ANALISIS LIPID

Kelompok 1Florensia Indan Stepani (0806321575 )Nurhafizah Putri (0806460540) Pauline Leon Artha (0806460553)Prima Anggreni (0806460566)

Pokok Pembahasan1. Lipid2. Jenis Uji pada Lipid3. Analisis Kualitatif4. Analisis Kuantitatif

Apa itu Lipid?Lipid merupakan senyawa organik berminyak atau berlemak yang tidak larut dalam air, yang dapat diekstrak dari sel dan jaringan oleh pelarut nonpolar, seperti kloroform, benzol atau eter.Lipid disimpan didalam tubuh dalam bentuk trigliserida

Struktur molekulnya kaya akan rantai unsur karbon(-CH2-CH2-CH2-)sehingga lemak mempunyai sifat hydrophob.

Fungsi Lipid• Penyimpan energi• Transportasi metabolik sumber

energi• Sumber zat untuk sintese bagi

hormon, kelenjar empedu serta menunjang proses pemberian signal signal transducing

• Struktur dasar atau komponen utama membran semua jenis sel.

• Pelindung organ tubuh dan Alat angkut vitamin larut lemak

• Pembentukan sel dan Sumber asam lemak esensial

Klasifikasi Lipid berdasarkan kelas dari lemak

Lipid berdasarkan Struktur• Lipid dengan rantai

hidrokarbon terbuka.asam lemak, TAG, spingolipid, fosfoasilgliserol, glikolipid

• Lipid dengan rantai hidorkarbon siklissteroid (kolesterol)

Menurut Bloor, lipid dapat diklasifikasikan sebagai berikut :• Lipid sederhana :

– lemak netral (monogliserida, digliserida, trigliserida),– ester asam lemak dengan alkohol berberat molekul

tinggi• Lipid majemuk (kompleks)

– Fosfolipid : Fosfolipid + H2O menghasilkan asam lemak + alkohol + asam fosfat + senyawa nitrogen.

– Glikolipid : Glikolipid + H2O menghasilkan asam lemak + karbohidrat + sfingosin.

• Lipid turunan: senyawa-senyawa yang dihasilkan bila lipid sederhana dan lipid kompleks mengalami hidrolisis.  – asam lemak, sterol (kolesterol, ergosterol,dsb),

alkohol padat, aldehid, keton bodies.

ASAM LEMAKAsam lemak merupakan penyusun utama minyak nabati atau lemak dan merupakan bahan baku untuk semua lipida pada makhluk hidup.Asam lemak tidak lain adalah asam alkanoat atau asam karboksilatberderajat tinggi (rantai C lebih dari 6). Asam lemak merupakan penyusun utama lipid (dalam 100 gram lipid terdapat 95% asam lemak)

Struktur umum asam lemak:• Kepala : hidrofobik• Ekor : hidrofilikSehingga asam lemak dikatakan mempunyai sifat amfipatik

TRIGLISERIDA (Lemak Netral)

Trigliserida merupakan suatu ester gliserol yang terbentuk dari 3 asam lemak dan gliserol (R, R', R"). Apabila terdapat satu asam lemak dalam ikatan dengan gliserol maka dinamakan monogliserida

Fungsi utama Trigliserida adalah sebagai zat energi. Lemak disimpan di dalam tubuh dalam bentuk trigliserida.

.

• Apabila sel membutuhkan energi, enzim lipase dalam sel lemak akan memecah trigliserida menjadi gliserol dan asam lemak serta melepasnya ke dalam pembuluh darah. Oleh sel-sel yang membutuhkan komponen-komponen tersebut kemudian dibakar dan menghasilkan energi, karbondioksida (CO2), dan air (H2O).

Lanjutan TrigliseridaLemak disimpan di dalam tubuh dalam bentuk trigliserida. Apabila sel membutuhkan energi, enzim lipase dalam sel lemak akan memecah trigliserida menjadi gliserol dan asam lemak serta melepasnya ke dalam pembuluh darah. Oleh sel-sel yang membutuhkan komponen-komponen tersebut kemudian dibakar dan menghasilkan energi, karbondioksida (CO2), dan air (H2O).

FOSFOLIPIDFosfolipid merupakan golongan senyawa lipid dan merupakan bagian dari membran sel makhluk hidup bersama dengan protein, glikolipid, dan gliserol.

Fosfolipid terdiri atas empat komponen:•Asam lemak•Gugus fosfat•Alkohol yang mengandung nitrogen, dan•Suatu kerangka ( gliserol dan 2 gugus asil)

Fungsi Fosfolipid yaitu bahan penyusun membran sel , sebagaisurfaktan paru-paru yang mencegah perlekatan dinding alveoli paru-paru sewaktu ekspirasi

Kelompok molekul polar, di perlihatkan dengan warna merah.U dindikasi mengandung bagian molekul hidrofobik, di perlihatkan dengan warna biru.

SFINGOLIPIDSfingolipid dapat ditemukan di hampir seluruh jaringan manusia. Konzentrasinya yang tertinggi walaupun demikian terdapat di jaringan saraf sistem saraf pusat, khususnya di zat putih di otak.• Fungsi Sfingolipid yaitu komponen utama dari [membran myelin] dari sel saraf

2. Jenis Uji pada LIPIDTujuan :• Mengetahui sifat yang terdapat pada

lipid ( kelarutan, kepolaran, kejenuhan lipid dan ketengikan lipid)

• Analisis lipid mempunyai 2 metode, yaitu :

1.Analisis Kualitatif2.Analisis Kuantitatif

Analisis Kualitatif• Analisis kualitatif merupakan analisis

kimia ada/tidaknya komponen radikal, ion kation/molekul Analisis kualitatif lipid, dilakukan dengan 4 cara, yaitu :

Uji kelarutan lipidUji AkroleinUji ketidakjenuhan lipidUji ketengikan

Uji kelarutan LIPIDTujuan • Pengujian kepolaran LIPID

Parameter • Lipid bersifat polar ( larut dalam air

dan alkohol )• Lipid bersifat nonpolar ( larut dalam

kloroform dan eter )

Uji Kelarutan LIPID

• Hampir semua minyak dan lemak larut pada pelarut nonpolar

( kloroform dan eter )

Uji AkroleinTujuan : • Menentukan keberadaan

gliserin/lemakParameternya :• Bau akrolein ( seperti abu alkohol )

Uji Akrolein

Uji Ketidakjenuhan LIPIDParameter pengujian • Adanya reaksi positif ( berupa

timbulnya warna merah saat ditetesi ion Hubs )

• Asam lemak tidak jenuh adanya timbul warna merah yang semakin lama pudar.

• Asam lemak jenuh timbul warna merah tetapi tidak pudar

Uji ketidakjenuhan LIPIDSAMPEL HASIL KETERANGAN

Minyak kelapa + Warna merah

Asam oleat - Warna merah – pudar

Mentega + Warna merah

Asam palmitat + Warna merah

Margarin + Warna merah

Lemak hewan + Warna merah

Minyak tengik + Warna merah

Keterangan :( - ) TIDAK JENUH( + ) JENUH

Rantai HidrokarbonAsam Lemak Jenuh Asam Lemak Tidak Jenuh

Asam Oleat ( struktur kimia )

Uji Ketengikan LIPIDTujuan • Mengetahui oksidasi lipid

Parameter • Larutan putih = tidak tengik• Larutan merah muda = tengik

Uji Ketengikan Lipid

• Tengiknya suatu larutan karena golongan trigliserida banyak teroksidasi oleh oksigen dalam udara bebas.

KROMATOGRAFI LIPID• Untuk mengetahui fungsi lipid pd

proses biologis diperlukan mengetahui lipid apa

saja yang ada.• Karena lipid tidak larut dalam air

ekstraksi lipiddari jaringan menggunakan pelarut organik

• Secara umum, campuran komplek lipid dipisahkan berdasarkan perbedaan polaritas atau kelarutannya pada pelarut non polar

• Lipid netral TAG, lilin, pigmen mudah diektraksi dari jaringan dengan : etil eter, kloroform, atau benzena

• Membrane lipid lebih mudah diekstrak denganpelarut yang lebih polar etanol atau metanol

Tujuan: Mengurangi interaksi hidrofobik

rantai hidrokarbonMelemahkan ikatan hidrogen dan

interaksi elektrostatik yang mengikat lipid dengan protein membran

• Campuran pelarut yang biasa digunakan :klorofom : metanol : air = 1:2:0.8

• menghasilkan single phaseUntuk mengekstrak semua lipid ditambahkan airMenghasilkan 2 fase : metanol/air dan kloroform

SKEMA ADSORPSI KROMATOGRAFI

Campuran lipid dapat difraksinasi lebih lanjut kromatografi berdasarkan perbedaan polaritassetiap kelas lipid• Adsorbsi kromatografidigunakan material

polartidak larut silika gel yang dipak pada kolomgelas yang panjang dan tipis campuran lipid

dlmpelarut kloroform dituangkan dr ataslipid yang lebih polar akan terikat kuat padamaterial sedangkan lipid yang netral langsungkeluar. Lipid yang polar dikeluarkan dengan caramencuci material tsbt dgn solvent yang lebih

polar. aseton metanol

Kromatografi Lapisan Tipis (TLC)

Digunakan untuk memisahkan komponen-komponen atas dasar perbedaan perbedaan adsorpsi atau partisi oleh fase diam di bawah gerakan pelarut pengembang.

Aplikasi Kromatigrafi Lapisan Tipis

• Monoacyglycerols• Diacyglycerols• Triacyglycerols• Kolesterol• Asam lemak bebas• Ester kolesterol• Fosfolipid

Kromatografi Eksklusi (SEC)Digunakan untuk memisahkan produk hidrolitik, oksidasi dan pemanasan lemak

Kromatografi Cairan (HPLC)HPLC digunakan untuk memisahkan lipida non-volatil yang memiliki berat molekul tinggi.

Adsorpsi Kromatografi• Adsorpsi kromatografi adalah teknik

kromatografi tertua dioperasikan berdasarkan retensi terlarut pada permukaan adsorben. Adsorben-adsorben yang umum digunakan adalah silika gel dan alumina karena mereka dimiliki daerah yang besar permukaan dan banyak situs aktif. Zat terlarut dan pelarut dalam cairan cairan dapat bersaing satu sama lain untuk mendapatkan situs yang aktif.

Terima Kasih

Salam Hormat

Florensia Indan Stepani

Nurhafizah Putri

Pauline Leon Artha

Prima Anggraini