AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL RIMPANG

JAHE (Zingiber officinale Roscoe) DAN JAHE MERAH (Zingiber

officinale Roscoe var. rubrum) TERHADAP SEL KANKER

PAYUDARA T47D

SKRIPSI

Oleh :

CAHYA BETTY SULISTYOWATI

K 100 070 018

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA

2011

ii

AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL RIMPANG

JAHE (Zingiber officinale Roscoe) DAN JAHE MERAH (Zingiber

officinale Roscoe var. rubrum) TERHADAP SEL KANKER

PAYUDARA T47D

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai

derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

di Surakarta

Oleh:

CAHYA BETTY SULISTYOWATI

K 100 070 018

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA

2011

iii

iii

iv

PERSEMBAHAN

Ya Allah, Karya ini hamba persembahkan kepadaMU, semoga Engkau menerimanya sebagai amal

sholeh yang Engkau cintai. Ya Allah, semoga karya ini bermanfaat bagi umatMU . Amin

Ibuku, Ibuku, Ibuku, dan Bapakku atas kasih sayang, bimbingan, arahan, dan cinta yang telah

engkau berikan.

Kakak dan Adik-adikku tercinta.

Guru, Teman dan Almamater UMS

v

MOTTO

Dan jika mereka beriman dan bertakwa, pahala dari Allah pasti lebih baik, sekiranya mereka tahu.

(Q.S. Al-Baqorah: 103)

Wahai orang-orang yang beriman! Mohonlah pertolongan (kepada Allah) dengan sabar dan salat. Sungguh, Allah beserta

orang-orang yang sabar.

(Q. S. Al-Baqoroh: 153)

Disetiap kensulitan pasti ada kemudahan yang menyertai bagi orang-orang yang sabar menghadapinya ... (penulis).

vi

DEKLARASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat

karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu

Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau

pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara

tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, 08 Juli 2011

Peneliti,

Cahya Betty Sulistyowati

vii

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.

Puji syukur kehadirat Allah SWT, karena atas rahmat dan karunia-Nya

penulisan skripsi yang berjudul UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK

ETANOL RIMPANG JAHE (Zingiber officinale Roscoe) DAN JAHE

MERAH (Zingiber officinale Roscoe var. rubrum) TERHADAP SEL

KANKER PAYUDARA T47D dapat terselesaikan. Skripsi ini disusun untuk

memenuhi salah satu syarat dalam mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm.) di

Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Pelaksanaan dan penulisan skripsi ini tak lepas dari bantuan beberapa

pihak. Oleh karena itu dengan kerendahan hati, penulis menyampaikan terima

kasih kepada:

1. Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta.

2. Ibu Rosita Melannisa, M.Si., Apt. dan Ika Trisharyanti, D.K., M.Farm., Apt.

selaku dosen pembimbing dan motivator, yang telah memberikan bimbingan,

semangat, dan pengarahan sejak persiapan hingga tersusunnya skripsi ini.

3. Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. dan Bapak Peni Indrayudha,

M.Biotech., Apt. selaku penguji selaku penguji skripsi, yang telah

memberikan banyak saran dan koreksi.

4. Bapak Andi Suhendi, S.Farm., Apt. selaku pembimbing akademik atas

motivasi, arahan dan bimbingan selama menempuh masa perkuliahan.

viii

5. Bapak dan Ibu Dosen serta staf karyawan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Surakarta.

6. Keluargaku tercinta, Ibuku Sri Handayani, Bapakku Rubini Handatno yang

telah memberikan do’a, kasih sayang, arahan, semangat, dan motivasi.

7. Kakakku Diyan, Adikku Mudrikatun Shodiqoh dan Bayu yang telah

memberikan do’a, semangat, harapan, dan keceriaan hingga penelitian selesai.

8. Dina Sudiana yang selalu memberi semangat, keceriaan, bantuan, dukungan,

dan kesabarannya.

9. Seseorang yang akan mendampingiku kelak atas semangat dan motivasinya.

10. Teman-teman seperjuangan diantaranya Sholikhah, Anggun, Rika, Iim, Ica,

Tiva, Lia, Nia, Dewi, Florina dan teman-teman tahun angkatan 2007 atas

kebersamaan, kerjasama, dan kesabarannya selama penelitian berlangsung

“Selalu Semangat dan jaga kekompakan, selamanya kita adalah saudara”.

11. Segenap pihak yang telah membantu dan memberi dukungan yang tidak dapat

disebutkan satu persatu.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari sempurna sehingga kritik dan

saran yang membangun sangat diharapkan. Namun, besar harapan penulis semoga

sumbangsih yang kecil ini bermanfaat untuk kemajuan ilmu pengetahuan pada

umumnya dan ilmu Farmasi pada khususnya.

Wassalamu’alaikum warahmatullohi wabarokatuh

Surakarta, 08 Juli 2011

Penulis

ix

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ................................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN .................................................................... iii

PERSEMBAHAN ...................................................................................... iv

MOTTO ...................................................................................................... v

DEKLARASI .............................................................................................. vi

KATA PENGANTAR ................................................................................ vii

DAFTAR ISI ............................................................................................... ix

DAFTAR TABEL ....................................................................................... xii

DAFTAR GAMBAR .................................................................................. xiii

DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................. xiv

DAFTAR SINGKATAN ........................................................................... xv

INTISARI ................................................................................................... xiv

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang ............................................................................... 1

B. Perumusan Masalah ........................................................................ 3

C. Tujuan Penelitian ............................................................................ 3

x

D. Tinjauan Pustaka ............................................................................. 4

1. Kanker ...................................................................................... 4

2. Kanker Payudara ...................................................................... 5

3. Jahe dan Jahe Merah ................................................................ 7

a. Jahe (Zingiber officinale Rosc.) ........................................ 7

b. Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc. var. rubrum) ......... 11

4. Uji Sitotoksik ............................................................................ 14

5. Metode MTT ............................................................................. 14

6. Kromatografi Lapis Tipis ......................................................... 15

E. Landasan Teori ............................................................................... 16

F. Hipotesis ......................................................................................... 17

BAB II METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian .............................................................................. 18

B. Variabel Penelitian ........................................................................ 18

C. Subyek Uji .................................................................................... 18

D. Alat dan Bahan .............................................................................. 19

1. Alat ........................................................................................... 19

2. Bahan ........................................................................................ 19

E. Jalannya Penelitian ......................................................................... 20

1. Identifikaasi Kandungan Kimia Dengan Kromatografi Lapis Tipis 20

a. Uji Kromatografi Lapis Tipis .............................................. 20

b. Analisis Data ....................................................................... 21

xi

2. Uji Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Etanol Rimpang Jahe dan Jahe Merah

................................................................................................... 21

a. Sterilisasi ............................................................................ 21

1) Sterilisasi Alat .............................................................. 21

2) Sterilisasi Bahan ........................................................... 21

b. Pembuatan Media Kultur ................................................... 22

c. Preparasi Sel ....................................................................... 22

d. Panen Sel ............................................................................ 22

e. Pembuatan Larutan Uji ....................................................... 22

f. Uji Aktivitas Sitotoksik Dengan Metode MTT .................. 23

g. Analisis Data ...................................................................... 24

BAB III HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Identifikasi Kandungan Kimia Ekstrak Etanol Rimpang Jahe dan Jahe

Merah dengan Metode KLT ...................................................... 26

B. Uji Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Etanol Rimpang Jahe dan Jahe Merah

dengan Metode MTT ................................................................. 29

BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan .................................................................................... 36

B. Saran ............................................................................................. 36

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................. 37

LAMPIRAN ................................................................................................ 43

xii

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Nilai Rf Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Dan Jahe Merah ............. 28

Tabel 2. Persentase Sel Hidup Dengan Perlakuan Ekstrak Etanol

Rimpang Jahe dan Jahe Merah .................................................... 33

Tabel 3. Persentase Sel Hidup Dengan Perlakuan Doksorubisin ............... . 33

xiii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Diagram Sinyal Pertumbuhan Sel Pada Sel Mamalia .............. 5

Gambar 2. Jahe (Zingiber officinale Roscoe) ............................................ 8

Gambar 3. Struktur Kandungan Kimia dari Jahe (Zingiber officinale

Roscoe) ....................................................................................... 10

Gambar 4. Jahe Merah (Zingiber officinale Roscoe var. rubrum) ............. 12

Gambar 5. Reaksi Reduksi MTT Menjadi Formazan Oleh Enzim

Suksinat Dehidrogenase ............................................................. 15

Gambar 6. Skema Uji Sitotoksik Dengan Metode MTT ............................ 25

Gambar 7. Kromatrogram Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Dan Jahe Merah

dengan Pembanding Gingerol .................................................... 28

Gambar 8. Kristal Formazan ...................................................................... 29

Gambar 9. Fotomikroskopik Sel T47D Setelah Perlakuan Dengan

Ekstrak Etanol Rimpang Jahe 5 µg/mL dan 100 µg/mL

dibandingkan dengan kontrol sel ............................................... 30

Gambar 10. Fotomikroskopik Sel T47D Setelah Perlakuan Dengan

Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah 5 µg/mL dan 100 µg/mL

dibandingkan dengan kontrol sel ............................................... 31

Gambar 11. Grafik Hubungan Konsentrasi Dengan Persentase Sel Hidup

T47D .......................................................................................... 31

Gambar 12. Perbandingan Nilai IC50 Doksorubisin, Ekstrak Etanol

rimpang Jahe dan Jahe Merah .................................................... 31

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Pembuatan Larutan Stok ........................................................ 44

Lampiran 2. Perhitungan Persentase Sel Hidup ......................................... 46

Lampiran 3.Perhitungan IC50 Jahe ............................................................. 47

Lampiran 4. Perhitungan IC50 Jahe Merah ................................................. 48

Lampiran 5. Perhitungan IC50 Doksorubisin .............................................. 49

xv

DAFTAR SINGKATAN

ATCC American Type and Culture Collection

Bcl-2 B cell limphoma-2

CDKI Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor

COX-2 Cyclooxygenase-2

DMBA 7,12-dimethylbenz-(α)anthracene

DMSO Dimeilsulfoksida

ER Estrogen Reseptor

FBS Fetal Bovin Serum

HER-2 Hormone Estrogen Reseptor-2

IC50 Inhibitory Concentration 50

KLT Kromatografi Lapis Tipis

L2 Loop-2

L3 Loop-3

MPV Mork Disease Virus

MTT (3[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide)

NK Natural Killer

NO Nitrit Oksida

PBS Phospate Buffer Saline

RPMI Roawall Park Memorial Institute

RSV Rous Sarcoma Virus

SDS Sodium Dodesil Sulfat

xvi

INTISARI

Rimpang Jahe (Zingiber officinale Rosc.) dan jahe merah (Zigiber officinale

Rosc. Var. Rubrum) telah terbukti mempunyai aktivitas antioksidan, antiinflamasi,

antikarsinogenik, antimutagenik, dan antikanker. Rimpang jahe dan jahe merah

memiliki kemiripan kandungan kimia antara lain zingiberen, kurkumen, shogaol,

gingerol, gingerdion, dan betapellandren. Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas sitotoksik ekstrak etanol rimpang jahe dan jahe merah

terhadap sel kanker payudara T47D dan mengetahui kandungan kimia yang

terkandung di dalamnya.

Tahapan penelitian meliputi identifikasi kandungan kimia ekstrak etanol

rimpang jahe dan jahe merah menggunakan metode KLT dengan fase gerak

heksan:dietil eter (4:6) dan dideteksi dengan sinar tampak, UV 254 dan 366 nm

serta pereaksi semprot vanillin-H2SO4. Uji sitotoksik dilakukan dengan metode

MTT (3[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide)

menggunakan ELISA reader dengan 5 seri konsentrasi ekstrak (5, 10, 25, 50, dan

100 µg/mL) dan 5 seri doksorubisin (10, 25, 50, 100, dan 150 nM) sebagai kontrol

positif. Aktivitas sitotoksik dapat diketahui dari nilai IC50 yang diperoeh.

Hasil Uji KLT menunjukkan kandungan kimia ekstrak etanol rimpang jahe

dan jahe merah adalah gingerol. Kontrol poritif yang digunakan adalah

doksorubisin dengan nilai IC50 74,06 nM. Uji aktivitas sitotoksik memperlihatkan

bahwa ekstrak etanol rimpang jahe dan jahe merah mampu menghambat

pertumbuhan sel kanker payudara T47D dengan nilai IC50 36,85 µg/mL dan 22,39

µg/mL.

Kata kunci: Jahe (Zingiber officinale Rosc.), jahe merah (Zingiber officinale Rosc.

Var. Rubrum), sitotoksik, MTT, sel T47D.