ALUR PERCOBAANPenentuan Kadar Protein Dengan Metode Biuret

1. Persiapan Sample

- Ditimbang 0.4 gram- Dihancurkan/ ditumbuk dengan mortar + alu- + aquades- Dimasukkan ke tabung ukur ??????- disaring

2. Pembuatan Standar

tabung I tabung II tabung III tabung IV tabung V

- dimasukkan kedalam 5 tabung reaksi berbeda- + 4mL reagen bernet kedalam masing-masing tabung- Dikocok- Diinkubasi pada suhu 37oC selama 10menit atau pada suhu kamar selama

10 menit

Diukur absorbansi masing-masing pada panjang gelombang 520nm

3. Penetapan Absorbansi Larutan Blanko

1 mL Aquades

Sample

residufiltrat

1mL lar standar protein 1 mg

1mL lar standar protein 2 mg

1mL lar standar protein 3 mg

1mL lar standar protein 4 mg

1mL lar standar protein 5 mg

Warna ungu yang stabil

Absorbansi

- Dimasukkan kedalam tabung reaksi

- +4mL reagen bremut

- Dikocok

- Diinkubasi pada suhu 37oC selama 10 menit / pada suhu kamar selama 30 menit

- Diukur absorbensinya pada panjang gelombang 520nm

4. Penetapan Absorbansi Larutan Sample

- Dimasukkan kedalam tabung reaksi- + 4ml Reagen Bremut- Dikocok- Diinkubasi pada suhu 37oC selama 10 menit / pada suhu kamar selama 30

menit- Diukur absorbansinya pada panjang gelombang 520nm

Reaksi-Reaksi

- CuSO4 5H2O(aq) + 2NaOH(aq) Cu(OH)2(aq) + Na2SO4(aq) + 5H2O(X)

- Cu (OH)2(aq) Cu2+(aq) + 2OH-(aq)

- COOH

Absorbansi

1 mL Larutan Sample

Absorbansi

R – CH R O H R O H R H – N + Cu2+ H2N - Cu – C – N - Cu – C - N – Cu - COOH

O = C CuR – CH H2N - Cu – C – N - Cu – C - N – Cu - COOH NH2

R O H R O H RRrantai paptida Ikatan peptide

Ikatan komplek berwarna ungu