4. pengendapan protein secara denaturasi ireversibel

a. Pengendapan dengan pereaksi alkaloid

tujuan :

memisahkan protein dengan memisahkannya dengan senyawa yang

bereaksi dengan protein tersebut

Dasar :

“Pereaksi alkaloid” adalah asam-asam organik yang dapat

mengendapkan alkaloid serta protein. Pengendapan terjadi karena alkaloid dan

protein mengandung nitrogen trivalen. Asam trikloroasetat (TCA=tricgloracetic

acid ) sering dipakai untuk deproteinisasi (penyingkiran protein) dari suatu

bahan. Asam sulfasalisilat sering dipakai unatuk melacak ada tidaknya protein

dalam urin patologis.

Bahan dan pereaksi :

1. SERUM

2. Asam triklosasetat (TCA: trichlos acetic acid) 10%

3. Asam sulfasalisilat 3%

Cara kerja dan hasil :

Siapkan dua tabung reaksi yang bersih dan kering. Lakukan prosedur

yang tertera dalam table 4.a.

Tabel 4.a.

Pengendapan protein dengan menggunakan pereaksi alkaloid

Tabung 1 2

Serum 1 ml 1 ml

TCA 10% 1 ml 1ml

As. Sulfasalisilat - -

Endapan ada / tidak ada Ada Ada

Kesimpulan :

Dari percobaan ini dapat disimpulkan bahwa serum merupakan protein

yang mengandung nitrogen trivalent yang apabila bereaksi dengan TCA atau

asam sulfasalisilat akan mengendap.

b. Pengendapan protein dengan logam berat

tujuan :

memperlihatkan, bahwa logam berat mengendapkan protein secara

denaturasi ireversibel.

Dasar :

Protein bermuatan negatif membentuk garam dengan kation logam berat

menjadikan protein terdenaturasi dan mengendap

Bahan dan pereaksi :

1. Putih telur

2. larutan H9CL2 1%

3. Larutan Pb-asetat

Cara kerja dan hasil :

Siapkan dua buah tabung reaksi, lakukan prosedur yang tertera dalam

table 4.b.

Table 4.b.

Pengendapan protein dengan logam berat

Tabung 1 2

Putih telur 1 ml 1 ml

H9CL2 Tetes demi tetes -

Pb-asetat - Tetes demi tetes

Endapan ada/tidak ada Ada Ada

Kesimpulan :

Protein apabila bereaksi dengan logam berat maka akan mengendap.