7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

1/24

5

BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata)

2.1.1 Taksonomi

Cocor bebek merupakan tanaman asli dari Madagaskar. Kesamaan iklim

dan cuaca yang hampir sama dengan Indonesia, membuat cocor bebek tumbuh

subur dan semakin dikenal oleh masyarakat sebagai bahan obat alternatif (Putri,

2011).

Cocor bebek termasuk pada suku Crassulaceae, tanaman ini tersebar di

daerah tropis, ditanam di halaman rumah sebagai tanaman hias yang berguna

atau tumbuh liar di tepi jurang, tepi jalan, dan tempat-tempat lain yang tanahnya

berbatu pada daerah panas dan kering (Ahira, 2008).

Cocor bebek memiliki rasa agak asam, sifatnya dingin, baunya lemah,

dan astrigen. Cocor bebek bisa dimanfaatkan sebagai antiradang, antiseptik,

penghenti pendarahan, peluruh dahak (ekspektoran), peluruh kencing (diuretik),

pereda demam, penyejuk, mengurangi bengkak, dan pembersih darah. Selain itu

daun cocor bebek berkhasiat untuk mengatasi kulit terkelupas, radang payudara,

radang amandel, radang lambung, radang telinga luar, rheumatik, memar, tulang

patah, wasir, diare, disentri, luka darah, luka bakar dan luka akibat tersiram air

panas (Ahira, 2008).

Untuk dapat mengenal tanaman ini lebih dalam, perlu diketahui morfologi

dan klasifikasi dari tanaman tersebut. Adapun klasifikasi biologi dari tanaman

cocor bebek adalah (Fitrah, 2010):

Kingdom :Plantae

http://id.wikipedia.org/wiki/Planthttp://id.wikipedia.org/wiki/Planthttp://id.wikipedia.org/wiki/Plant

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

2/24

6

Subkingdom : Tracheobionta

Superdivision : Spermatophyta

Division :Magnoliophyta

Class :Magnoliopsida

Subclass : Rosidae

Ordo :Rosales

Family :Crassulaceae

Genus :Kalanchoe

Species : Kalanchoe Blossfeldiana Poelln

Gambar 2.1 Morfologi Tanaman Cocor Bebek;daun berwarna hijau muda ini

memiliki daging tebal dan banyak kandungan air didalamnya (Sumber: flickr.com)

2.1.2 Nama Lokal

Buntiris, jampe, jukut kawasa, tere, ceker itik (Sunda), suru bebek, cocor

bebek, teres, tuju dengen (Jawa), didingin beueu (Aceh), mamala (Halmahera),

rau kufiri (Ternate), kabi-kabi (Tidore), daun ancar bebek, daun ghemet

(Madura), lou di sheng gen (China).

http://id.wikipedia.org/wiki/Flowering_planthttp://id.wikipedia.org/wiki/Flowering_planthttp://id.wikipedia.org/wiki/Flowering_planthttp://id.wikipedia.org/wiki/Magnoliopsidahttp://id.wikipedia.org/wiki/Magnoliopsidahttp://id.wikipedia.org/wiki/Saxifragaleshttp://id.wikipedia.org/wiki/Saxifragaleshttp://id.wikipedia.org/wiki/Saxifragaleshttp://id.wikipedia.org/wiki/Crassulaceaehttp://id.wikipedia.org/wiki/Crassulaceaehttp://id.wikipedia.org/wiki/Crassulaceaehttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Kalanchoe&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Kalanchoe&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Kalanchoe&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Kalanchoe&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Crassulaceaehttp://id.wikipedia.org/wiki/Saxifragaleshttp://id.wikipedia.org/wiki/Magnoliopsidahttp://id.wikipedia.org/wiki/Flowering_plant

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

3/24

7

2.1.3 Morfologi Cocor Bebek

Morfologi tanaman Cocor Bebek adalah sebagai berikut:

1. Bunga

Bentuk malai, mahkota bentuk corong warna merah. Kelopak berdaun

lekat.

2. Buah

Kotak, warna ungu bernoda putih. buah silindris, melembung, 1,5 - 4 cm

panjangnya, taju pendek. Mahkota bentuk periuk atau lonceng, jelas menyempit

di atas pangkal yang melebar, di atasnya lagi melebar, panjang 3,5 - 5,5 cm,

bagian yang muncul di atas kelopak merah, pangkal tabung dengan 8 lipatan

yang dalam, taju bulat telur bentuk lanset, bentuk ekor yang meruncing. Benang

sari, dua lingkaran. Tangkai putik panjang. Helaian sisik segi empat (Kristio,

2007).

3. Batang

Segi empat, lunak, beruas, warna hijau. Batang segi empat tumpul atau

hampir membulat, bunga berbilangan atau kelipatan empat, menggantung, pada

malai yang tegak tidak rapat (Kristio, 2007).

4. Daun

Berbatang basah, daun tebal pinggir beringgit, banyak mengandung air,

bentuk daunnya lonjong atau bundar panjang, panjang 5 - 20 cm, lebar 2,5 -15

cm, ujung daun tumpul, pangkal membundar, permukaan daun gundul, warna

hijau sampai hijau keabu-abuan. Daun tunggal atau kelihatan seolah-olah

berbilang 3 atau menyirip berdaun 5. Daun atau tajunya memanjang atau oval,

dengan ujung yang tumpul, beringgit atau beringgit rangkap, 5 - 20 kali 2,5 - 15

cm (Kristio, 2007).

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

4/24

8

2.1.4 Kandungan Aktif Cocor Bebek dan Manfaatnya sebagai Tanaman Obat

Daun yang cukup tebal ini selain banyak mengandung air juga

menyimpan berbagai bahan kimia yang bermanfaat bagi kesehatan. Cocor

bebek yang mempunyai rasa sedikit asam, lunak, dan dingin ini juga

mengandung zat asam lemon, zat asam apel, vitamin C, saponin, tanin,

flavonoid, quercetin-3-diarabinoside, kaempferol-3-giocoside. Kandungan kimia

tersebut membuat cocor bebek bisa digunakan untuk berbagai pengobatan

(Putri, 2011).

Cocor bebek selain antitumor juga mempunyai sifat antiradang,

menghentikan pendarahan, mengurangi pembengkakan, dan mempercepat

penyembuhan luka. Masyarakat China kerap menggunakan cocor bebek sebagai

ramuan untuk mengatasi masalah pencernaan, muntah darah, serta gangguan

pada telinga maupun tenggorokan. Kemudian cocor bebek digunakan untuk

mengatasi trauma luka akibat kecelakaan, memar maupun pendarahan. Hal ini

disebabkan sifatnya yang dingin (Putri, 2011).

Masyarakat kepulauan Baham kerap menggunakan daun sejuk (cocor

bebek), untuk mengatasi gangguan asam atau pernafasan. Lalu teh cocor bebek

diminum untuk mengatasi rasa seperti terbakar di bagian dada. Sebenarnya

bagian yang sering digunakan sebagai ramuan obat adalah daunnya. Namun tak

jarang seluruh bagian tanaman ini digunakan sebagai ramuan dan belum ada

diberitakan efek samping akibat penggunaan cocor bebek ini. Namun beberapa

literatur menyarankan untuk tidak menggunakan ramuan tersebut pada orang

yang berkulit sensitif akan mengakibatkan gatal atau menimbulkan lepuhan.

Untuk itu jika ingin menggunakan ramuan ini berkonsultasilah lebih dahulu

kepada ahli tanaman (Putri, 2011).

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

5/24

9

1. Flavonoid

Flavonoid adalah senyawa yang tegabung dalam kelompok komponen

fenolik (polyphenol) bersama dengan tannin dan merupakan senyawa non polar .

Flavonoid dapat ditemukan dalam sel tumbuhan yang berfotosintesis, pada

umumnya terdapat dalam buah-buahan, sayuran, kacang, biji-bijian, teh, dan

madu. Fungsi flavonoid pada bunga untuk memberikan warna yang menarik,

pada daun atau kulit buah sebagai pertahanan terhadap patogen seperti jamur

dan sinar matahari. Senyawa ini juga berperan dalam fotosintesis, transfer

energi, mengaktifkan hormon pertumbuhan dan meregulasi pertumbuhan

tanaman (Tim and Andrew, 2005). Flavonoid dibagi menjadi 12 subgrup sesuai

struktur kimianya, yaitu: flavines, flavonols, flavanonols, isoflavones,

anthocyanins, anthocyanidins, leucoanthosyanins, chalcones, dihydrochalcones,

aurones, dan catechins (Machlin, 1991).

Flavonoid berfungsi sebagai antibakteri dengan cara membentuk

senyawa kompleks terhadap protein extraseluler yang mengganggu integritas

membran sel bakteri. Senyawa flavonoid diduga mekanisme kerjanya adalah

mendenaturasi protein sel bakteri dan merusak membran sel bakteri tanpa dapat

diperbaiki lagi (Arsyi, 2008).

Flavonoid bisa diekstraksi dengan menggunakan pelarut air, metanol dan

etanol (Darusman, 2007). Flavonoid mempunyai macam efek, yaitu efek

antitumor, anti HIV, immunostimulant, antioksidan, analgesik, antiradang

(antiinflamasi), antivirus, antifungal, antidiare, antihepatotoksik, antihiperglikemik,

dan sebagai vasodilator (de Padua et al, 1999).

Efek flavonoid sebagai anti bakteri diduga karena kemampuannya

berikatan dengan protein ekstraseluler dan membran sitoplasma dari kuman.

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

6/24

10

Semakin lipofilik suatu flavonoid, maka semakin kuat daya rusak flavonoid

tersebut terhadap membran sitoplasma kuman (Tsuchiya et al, 1996).

2. Saponin

Saponin adalah senyawa glikosida yang berfungsi sebagai detergen

alami (Rao, 1996). Menurut Lacaille-Dubois dan Wagner (1996) aktivitas spesifik

saponin meliputi aktivitas yang berhubungan dengan kanker seperti sitotoksik,

antitumor, kemopreventif, antimutagen, dan yang menyangkut aktivitas antitumor,

antiinflamatori dan antialergenik, imunomodulator, antivirus, antihepatotoksik,

antidiabetes, antifungi, dan molusisidal.

Efek saponin meliputi aktivitas pada sistem kardiovaskular dan aktivitas

pada sifat darah (hemolisis, koagulasi, kolesterol), sistem saraf pusat, sistem

endokrin, dan aktivitas lainnya. Saponin mampu berikatan dengan kolesterol,

sedangkan saponin yang masuk kedalam saluran cerna tidak diserap oleh

saluran pencernaan sehingga saponin beserta kolesterol yang terikat dapat

keluar dari saluran cerna. Hal ini menyebabkan kadar kolesterol dalam tubuh

dapat berkurang (Lipkin, 1995).

Toksisitasnya mungkin karena dapat merendahkan tegangan permukaan

(surface tension). Dengan hidrolisa lengkap akan dihasilkan sapogenin (aglikon)

dan karbohidrat (hexose, pentose dan saccharic acid). Pada hewan ruminansia,

saponin dapat digunakan sebagai antiprotozoa, karena mampu berikatan dengan

kolesterol pada sel membran protozoa sehingga menyebabkan membrondisis

pada sel membrane protozoa. Saponin dapat beraktivitas sebagai adjuvant pada

vaksin antiprotozoa yang nantinya mampu menghambat perkembangan

sporozoit di dalam saluran pencernaan (Cheeke,1999).

Saponin juga merupakan phytochemical yang berguna, antara lain

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

7/24

11

menunjukkan aktivitas antifungal dan antibakteri yang berspektrum luas. Sifat

fisik saponin yaitu memiliki minimal 2 atom N yang dapat berupa amin primer,

sekunder, dan tertier. Sedangkan secara kimia, saponin bersifat basa

(tergantung dari struktur molekul dan gugus fungsionalnya). Saponin mempunyai

kerja merusak membran plasma dari bakteri (Hopkins, 1995). Saponin juga

bekerja dengan menghambat enzim DNApolymerase sehingga terjadi hambatan

pada sintesa asam nukleat bakteri. Selain bakteri, saponin juga menghambat

pertumbuhan jamur (Davidson, 2004).

3. Tanin

Tanin merupakan salah satu senyawa kimiawi yang termasuk dalam

golongan polifenol yang diduga dapat mengikat salah satu protein yang dimiliki

oleh bakteri yaitu adhesin dan apabila hal ini terjadi maka dapat merusak

ketersediaan reseptor pada permukaan sel bakteri. Tanin juga telah dibuktikan

dapat membentuk kompleks senyawa yang irreversibel dengan prolin, suatu

protein lengkap, yang mana ikatan ini mempunyai efek penghambatan sintesis

protein untuk pembentukan dinding sel (Agnol et.al., 2003).

Tannin umumnya banyak ditemukan pada tumbuh-tumbuhan (akar, daun,

buah, dan biji) dan tanaman berkayu dengan konsentrasi tinggi, merupakan

metabolit sekunder tumbuhan, non-nitrogen dan fenolik di alam. Fungsi tannin

adalah sebagai sistem pertahanan tumbuhan melawan serangan mikroba dan

hewan-hewan melalui kemampuan mereka mengkonstriksikan jaringan lunak dan

membentuk kompleks bersama protein dan polisakarida (Aguilera et al., 2007).

Polifenol yang terdiri atas tanin, flavonoid dan asam fenolat merupakan

komponen yang paling menonjol dalam kaitannya dengan aktivitas antibakteri.

Tanin memiliki aktivitas antibakteri, secara garis besar mekanisme yang

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

8/24

12

diperkirakan adalah sebagai berikut : toksisitas tanin dapat merusak membran

sel bakteri, senyawa astringent tanin dapat menginduksi pembentukan kompleks

senyawa ikatan terhadap enzim atau subtrat bakteri dan pembentukan suatu

kompleks ikatan tanin terhadap ion logam yang dapat menambah daya toksisitas

tanin itu sendiri (Akiyama, 2001).

Untuk membedakan tannin dengan senyawa sekunder lainnya, dapat

dilihat dari sifat-sifat tannin itu sendiri:

1. Sifat fisika

Apabila dilarutkan dengan air, tannin akan membentuk koloiddan

akan memiliki rasa asam dan sepat.

Apabila dicampur dengan alkaloid dan glatin, makaakan terbentuk

endapan.

Tidak dapat mengkristal.

2. Sifat kimia

Merupakan senyawa kompleks yang memiliki bentuk campuran

polifenol yang sulit untuk dipisahkan sehingga sulit membentuk

kristal.

Tanin dapat diidentifikasi dengan menggunakan kromatografi.

Senyawa fenol yang ada pada tanin mempunyai aksi adstrigensia,

antiseptik, dan pemberi warna.

Sementara menurut Ajizah (2004), tanin diduga dapat mengkerutkan

dinding sel atau membran sel sehingga mengganggu permeabilitas sel itu

sendiri. Akibat terganggunya permeabilitas, sel tidak dapat melakukan aktivitas

hidup sehingga pertumbuhannya terhambat atau bahkan mati. Masduki (1996)

menyatakan bahwa tanin mempunyai daya antibakteri dengan cara

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

9/24

13

mempresipitasi protein, karena diduga tanin mempunyai efek yang sama dengan

senyawa fenolik. Efek antibakteri tanin antara lain melalui: reaksi dengan

membran sel, inaktivasi enzim, dan destruksi atau inaktivasi fungsi materi

genetik.

Tanin menyebabkan denaturasi protein dengan membentuk kompleks

dengan protein melalui kekuatan nonspesifik seperti ikatan hidrogen dan efek

hidrofobik , sebagaimana pembentukan ikatan kovalen, menginaktifkan adhesin

bakteri (molekul untuk menempel pada sel inang), menstimulasi sel-sel fagosit

yang berperan dalam respon imun selular (Asti, 2009)

2.2 Escherichia col i

2.2.1 Taksonomi

Escherichia coliadalah jenis bakteri gram negatif berbentuk batang dari

famili Enterobactericeae dengan genus Escherichia. Enterobactericeae

merupakan kelompok bakteri heterogen yang habitat alaminya adalah di saluran

pencernaan manusia dan hewan. Contoh lain dari famili Enterobactericeae

adalah kelompok Shigella, Salmonella, Klebsiella, Proteus, Enterobacter, Serratia

dan lainnya. Dalam genus Escherichia terdapat enam jenis species dan lima di

antaranya berhubungan dengan penyakit pada manusia. Escherihia coli

bertanggung jawab pada semua infeksi klinis yang disebabkan oleh genus

Escherichia, sementara species lainnya menyebabkan infeksi klinis kurang dari

1% (Brooks et al., 2004).

Escherichia coli adalah bakteri yang bertempat tinggal sebagai normal

flora di usus besar manusia, hewan, dan insekta. Selain tentunya dapat dengan

mudah dijumpai di tanah, air, sampah. Escherichia vulneris dahulu dimasukkan

dalam enteric group 21, juga dapat diisolasi dari infeksi luka. Escherichia

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

10/24

14

adecarboxylataadalah isolat manusia yang jarang ditemukan dan dikelompokkan

ke dalam enteric group 41 oleh CDC (Centers of Disease Control) dan

diklasifikasikan sebagai Enterobacter agglomerans oleh center lainnya.

Escherichia hermani dahulu diklasifikasikan sebagai enteric group 11, bisa

diperoleh dari isolat darah dan cairan spinal. Escherichia ergusoni dahulu

merupakan enteric group 10, dapat diisolasi dari darah dan saluran kemih tetapi

pada awalnya hanya dapat diperoleh dari tinja dan hewan. Escherichia blattae

tidak dapat diisolasi dari manusia, tetapi dari usus kecoak (Dzen, dkk., 2003).

Escherichia coli adalah spesies bakteri yang sering diisolasi dari

spesimen klinik, lebih sering digunakan sebagai objek dalam penelitian ilmiah

dibandingkan dengan mikroorganisme lainnya, juga telah digunakan sebagai

organisme indikator dalam menilai kualitas air. Organisme ini merupakan

penghuni utama usus besar dan merupakan isolat penyebab utama infeksi

saluran kemih dan luka infeksi, pneumonia, meningitis dan septisemia.

Penelitian-penelitian baru menyatakan bahwa galur tertentu dari Escherichia coli

juga merupakan patogen intestinal dan menyebabkan berbagai penyakit

gastrointestinal (Power et al., 2005; Greenwood, 1992).

2.2.2 Morfologi

Eschericia coliyang merupakan bakteri Enterobactericeae gram negatif

berbentuk batang (basil), berukuran kecil (0.5 x 3.0 mikrometer) dan tidak

membentuk spora (Greenwood, 1992). Memiliki fimbria atau pili yang

bertanggung jawab pada perlekatan antar bakteri, perlekatan antar sel hospes

dan bakteriofaga. Dinding sel terdiri atas murein, lipoprotein, fosfolipid, protein,

dan lipopolisakarida (LPS), semuanya tersusun menjadi lapisan-lapisan. Lapisan

murein-lipiprotein merupakan 20% dari dinding sel dan bertanggung jawab pada

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

11/24

15

rigiditas seluler. Sisanya 80% berkaitan dengan lipid dari lipoprotein untuk

membentuk lipid bilayer. LPS mengandung rantai polisakarida khusus yang

menentukan antigenitas dari berbagai spesies dan bertanggung jawab pada

aktifitas endotoksik (Elena et al., 2005; Dzen, dkk., 2003).

Gambar 2.2 Escherichia colipada Media Eosin Methylen Blue (EMB);

Escherichia coli akan memberikan warna yang khas yaitu berwarna gelap dan metalik

pada bagian tengahnya (Sumber: fedcosierra.com)

2.2.3 Struktur Antigen

Pembagian antigen Escherichia coli berdasarkan reaksi serologis

terutama ditentukan atas tipe antigen O (lipopolisakarida), tipe antigen H

(flagela), dan tipe antigen K (kapsuler). Terdapat lebih dari 164 antigen O, 100

antigen K, dan 50 antigen H untuk Escherichia coli. antigen H selanjutnya akan

dibagi menjadi subgrup L, A, dan B. Penentuan profil antigen dari berbagai galur

berguna untuk penelitian epidemiologi dan beberapa penelitian menyangkut

penyakit diare. Contohnya serotipe O157:H7 memproduksi Shigalike toxin yang

bertanggung jawab pada kolitis hemoragik sedangkan serotipe O78:H11 dan

O78:H12 hampir semuanya adalah enterotoksigenik (Dzen, dkk., 2003).

Antigen O adalah antigen di bagian terluar dari dinding sel

lipopolisakarida dan terdiri atas unit-unit polisakarida berulang (oligosakarida).

Beberapa antigen O mengandung gugus gula yang unik, tahan panas, dan

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

12/24

16

alkohol dan biasanya dapat dideteksi dengan aglutinasi bakteri. Antigen ini

tersusun atas senyawa LPS yang teridiri atas tiga region:

1. Region I: antigen dinding sel, merupakan polimer dari unit-unit

oligosakarida yang telah dijelaskan sebelumnya.

2. Region II: melekat pada dinding antigen O, terdiri atas core

polysaccharide yang konstan terdapat dalam genus tertentu tetapi

berbeda antar spesies.

3. Region III: lipid A, melekat pada region II melalui 2-keto-3-

deoksioktanat (KDO). Unit dasar lipid A adalah disakarida yang

melekat pada lima atau enam asam lemak. Secara struktural lipid A

meningkatkan asam lemak murein-lipoprotein dinding sel.

Selain digunakan sebagai tanda serologik, LPS juga berperan sebagai

faktor virulensi penting oleh toksik (endotoksin). Di samping itu, antigen O dapat

meningkatkan perlekatan organisme pada hospes (Brooks et al., 2004; Dzen,

dkk., 2003).

Antigen K (kapsuler) terletak lebih eksternal dibandingkan antigen O.

Antigen K dari spesies Klebsiella tampak dengan jelas membentuk kapsul yang

besar mengelilingi antigen O dan H (somatik). Pada genus bakteri lain, antigen K

hanya merupakan lapisan tipis mengelilingi sel bakteri. Antigen K dari

Escherichia coli berupa senyawa protein (bukan polisakarida) dan membentuk

suatu fimbria. Antigen H (berlokasi di flagela) adalah protein yang dapat

didenaturasi dengan pemanasan atau alkohol. Antigen H dapat diaglutinasikan

oleh anti-H antibodi terutama IgG. Faktor penentu dari antigen ini adalah fungsi

rantai asam amino pada protein flagelata yang disebut flagelin. Dalam serotipe

tunggal, antigen H bisa berada dalam satu atau dua bentuk yang disebut antigen

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

13/24

17

H fase 1 dan antigen H fase 2. Dua bentuk antigen ini terjadi karena ada

mikroorganisme yang cenderung berubah dari fase satu ke fase lain. Antigen ini

bisa mengganggu aglutinasi oleh antibodi terhadap antigen O (Dzen, dkk., 2003;

Brooks et al.,2004; Anonymous, 2009).

2.2.4 Ciri-Ciri Pertumbuhan

Escherichia coli merupakan bakteri fakultatif anaerob, kemoorganotropik,

mempunyai tipe metabolisme fermentasi dan respirasi tetapi pertumbuhannya

paling sedikit banyak di bawah keadaan anaerob. Pertumbuhan yang baik pada

suhu optimal 37C pada media yang mengandung 1% peptone sebagai sumber

karbon dan nitrogen.

Escherichia coli merupakan bakteri gram negatif, berbentuk batang, uji

indole positif dan mampu memfermentasi berbagai karbohidrat seperti glukosa,

laktosa, manitol dan arabinosa.

1. Media Eosin Methylene Blue

Media ini mempunyai keistimewaan mengandung laktosa dan berfungsi

untuk memilah bakteri yang memfermentasi laktosa seperti Escherichia coli

dengan bakteri yang tidak memfermentasikan laktosa seperti Staphylococcus

aureus, Pseudomonas aeruginosadan Salmonella. Bakteri yang memfermentasi

laktosa menghasilkan koloni dengan inti berwarna gelap dengan kilap logam,

sedangkan bakteri lain yang dapat tumbuh koloninya tidak berwarna. Adanya

eosin dan methylen blue membantu mempertajam perbedaan tersebut. Namun

demikian jika media ini digunakan pada tahap awal, karena kuman lain juga

tumbuh terutama Pseudomonas aeruginosa dan Salmonella sp dapat

menimbulkan keraguan. Bagaimanapun media ini sangat baik untuk

mengkonfirmasi bahwa kontaminan tersebut adalah Escherichia coli.

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

14/24

18

2. Media MacConkey Agar

Media ini mempunyai keistimewaan memilah bakteri enterik gram negatif

yang memfermentasi laktosa, karena media ini mengandung laktosa, crystal

violet dan neutral red bile salt. Kemampuan Escherichia coli memfermentasi

laktosa menyebabkan penurunan pH, sehingga mempermudah absorpsi neutral

reduntuk mengubah koloni menjadi merah bata dan bile/ empedu diendapkan.

Koloni lain (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosadan Salmonella),

bila tumbuh tidak akan berwarna karena tidak mampu memfermentasi laktosa.

Bakteri lain yang dapat tumbuh pada media ini antara lain Enterobacter, Proteus,

Shigella, Aerobacter, Enterococcus.

3. Media MacConkey Broth

Media ini bermanfaat sekali dalam memilah Escherichia colidari bakteri

lain terutama Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosadan Salmonella.

Adanya Oxgall dalam media berperanan dalam menghambat bakteri gram positif

lain seperti Staphylococcus aureus. Kandungan laktosa sangat penting untuk

memilah Escherichia coli dari bakteri lain yang tidak memfermentasi laktosa,

terutama Pseudomonas aeruginosa dan Salmonella. Fermentasi laktosa oleh

Escherichia coli menyebabkan pH turun. Kondisi asam akan menyebabkan

bromo cresol purple (media berwarna ungu) berubah menjadi kuning (media

berwarna kuning) dan adanya pembentukan gas yang dapat diamati pada tabung

durham. Sedangkan Salmonella dan Pseudomonas aeruginosa tidak dapat

mengubah warna media karena tidak memfermentasi laktosa, sedangkan bakteri

lain yang mampu memfermetasi laktosa dan mempunyai ekspresi pada media

seperti Escherichia coli adalah Enterobacter aerogenes. Adapun cara memilah

Escherichia aerogenes antara lain dengan reaksi indole. Escherichia coli

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

15/24

19

mempunyai reaksi positif, sedang Escherichia aerogenes bereaksi negatif.

Dengan sifat tersebut media ini sangat baik untuk memilah Escherichia colidari

bakteri lain pada tahap awal terutama Pseudomonas aeruginosa;

Staphylococcus aureus dan Salmonella (Suwandi, 1999).

2.2.5 Manifestasi Klinis

Bakteri Escherichia coli yang telah menginfeksi manusia dapat

menimbulkan bermacam-macam gejala dan keluhan. Adapun beberapa

manifestasi dari infeksi Escherichia coliyang paling sering dijumpai adalah:

1. Infeksi Saluran Kemih

Infeksi saluran kemih (ISK) adalah infeksi akibat berkembangbiaknya

mikroorganisme didalam saluran kemih yang di dalam keadaan normal air kemih

tidak mengandung bakteri. ISK paling banyak disebabkan oleh bakteri

Escherichia coli dengan kejadian hampir 39,4% (Samirah, 2006). Wanita lebih

sering terkena ISK karena perbedaan struktur anatomisnya, kematangan

seksual, perubahan traktus urogenitalis selama kehamilan dan kelahiran, serta

adanya tumor. Gejala-gejala ISK antara laian adalah poliuria, disuria, hematuria,

dan piuria. Terjadinya gangguan ginjal berhubungan dengan Escherichia coli

nefropatogenik yang memproduksi hemolisin, dan antigen K (antigen bakteri

Escherichia coli yang terletak pada kapsuler). Sedangkan pielonefritis

berhubungan dengan adanya fimbria-P (Tim Mikrobiologi FKUB, 2003).

2. Diare

Diare adalah frekuensi pengeluaran dan kekentalan feses yang tidak

normal (Dorland, 2002). Sumber lain mengartikan diare sebagai pengeluaran

feses cair atau kental lebih dari tiga kali sehari atau lebih dibandingkan individu

normal, biasanya merupakan gejala infeksi gastrointestinal yang dapat

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

16/24

20

disebabkan oleh beragam jenis bakteri, virus, dan parasit, infeksi menyebar

melalui makanan atau minuman yang terkontaminasi atau kontak langsung

dengan manusia. Angka morbiditas dan mortalitas diare cukup tinggi di negara-

negara berkembang, utamanya dikalangan anak-anak usia kurang dari 1 tahun.

Mortalitas diare di negara maju memang relatif kurang, namun kasus ini masih

dianggap penting karena dapat menimbulkan morbiditas di masyarakat (Karsten

et al., 2009; Farthing et al., 2008). Berikut adalah kelompok-kelompok

Escherichia coliyang berperan dalam diare:

a. Escherichia coli Enteropathogenic (EPEC)

Penyebab penting diare pada bayi, khususnya di negara berkembang.

EPEC melekat pada sel mukosa yang kecil. Faktor yang diperantarai

secara kromosom menimbulkan pelekatan yang kuat. Akibat dari infeksi

EPEC adalah diare cair yang biasanya sembuh sendiri taetapi dapat juga

kronik. Lamanya diare EPEC dapat diperpendek dengan pemberian

antibiotik. Diare terjadi pada manusia, kelinci, anjing, kucing dan kuda.

Seperti ETEC, EPEC juga menyebabkan diare tetapi mekanisme

molekular dari kolonisasi dan etiologi adalah berbeda. EPEC sedikit

fimbria, ST toksin (toksin yang tahan panas) dan LT toksin (toksin yang

labil terhadap panas), tetapi EPEC menggunakan adhesin yang dikenal

sebagai intimin untuk mengikat inang sel usus. Sel EPEC invasive (jika

memasuki sel inang) dan menyebabkan radang.

b. Escherichia coli Enterotoxigenic (ETEC)

Penyebab yang sering dari diare wisatawan dan sangat penting

menyebabkan diare pada bayi di Negara berkembang. Faktor kolonisasi

ETEC yang spesifik untuk menimbulkan pelekatan ETEC pada sel epitel

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

17/24

21

usus kecil. Lumen usus terengang oleh cairan dan mengakibatkan

hipermortilitas serta diare, dan berlangsung selama beberapa hari.

Beberapa strain ETEC menghasilkan eksotosin tidak tahan panas.

Prokfilaksis antibakteri dapat efektif tetapi bisa menimbulkan peningkatan

resistensi antibiotic pada bakteri, mungkin sebaiknya tidak dianjurkan

secara umum. Ketika timbul diare, pemberian antibiotik dapat secara

efektif mempersingkat lamanya penyakit. Diare tanpa disertai demam ini

terjadi pada manusia, babi, domba, kambing, kuda, anjing, dan sapi.

ETEC menggunakan fimbrial adhesi (penonjolan dari dinding sel bakteri)

untuk mengikat sel sel enterocit di usus halus. ETEC dapat

memproduksi 2 proteinous enterotoksin: dua protein yang lebih besar, LT

enterotoksin sama pada struktur dan fungsi toksin kolera hanya lebih

kecil, ST enterotoksin menyebabkan akumulasi cGMP pada sel target dan

elektrolit dan cairan sekresi berikutnya ke lumen usus. ETEC strains tidak

invasive dan tidak tinggal pada lumen usus.

c. Escherichia coli Enterohemorhagic (EHEC)

Menghasilkan verotoksin, dinamai sesuai efek sitotoksinya pada sel vero,

suatu sel hijau dari monyet hijau Afrika. Terdapat sedikitnya dua bentuk

antigenic dari toksin. EHEC berhubungan dengan kolitis hemoragik,

bentuk diare yang berat dan dengan sindroma uremia hemolitik, suatu

penyakit akibat gagal ginjal akut, anemia hemolitik mikroangiopatik, dan

trombositopenia. Banyak kasus EHEC dapat dicegah dengan memasak

daging sampai matang. Diare ini ditemukan pada manusia, sapi, dan

kambing.

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

18/24

22

d. Escherichia coli Enteroinvansive(EIEC)

Menyebabkan penyakit yang sangat mirip dengan shigellosis. Penyakit

sering terjadi pada anak-anak di negara berkembang dan para wisatawan

yang menuju ke negara tersebut. EIEC melakukan fermentasi laktosa

dengan lambat dan tidak bergerak. EIEC menimbulkan penyakit melalui

invasinya ke sel epitel mukosa usus. Diare ini ditemukan hanya pada

manusia.

e. Escherichia coli Enteroagregatif (EAEC)

Menyebabkan diare akut dan kronik pada masyarakat di negara

berkembang. Bakeri ini ditandai dengan pola khas pelekatannya pada sel

manusia. EAEC menproduksi hemolisin dan ST enterotoksin yang sama

dengan ETEC (Triatmodjo,1992).

3. Sepsis

Terjadi bila pertahanan hospes tidak adekuat, Escherichia colikemudian

bisa masuk peredaran darah dan menyebabkan sepsis. Bayi-bayi yang baru lahir

sangat peka terhadap sepsis karena Escherichia coli tidak memiliki antibody IgM.

Sepsis juga bisa terjadi sebagai efek sekunder dari ISK (Dzen, dkk., 2003)

4. Meningitis

Escherichia coli merupakan penyebab utama meningitis pada bayi,

disamping streptokokus grup B. Hampir 75% Escherichia coli dari kasus

meningitis memiliki antigen K1. Antigen ini bisa bereaksi silang dengan

polisakarida kapsuler grup B dari Neisseria meningitides (Dzen, dkk., 2003)

2.2.5 Penentu Patogenisitas

Escherichia coli terdiri atas beragam grup mikroorganisme yang dapat

menginfeksi berbagai sistem hospes dan memproduksi sejumlah besar faktor

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

19/24

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

20/24

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

21/24

25

2.3 Antibakteri

Antibiotika adalah segolongan senyawa, baik alami maupun sintetik yang

mempunyai efek menekan atau menghentikan suatu proses biokimia di dalam

organisme, khususnya dalam proses infeksi bakteri. Obat antibakteri mempunyai

susunan kimiawi dan cara kerja berbeda antara obat satu dan obat yang lainnya

(Brooks et al., 2004). Antibakteri mengganggu bagian-bagian bakteri yang peka,

yaitu:

1. Menghambat sintesis dinding sel

2. Menghambat sintesis protein

3. Menghambat sintesis asam nukleat

4. Antagonis metabolit (Dzen, dkk., 2003).

Antibiotika sering disebut bakteriostatik atau bakterisidal. Istilah

bakteriostatik menggambarkan suatu obat yang sewaktu-waktu menghambat

pertumbuhan mikroorganisme. Keberhasilan pengobatan ini sering bergantung

pada partisipasi mekanisme pertahanan tubuh inang. Istilah bakterisidal

digunakan untuk obat yang menyebabkan kematian organisme (Balows et al.,

1991).

2.4 Uji Kepekaan terhadap Antibakteri In Vitro

Penentuan aktifitas bahan antibakteri dapat dilakukan dengan dua metode

dasar, yaitu:

2.4.1 Metode dilusi

1. Dilusi Tabung

Tes ini dikerjakan dengan menggunakan satu seri tabung reaksi yang diisi

media cair dan sejumlah sel mikroba tertentu yang akan diuji. Kemudian masing-

masing tabung diisi dengan obat yang telah diencerkan secara serial.

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

22/24

26

Selanjutnya seri tabung diinkubasikan pada suhu 37C selama 18-24 jam dan

diamati terjadinya kekeruhan pada tabung. Konsentrasi terendah pada tabung

yang ditunjukkan dengan hasil biakan yang mulai tampak jernih (tidak ada

pertumbuhan mikroba) adalah KHM (Kadar Hambat Minimal) dari obat.

Selanjutnya biakan dari semua tabung yang jernih diinokulasikan pada media

agar padat, diinkubasikan, dan keesokan harinya diamati ada tidaknya koloni

mikroba yang tumbuh. Konsentrasi terendah pada biakan pada yang ditunjukkan

dengan tidak adanya pertumbuhan bakteri adalah KBM (Kadar Bunuh Minimal)

dari obat terhadap bakteri uji. Untuk menentukan KHM dapat juga dilakukan

dengan cara menggunakan medium agar padat yang disebut dengan metode E

test (Dzen, dkk., 2003).

2. Dilusi agar

Uji kepekaan antimikroba yang lain adalah dengan menggunakan metode

dilusi agar. Metode ini digunakan untuk menentukan konsentrasi minimum yang

dibutuhkan suatu bahan antimikroba untuk membunuh atau menghambat

mikroorganisme. Cara ini memiliki kelebihan dibanding metode lain karena

fleksibilitasnya. Fleksibilitasnya antara lain adalah format hasilnya dapat berupa

kuantitatif (KHM dalam satuan mikrogram per mililiter) maupun dalam bentuk

kategori (susceptible, moderately susceptible atau resistant) atau dapat

menggunakan keduanya. Keuntungan lain metode ini adalah kemampuannya

untuk mendeteksi berbagai pola resistensi yang mungkin tidak terdeteksi oleh

metode difusi cakram (Balows et al., 1991).

2.4.2 Metode difusi

Tes ini dikerjakan dengan menggunakan cahaya kertas saring yang

mengandung bahan anti mikroba yang telah ditentukan kadarnya. Cakram

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

23/24

27

kemudian ditempatkan pada media padat yang telah diberi bakteri uji. Setelah

diinkubasi, diameter are hambatan dihitung sebagai daya hambat obat terhadap

bakteri uji. Area hambatan yang terbentuk ditunjukkan sebagai daerah yang tidak

memperlihatkan adanya pertumbuhan bakteri disekitar cakram kertas saring

(Brooks et al., 2004).

Untuk mengevaluasi hasil uji kepekaan tersebut, apakah isolat mikroba

sensitif atau resisten terhadap obat, dapat dilakukan dua cara seperti berikut ini:

1. Cara Kirby Bauer

Dengan membandingkan diameter area jernih (zona hambatan) di sekitar

cakram dengan tabel standar yang dibuat oleh NCCLS (National Commitee for

Clinical Laboratory Standard). Dengan tabel NCCLS ini dapat diketahui kriteria

sensitif, sedang, atau resisten.

2. Cara Joan-Stokes

Dengan membandingkan radius zona hambatan yang terjadi antara

bakteri kontrol yang sudah diketahui kepekaannya terhadap obat tersebut

dengan isolat bakteri yang diuji. Dengan cara ini, prosedur uji kepekaan untuk

bakteri kontrol dan bakteri uji bersama-sama dalam satu piring agar (Dzen, dkk.,

2003).

2.5 Kadar Hambat Minimal (KHM) dan Kadar Bunuh Minimal (KBM)

Keefektifan antibakteri terhadap bakteri berhubungan dengan konsep KHM.

KHM adalah konsentrasi antibakteri terendah yang bisa menghambat

pertumbuhan bakteri. KBM adalah konsentrasi antibakteri terendah yang bisa

membunuh bakteri. Bakteri dikatakan mati apabila tidak tumbuh pada inokulasi

ke dalam medium kultur yang secara normal mendukung pertumbuhannya

(Greenwood, 1992).

7/22/2019 Cocor Bebek Bab2

24/24

28

KHM sangat penting dalam diagnosis laboratoris untuk mengkonfirmasi

resistensi mikroorganisme terhadap bahan antibakteri dan juga untuk memonitor

aktivitas bahan antibakteri baru. KHM biasanya berkenaan dengan pengukuran

laboratoris dasar dari aktivitas bahan antibakteri yang melawan bakteri (Brooks et

al., 2004).