Biokimia - Enzim Dan ELISA

7/24/2019 Biokimia - Enzim Dan ELISA

1/26

Makalah Praktikum Biokimia

FAKTOR-FAKTOR DAN APLIKASI KLINIS ENZIM DALAM

DARAH

Anggota Klom!ok"

Novia Ariella Rangkai 148114105

Maria Kusuma.P.W 148114106Jerry 148114108

Buian!o 14811410"

#a$riella %uliana.A.P 148114110

Pe!rus &amiani 'osan A(i 148114111

)in*en!ius &anang 14811411+

Klom!ok " #$%&

LABORATORI'M BIOKIMIA

FAK'LTAS FARMASI

'NI(ERSITAS SANATA DHARMA

)O*)AKARTA

+,$

1

Nilai Para,


2/26

BAB I

PENDAH'L'AN

I% LATAR BELAKAN*

-e!ia mak/luk /iu i $umi as!i !ersusun a!as selsel yang $ereran ak!i, alam reaksi

kimia sala/ sa!u *on!o/nya roses me!a$olisme. &alam roses me!a$olisme ini !en!unya

mem$u!u/kan 2a!2a! seer!i ro!ein kar$o/ira! vi!amin an $a/an lainnya un!uk mem$an!u

roses me!a$olisme i!u seniri.

3n2im meruakan $iomolekul ro!ein yang irouksi sel /iu yang iguanakan un!uk

mengka!alis reksi kimia yang sesi,ik. 3n2im se$agai ka!alisa!or $eker(a un!uk memer*ea! reaksi

kimia !ana iku! $ereaksi se/ingga !iak !er(ai eru$a/an s!ruk!ur ari en2im i!u seniri. Ka!a

en2im $erasal ari $aasa %unani yai!u 3nalam an 2yme$a/an aonan ro!i yang $erar!i sesua!u

yang !eraa! i alam ragi. Komonen u!ama en2im aala/ ro!ein. 'ai !iak semua ro!ein

$er!inak se$agai en2im. 3n2im i$en!uk alam ro!olasma sel.

3n2im seniri meruakan olimer $iologik yang menga!alisis le$i/ ari sa!u roses inamik

yang memungkinkan ke/iuan seer!i yang ki!a kenal sekarang. si,a!si,a! en2im un sanga! k/as

sala/ sa!unya yai!u sa!u en2im /anya memiliki sa!u su$s!ra!. -ala/ sa!u ker(a en2im aala/ un!uk

mengkoorinasi reaksi me!a$olism i !u$u/. le/ karena i!u en2im i!u sanga! $erengaru/ !er/aa

reaksireaksi kimia alam !u$u/. Ke!ika !er(ai gangguan ,isiologis alam !u$u/ maka en2im un

akan mengalami kaar alam !u$u/. -emen!ara alam keaaan normal maka reaksireaksi kimia

akan $er(alam se*ara !era!ur.

II% R'M'SAN MASALAH

1. Aa sa(a ,ak!or ,ak!or yang memengaru/i kaar en2im alam ara/7serum

+. Bagaimana alikasi klinis emeriksaan en2im alam ara/ i (an!ung ankreas /a!i

o!o! gin(al an lam$ung

9. :ungsi en2im alam !u$u/ se*ara sesi,ik !er/aa organorgan !erse$u!

III% T'.'AN'u(uan ari makala/ ini yai!u;

1. Menge!a/ui an mema/ami ,ak!or ,ak!or yang memengaru/i kaar en2im alam

ara/7serum.

+. Menge!a/ui an mema/ami alikasi klinis emeriksaan en2im alam ara/ i

(an!ung ankreas /a!i o!o! gin(al an kelen(ar ankreas.

BAB II

PEMBAHASAN

I% .ANT'N* DAN HATI

2


3/26

Berasarkan -a*/er an M*P/erson ak!a! e/irogenase&5=.

1. :os,a!ase alkali P=

A>P meruakan en2im yang irouksi !eru!ama ole/ ei!el /a!i an os!eo$las! en2im ini

$erasal ari usus !u$ulus roksimal gin(al lasen!a an kelen(ar susu yang seang mem$ua! air

susu. :os,a!ase alkali isekresi melalui saluran emeu. 3n2im akan meningka! alam serum

aa$ila aa /am$a!an aa saluran emeu


4/26

+. -#P' 'akilaki ; 0507> Peremuan ; 096 7>

Masala/ klinis

Peningka!an -#' D+0 kali normal ; /ea!i!is viral aku! nekrosis /a!i semua

menge*ek aaka/ aa enyaki! ini

Peningka!an 910 kali normal in,eksi mononuklear /aa!i!is kronis ak!i, sum$a!an

emeu eks!ra /ea!i* sinrom reye in,ark miokara*nne* sirosis

$iliaris

9. -#'


5/26

kerusakan /a!i meskiun s!a!us gi2i eminum i!u $aik. Kaar ##' yang !inggi !er(ai

se!ela/ 1++4 (am $agi orang minum alko/ol alam (umla/ yang $anyak an mungkin

akan !e!a meningka! selama +9 minggu se!ela/ asuan alko/ol i/en!ikan. 'es ##'

ianang le$i/ sensi!i, ari aa !es ,os,a!ase alkalis.

Me!oe emeriksaan un!uk !es ##' aala/ sek!ro,o!ome!ri engan menggunakan

sek!ro,o!ome!er. Ba/an emeriksaan yang igunakan $erua serum a!au lasma /earin.

Nilai ru(ukan ;

&e?asa ; ria 15"0 7> ?ani!a 1080 7>

Anakanak ; $ayi $aru la/ir 5@ le$i/ !inggi ariaa e?asa rema!ur ; 10@

le$i/ !inggu ari e?asa anak ; ria 15"0 7> ?ani!a 1080 7>

Masala/ klinis ;

Peningka!an kaar

a. -irosis sel /a!i /ea!i!is /ierara!iroiisme kanker koles!asis aku!

mononukleosis in,eksiosa /emokroma!osis &M s!ea!osis /a!i in,ark miokar

aku! EC: ankrea!i!is aku! eileso sinrom ne,ro!ik

$. Pengaru/ o$a! ; ,eni!onin ,eno$ar$i!al aminoglikosia ?a,arin.

3n2im yang !eraa! aa (an!ung aa ;

1. Krea!in ,os,okinase

Krea!in kinase

Wani!a ; 5+5 g7ml a!au +5150 7>

Anak >akilaki ; 0F0 7>

Anak Wani!a ; 050 7>

Bayi Baru >a/ir ; 65580 7>

ily .R. +004=

+. soen2im EKMB

Aa 9 isoen2im ari krea!in ,os,okinase yang !erli/a! aa elek!ro,oresis yai!u MM BB

MB. soen2im MM an BB !iak !erle!ak aa (an!ung seangkan isoen2im MB !erle!ak

aa o!o! (an!ung usus lia/ an o!o! ia,ragma !e!ai alam (umla/ yang ke*il.

5


6/26

Pemeriksaan isoen2im EKMB alam serum meruakan !es aling sesi,ik aa nekrosis

o!o! (an!ung EKMB meningka! alam +9 (am se!ela/ inse! in,ark un*aknya aa 101+

(am an umunya men(ai normal alam +4 (am. n!uk memeriksa kaar yang !eraa!

alam samel igunakan me!oe elek!ro,oresis. !o! (an!ung $erisi 60 G MM an 40 G

MB. Nilai normal kurang ari 10 7>. Nilai D 1019 7> a!au D 5G !o!al EK menun(ukan aanya

eningka!an ak!i,i!as rouksi en2im.

Klinis ;

Peningka!an EPKMB ;

Paa in,ark miokarium angina angina ek!oris oerasi (an!ung iskemik (an!ung

miokari!is /iokalemia an e,$rilasi (an!ung

ily .R. +004=.

9. -erum #lu!ami* @aloa*e!i* 'ransaminase

3n2im ini ileaskan ole/ sel o!o! miokarium yang rusak a!au ma!i. Konsen!rasi alam

serum meningka! alam 81+ (am se!ela/ inse! in,ark men*aai in*aknya aa 1896 (am

an mulai !ururn kem$ali se!ela/ 94 /ari. 3n2im ini (uga !eraa! aa /a!i an o!o! skele!

se/ingga eningka!an kaar en2im ini meruakan inika!or yang lema/ alam menegakkan

iagnosa. &iagnosa -#' aa! menggunakan me!oe elek!ro,oresis yang aa! memeriksa

engan akura!. Penye$a$ lain meningka!nya kaar -#' aala/ gagal (an!ung engan

$enungan aa /a!i. Nilai ru(ukan un!uk -#'7A-' ;

>akilaki ; 050 7>

Peremuan ; 095 7>

ily .R. +004=.

4. >a*!i* e/yrogenase &C7>&=

>&C mengka!alisis eru$a/an reversi$le lak!a! men(ai iruva! enggunakan NA&

se$agai ko,ak!or. >&C /amir !eraa! i semua (aringan !u$u/. >ima isoen2im yang

meruakan /asil ari su$uni! >&C aala/ >&1>&5. >&1>&+ kaarnya !inggi aa o!o!(an!ung. Paa in,ark miokar angina konsen!rasi akan meningka! alam +448 (am

men*aai un*aknya alam 96 /ari se!ela/ onse! an kem$ali normal se!ela/ 814 /ari.

>&C memunyai 5 isoen2im. soen2im >&C1 le$i/ sesi,ik un!uk kerusakan o!o! (an!ung

seangkan >&C4 an >&C5 un!uk kerusakan /a!i an o!o! skele!. &iagnosa aa!

menggunakan me!oe elek!ro,oresis yang aa! memeriksa engan akura! Nilai normal; 80

+40 7> ily .R. +004=

5. Al/a Cyro@y$u!yri* &e/yrogenase

6


7/26

ni se$enarnya $ukan en2im yang sesi,ik un!uk in,ark miokarium angina.

soen2im >&C1 an >&C + akan $ereaksi le$i/ $esar engan su$sa! al/a/yro@y

$u!yra!e ariaa >&C4 an >&C5 se/ingga emeriksaan ak!ivi!as Al/a /yro@y$u!yri*

e/yrogenase aa! mem$eakan an!ara >&C1 an >&C+ engan >&C9 an >&C4.

Paa in,ark miokar angina ak!ivi!as ari en2im ini akan meningka! an men*erminkan

ak!ivi!as >&C yang meningka! ily .R. +004=.

6. 'roonin

Meruakan komleks ro!ein o!o! glo$uler ari i!a yang meng/am$a! kon!raksi

engan mem$lokae in!eraksi ak!in an myosin. Aa$ila $ersenya?a engan EaHH akan

mengu$a/ osisi molekul !roomiosinse /ingga !er(ai in!eraksi ak!inmiosin. Pro!ein

regula!or ini !erle!ak i alam aara!us kon!rak!il miosi! an menganung 5 su$ uni! engan

!ana E '. Peningka!an !roonin men(ai er!ana osi!i, aanya *eera sel miokariuman o!ensi!er(ainya angina. Nilai normal I 016 ug7>

'roonin aala/ en2im (an!ung yang sanga! en!ing karena memainkan eran sen!ral

alam *ara kon!rak o!o! (an!ung. 'roonin mengon!rol $agaimana o!o! (an!ung mereson

sinyal yang i!erima un!uk kon!raksi an menga!ur gaya yang kon!raksi o!o!

Peremuan ; 096 7>


8/26

aenosin i,os,a! a/ir ; 65580 7>Krea!in kinase meruakan molekul imerik yang !eriri ari seasang monomer $er$ea

yang i se$u! M an B se/ingga !eraa! 9 isoen2im EK yang $er$en!uk; EK1


9/26

+. >ak!a! e/irogenase

>ak!a! e/irogenase & >&C= $er,ungsi se$agai ka!alis eru$a/an reversi$el lak!a!

men(ai iruva! engan menggunakan NA&H se$agai ko,ak!or. >& /amir !eraa! aa

semua (aringan. >& meruakan sua!u molekul !e!rame!rik yang menganung ema! su$uni!

ari ua $en!uk yang mungkin&1>&5. >& yang !eraa!

aa o!o! (an!ung an eri!rosi! aala/ >&1 an >&+ seangkan >&5 $anyak !eraa! aa

o!o! rangka an /a!i. Banyak !eknik yang aa! igunakan un!uk mengukur masingmasing

isoen2im >&. Me!oe yang sering igunakan aala/ elek!ro,oresis engan >&1 $ermigrasi

aling anoal an >&5 aling ka!oal ini !er(ai aki$a! er$eaan aa su$uni! C am M.

Kaar erkiraan G ari !o!al yang normal !eraa! alam serum un!uk >&4 aala/ +4

seangan >&5 aala/ 0515.

9. Alolase

Alolase aala/ sua!u en2im glikoli!ik yang menguraikan ,ruk!osa16i,os,a! men(ai

ua molekul !ri,osa ,os,a! alam ume!a$olisme glukosa. 3n2im ini !eris!ri$usi isemua

(aringan an meningka! alam serum se!ela/ enyaki! a!au *eera o!o!

rangkakarsinomame!as!a!i*

megalo$las!ik anemia /emoli!ik a!au in,rak (aringan se*ara umum.Karena sanga! $eragam

alam eningka!an kaar maka !iak !erlalu sesi,ik un!uk iagnosis.

Alolase aa! i!erakan aa enyaki! eraangan aa o!o!e/ninger++5" m7> a! 9 Funi!s7l Anakanak ; aro@ima!ely + aul! values

Bayi $aru la/ir ; aro@ima!ely 4 aul! values

4. Pankreas

Pankreas meruakan organ !u$u/ is!ime?a yang $er,ungsi gana se$agai kelen(ar

eksokrin an enokrin. -e$agai kelen(ar eksokrin ankreas mem$an!uan $ereran en!ing

alam sis!em en*ernaan engan mensekresikan en2imen2im ankreas seer!i amilase

liase an !risin. -e$agai kelen(ar enokrin ankreas ikenal engan rouksi /ormon

/ormon insulin an glukagon yang $ereran alam me!a$olisme glukosa. :ungsi enokrin

9


10/26

ankreas ilakukan ole/ ulauulau >anger/ans yang !erse$ar i an!ara $agian eksokrin

ankreas


11/26

III% Kln/ar !ro0tat

Meruakan sala/ sa!u organ sis!em rerouksi aa ria yang $eraa i $a?a/ kanung

kemi/$er,ungsi un!uk mensekresikan *airan $er?arna u!i/ kea$ua$uan yang $ersi,a! $asa. Eairan

ini isekresikan ke alam saluran e(akulasi an menyum$angkan seki!ar 90G ari seluru/ volume

semen. Eairan kelen(ar ros!a! akan $ersa!u engan *airan ari vesikula seminalis an akan men(ai

!ema! /iu an $ergeraknya serma. Eairan yang isekresikan organ ini !eriri a!as ,os,olii

asam si!ra!


12/26


13/26

I(% Tulang

'ulang aala/ (aringan ak!i, yang se*ara me!a$olik mengalami remoeling se*ara kon!inyu

ole/ ua roses yai!u em$en!ukan


14/26

-eangkan enurunan a!au kaar A>P !ulang yang sanga! rena/ !er(ai aa gangguang

me!a$olik /io,os,a!asia. &e,isiensi seng P !ulang sanga!

!iak s!a$il an se!ela/ emanasan mungkin /anya menyisakan ak!ivi!as 10+0G ari ak!ivi!as

semula. &ari in/i$isi kimia?i engan ,enilalanin P


15/26

DAFTAR P'STAKA

Anonim+01+, Penyebab dari Kanker Prostat, http://penyebabprostat.com/ iakses !anggal 19

Novem$er +015

Anonim, 2014, Insulin,

https://labtestsonline.org/unerstaning/anal!tes/insulin/tab/test/,

ia"ses tanggal 20 #o$ember 2015, pu"ul 01.15.

Eam$ellA.N. Jane B. >a?ren*e#. +004Biologi Jili 5!/ e. Jakar!a 3rlangga /al.156.

%hristine,%., &a'(uel!n, %., 2015, Amylase and Lipase Tests,

http://))).healthline.'om/health/am!lase*an*lipase*tests, diakses

tanggal 20 November 2015, pukul 00.05

Ganong, . !., 1""5, !isiologi #edokteran, $disi 1%, $G&, 'akarta, (al 5).

Greenspan, !.*., and !ors(am, 1"+, -asi and &rinial $ndorinology, Large

/auren Asia, *ingapore, pp. 1.

Guyton, A. &., 1"), Tetbook o3 /edial 4(ysiology, - saunders &ompany,

London, pp. %5.

Jeremy 3. K. +015Alkaline Phospatase /!!;77???.arkslo?.*om7/!ml7alkaline/osa!ase.

/!ml iakses !angal 1" Novem$er +015.

Ku*/el P. an Rals!on #.B. +006Biokimia Jakar!a ; 3rlangga.

>ily .R. +004Penyakit Jantung Koroner Buku Aar Kardiologi. Jakar!a; :akul!as Keok!eran

niversi!as nonesia .15"165.

Maer-.-. Mi*/aelW.+01+!uman Biology 19!/ e. M* #ra? Cill Ne? %ork .++1.

15
http://penyebabprostat.com/http://penyebabprostat.com/https://labtestsonline.org/understanding/analytes/insulin/tab/test/http://www.healthline.com/health/amylase-and-lipase-testshttp://www.darkslow.com/html/alkaline_phospatasehttps://labtestsonline.org/understanding/analytes/insulin/tab/test/http://www.healthline.com/health/amylase-and-lipase-testshttp://www.darkslow.com/html/alkaline_phospatasehttp://penyebabprostat.com/


16/26

Priyana A +00F Peran Pertanda "ulang #alam $erum Pada "atalaksana %steoporosis. niversa

Mei*ina Jakar!a /al.+6;15+15".

Ronal A. -a*/er. Ri*/ar A. M*P/erson. +00+ "inauan Klinis !asil Pemeriksaan &ab 3isi

11 Pener$i! Buku Keok!eran 3#E Jakar!a /al.950951.

-a*/er R.A. an M*P/erson R.A. +00+ "inauan Klinis !asil Pemeriksaan &aboratatorium

eisi 11 Jakar!a ; 3#E /al. 941958.

+aran!a, ., 2014, Insulin, http://emei'ine.mes'ape.'om/arti'le/2089224*

o$er$ie), ia"ses tanggal 20 #o$ember 2015, pu"ul 01.00.

-ei$el M.J. +005Biochemical 'arkers of Bone "urno(er Part ) : Biochemistry And *ariability

Elin Bio*/em Rev Aus!ralia .+6;"F1++.

-inger :.R. 3yre &.R. +008 +sing Biochemical 'arkers %f Bone "urno(er )n linical Practice .

Elevelan Elini* Journal -A .F5F9"F50.

-uran!oA. +011 'erai 3n2im Pener$i! Pene$ar Plus Jakar!a /al. 565".

%uaniayan!i .-. +005 Aktifitas Alkaline Phosphatase pada Proses Kesembuhan Patah "ulang

-emur dengan "erapi ao#osis "inggi Pada "ikus Jantan. Meia Keok!eran Ce?an

vol.+1 -ura$aya /al.+11518.

16
http://emedicine.medscape.com/article/2089224-overviewhttp://emedicine.medscape.com/article/2089224-overviewhttp://emedicine.medscape.com/article/2089224-overviewhttp://emedicine.medscape.com/article/2089224-overview


17/26

Makalah Praktikum Biokimia

ALAT ELIZA

1Enzym-Linked Immunosorbent Assay2

Anggo!a Kelomok;

Novia Ariella Rangkai 148114105

Maria Kusuma.P.W 148114106Jerry 148114108

17


18/26

Buian!o 14811410"

#a$riella %uliana.A.P 148114110

Pe!rus &amiani 'osan A(i 148114111

)in*en!ius &anang 14811411+

Kelomok ; E1.9

LABORATORI'M BIOKIMIA

FAK'LTAS FARMASI'NI(ERSITAS SANATA DHARMA

)O*)AKARTA

+,$

BAB I

PENDAH'L'AN

A% Tu/uan

n!uk menge!a/ui rinsi ker(a 3>-A -A


19/26

BAB II

ALAT DAN BAHAN

A% Alat 3an Bahan1= Mikro!i!er engan *ekungan "6 $ua/ -A aala/ an!igen yang !ela/ !erika! aa ?aa/ an!i$oy yang akan iu(i -A menyeiakan in,ormasi mengenai

anali! !e!ai !iak aa in,ormasi mengenai si,a! $iokimia anali! yang iu(i. le/ karena i!u ierlukan u(i

lain un!uk menaa!kan in,ormasi !erse$u! -A se*ara umum yakni elaisan ining mikro!i!er ole/ an!igen meng/am$a! semua sisi yang

!iak !erika! un!uk men*ega/ /asil yang !iak vali enam$a/an an!i$oy rimer enam$a/an an!i$oy

sekuner yang !erkon(ugasi engan en2im enam$a/an su$s!ra! en2im se$agai inika!or e/ninger +004=.

'eraa! $e$agai ma*am me!oe 3>-A yakni me!oe direct, indirect, sandwich, competiti(e.

19


20/26

$% Tknik ELISA Lang0ung1Direct2

'eknik 3>-A ini !ermasuk !eknik yang aling seer/ana yang $iasa igunakan un!uk

mengukur konsen!rasi an!igen aa samel. Paa me!oe ini an!igen !era$sor$si aa ?aa/ lalu

an!i$oi rimer yang $erika!an engan en2im i!am$a/kan. le/ karena i!u !iak i$u!u/kan an!i$oi

sekuner


21/26

-u$s!ra! yang i!am$a/kan ala/ su$s!ra! yang aa! $ereaksi enga en2im signal lalu

su$s!ra! akan $ereaksi engan en2im yang !ela/ !er!au! engan an!i$oi sekuner sesi,ik

yang !ela/ $erin!eraksi engan an!i$oi yang iinginkan reaksi ini akan menm$ulkan signal

yang aa! ie!eksi. -u$s!ra! yang igunakan aala/ su$s!ra! yang *o*ok un!uk en2im

kon(ugasi an!i$oi agar aa! memungkinkan !er(ainya engem$angan reaksi ?arna

melalui ka!alisis en2im.

/= Penam$a/an >aru!an Peng/en!i Reaksi

-e!ela/ reaksi i$iarkan $er(alan alam (angka ?ak!u !er!en!u maka reaksi erlu i/en!ikan

engan mengu$a/ C sis!em. >aru!an eng/en!i i$erikan un!uk meng/en!ikan reaksi en2im

su$s!ra! alam !eknik 3>-A se!ela/ men*aai in!ensi!as ?arna yang iinginkan yang

meruakan inikasi ari !ingka! anali!.

i= &i$a*a a$sor$ansinya engan em$a*a la!.

-A langsung aala/ *ea! an !iak !eraa! reaksi silang enganan!i$oi sekuner. -eangkan kelema/an me!oe 3>-A langsung yakni /arga ela$elan an!i$oi

rimer yang ma/al !iak aa ,leksi$ili!as emili/an an!i$oi rimer an sinyal amli,ikasinya seiki!

ser!a mem$u!u/kan ?ak!u lama un!uk engu(ian engan $anyak an!i$oi karena enanaan an!i$oi

/arus sa!u er sa!u.

-A indirect meruakan !eknik 3>-A yang aling seer/ana. Paa !eknik ini yang

ie!eksi an iukur konsen!rasinya aala/ an!i$oi. 3>-A indirectini menggunakan sua!u an!igen

sesi,ik


22/26

iisi engan laru!an yang menganung an!igen sesi,ik an!igen sesi,ik akan menemel

aa $agian ining lu$ang mikro!i!er selama inku$asi alam inku$a!or aa su/u 9F0E

selama +4 (am.

$= Pen*u*ian

Mikro!i!er yang !ela/ iinku$asi i$ilas un!uk meng/ilangkan an!igen $e$as yang !iak

menemel aa ining lu$ang mikro!i!er. Pem$ersi/a ilakukan engan *ara mengisi anmengosongkan lu$ang mikro!i!er engan $u,,er ,os,a! salin ne!ral aru!an eng/en!i i$erikan un!uk meng/en!ikan reaksi en2im



22


23/26

Kelema/an me!oe indirect3>-A aala/ aa$ila i$aningkan engan 3>-A direct 3>-A

indirect mem$u!u/kan ?ak!u yang rela!i, le$i/ lama karena mem$u!u/kan + kali ?ak!u inku$asi.

-eangkan kele$i/an me!oe 3>-A indirect:

a. 'eraa! $er$agai ma*am variasi an!i$oi yang !er(ual se*ara komersial iasar.

$. 'ingaka! sensivi!as yang !inggi.*. mmunoreak!ivi!as ari an!i$oi yang iinginkan

signal ke an!i$oi sekuner karena enau!an ilakukan aa ?aa/ $er$ea.

-A $andwich;

a= Eoa!ing Pla!e 3>-A

>angka/ er!ama aa 3>-A sandwich aala/ mengisi mikro!i!er engan laru!an yang

menganung an!i$oi enangka a!au an!i$oi rimer se/ingga an!i$oi ini aa! menemel

aa ining lu$ang mikro!i!er. &an iinku$asikan selama +4 (am.

$= 'e/a Pen*u*ian

>angka/ selan(u!nya ala/ em$ilasan mikro!i!er engan menggunakan $u,,er ,os,a! salin

ne!ralaru!an samel yang menganung an!igen yang iinginkan imasukkan kealam lu$ang

mikro!i!er agar !er(ai in!eraksi an!ara an!i$oi enangka engan an!igen yang iinginkan.

&iinku$asikan selama 1 (am aa su/u 9F0E.

e= 'a/a Pen*u*ian

Mikro!i!er yang !ela/ iinku$asi i$ilas kem$ali un!uk mem$uang an!igen yang !iak

$erin!eraksi engan an!i$oi yang aa aa ining mikro!i!er. Pen*u*ian ilakukan engan

*ara mengisi an mengosongkan lu$ang mikro!i!er menggunakan $u,,er ,os,a! salin ne!ral


24/26

Mikro!i!er i$ilas lagi menggunakan $u,,er ,os,a! salin ne!rl aru!an eng/en!i i$erikan un!uk meng/en!ikan reaksi en2im



Kelema/an me!oe 3>-Asandwich aala/ $ila i$aningkan engan me!oe 3>-A#irecta!au me!oe 3>-A )ndirect me!oe 3>-A $andwich memerlukan ?ak!u yang le$i/ lama karena

me!oe ini mem$u!u/kan inku$asi se$anyak 9 kali ser!a me!oe ini /anya aa! igunakan un!uk

mene!eksi an!igen yang $ersi,a! mul!ivalen!. -eangkan kele$i/an me!oe 3>-A $andwich aala/

me!oe ini *enerung memiliki sesi,i!as yang rela!i, le$i/ !inggi karena aa elaksanaannya

an!igenyang iinginkan /arus aa! $erin!eraksi engan + (enis an!i$oi yai!u an!i$oi rimer an

an!i$oi sekuner -A kome!i!i, ise$u! (uga 3>-A in/i$i!or i$ua! agar an!igen murni $erkome!isi

engan an!igen aa samel un!uk $erika!an engan an!i$oi yang !ela/ menemel aa ining

mikro!i!er. -emakin !inggi konsen!rasi an!igen aa samel semakin ke*il (umla/ an!igen $erla$el yang

!erika! aa an!i$oi


25/26

'a/a!a/a 3>-A kome!i!i,;

a= Eoa!ing la!e 3>-A

Eoa!ing aa! i*aai melalui roses asorsi asi, ari an!igen ke la!e u(i. Me!oe

em$ua!an laisan la!e yai!u aala/ enam$a/an +10 g7ml ari ro!ein yang ilaru!kan

alam $u,,er $asa seer!i $u,,er ,os,a! salin a!au $u,,er kar$ona!. Per!ama!ama mikro!i!er

iisi engan laru!an yang menganung an!igen sesi,ik an!igen sesi,ik akan menemel

aa $agian ining lu$ang mikro!i!er selama inku$asi alam inku$a!or aa su/u 4oE

selama +4 (am a!au selama + (am aa su/u ruangan

$= &i*u*i ua kali engan PB-

*= &i!am$a/kan $u,,er $lo*king an iinku$asi +4 (am aa su/u ruangan

= &i*u*i ua kali engan PB-

e= &i!am$a/kan s!anar a!au laru!an samel aa mikro!i!er

,= 'am$a/kan laru!an an!igen kon(uga! aa mikro!i!er an iinku$asi selama + (am aa su/u

ruangan

g= &i*u*i ua kali engan PB-

/= &i!am$a/kan su$s!ra! ini*a!or


26/26

OKenney R. Byrne M. O:again E. Berns #. 1""0 A Revie? o, 3n2ymmmunoassay an a

&es*ri!ion o, a Eome!i!ive 3n2ym>inke mmunosor$en! Assay ,or !/e &e!e*!ion o,

mmunoglo$ulin Eon*en!ra!ions, Biochemical ducation, relan )ol. 18 No. 9.

-ylves! >. +010 An )ntroduction to &)$A /!!;77???.a$sero!e*.*om7resour*es7elisa!e*/ni*al

resour*esan!rou$es/oo!ing7anin!rou*!ion!oelisa./!ml iakses 1F Novem$er +015.

'/e 'eam o, Biology Pro(e*! o, Ari2ona niversi!y +000 &)$A Acti(ity

/!!;77???.$iology.ari2ona.eu7immunology7a*!ivi!ies7elisa7main./!ml iakses aa 18

Novem$er +015.

Walker J.M. an Raley R. +008'olecular Biomethods !andbook -ringer -*ien*e Ne? %ork

. 66866".

Biokimia - Enzim Dan ELISA

Documents

Transcript of Biokimia - Enzim Dan ELISA