lS1 ml 10)1 ! ml a?lS1 ml 10)2

1 +l 1 +l

10)< 10)5 10)/

! ml a?lS1 ml 10)' ! ml a?lS1 ml 10)< ! ml a?lS1 ml 10)5

10)7 "-iinkubasi selama :;S1 ml 10)/

>:;S1 ml 10)7

22


23/25

La+)iran $. Langkah "era Penguian Pr&tein Dengan Met&de L&8r-

Langkah "era Penguian Pr&tein Dengan Met&de L&8r-

Pe+,uatan Larutan 6tandar

Me&)!& !!#!&$(&) e!&5!" 0,02+2

Mel!($#"!& e&!&!6$!e !! el!

Me!$"!& !! l!$$"$( 2'0 l l!l$

Me&!)l 0,1 l7 0,2 l70,4 l7 0,. l7 0, l7 1

l !& e!$"!&"e!l! #!$& (e!")

Me&!!h !6$!e#h)&! 8ol$e #o#!l 4,0

Me&!!h ',' le(e!") lo(5 A, "o9o"

!& ))!"!& 1' e&)#

Me&!!h 0,' le(e!") lo(5 B, "o9o"

e&!& 9e!#

D))!"!& 30 e&)#h)&! e($!h !(&!

e&:!) )($

2'


24/25

Pelarutan 6a+)el

Me&)!& !ell)!h $!& e!&5!"!&

3,024 (!

D))!"!& 30 e&)#h)&! e($!h !(&!

e&:!) )($

Me&!!h"!& 0,' le(e!") ;e&ol, "o9o"

e&!& 9e!#

Me&!!h ',' le(e!") 9!$(!&, "o9o"!& ))!"!& 1' e&)#

Me&!!h !6$!e#h)&! 8ol$e #o#!l 4,0

Me)e# 0,' l l!($#!&!el

Me&5!()& !& e&!)l=l#(!#&5!

Mel!($#"!& e&!& '0 l!6$!e# !! el!

2


25/25

Pengukuran Larutan 6tandar Pr&tein dan 6a+)el

Me&$"$( !& e&9!#!#!o(!&) !el l)!h

$!&

Me$!# "$(8! #!&!(!() h!)l e&$"$(!&

#e(e$#

Me&$"$( !& e&9!#!#

!o(!&) e#)!"o&e(!) #!&!(

Me&$"$( l!&"o !&?auto-zero@ "!& !! !l!#

Mel!"$"!& $:) !&:!&

elo!& !")$,)!!# !! λ ./0 &

Me!$"!& l!&"o !&l!($#!& #!&!( #e&!h

25

Draff usulan penelitian

Documents

Transcript of Draff usulan penelitian