AKTIVITAS ANTIOKSIDAN FRAKSI AIR EKSTRAK ETANOL DAUN …eprints.unwahas.ac.id/1846/1/cover.pdf ·...

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN FRAKSI AIR EKSTRAK ETANOL DAUN

CABAI MERAH BESAR (Capsicum annum L.) DAN IDENTIFIKASI

FLAVONOIDNYA

SKRIPSI

Oleh :

Debby Triana Rachman

135011061

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS WAHID HASYIM

SEMARANG

2019

i



FLAVONOIDNYA

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat

dalam mencapai derajat Sarjana Farmasi

Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Wahid Hasyim

Semarang

Oleh :


135011061

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS WAHID HASYIM

SEMARANG

2019

ii

PENGESAHAN SKRIPSI

Berjudul



FLAVONOIDNYA

Oleh :


135011061

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi

Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim

Pada tanggal :

Mengetahui :

Fakultas Farmasi

Universitas Wahid Hasyim

Pembimbing Utama Dekan,

(Devi Nisa Hidayati, M.Sc., Apt.) (Aqnes Budiarti, S.F., M.Sc., Apt.)

Pembimbing Pendamping

(Anita Dwi Puspitasari, S.Si., M.Pd.)

Penguji :

1. Devi Nisa Hidayati, M.Sc., Apt (.....................................................)

2. Anita Dwi Puspitasari, S.Si., M.Pd (.....................................................)

3. Drs. Ibrahim Arifin, M.Sc., Apt (.....................................................)

4. Dewi Andini K.M, M.Sc., Apt (.....................................................)

iii

SURAT PERNYATAAN

Yang bertandatangan di bawah ini :

Nama : Debby Triana Rachman

NIM : 135011061

Judul Skripsi : Aktivitas Antioksidan Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun Cabai

Merah Besar (Capsicum annum L.) Dan Identifikasi

Flavonoidnya.

Menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah

diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan

sepanjang pengetahuan saya, juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah

ditulis atau diterbitkan orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah

ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Demikian surat ini saya buat untuk dapat digunakan sebagaimana

mestinya.

Semarang,

(Debby Triana Rachman)

iv

MOTTO DAN PERSEMBAHAN

“Sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan, maka apabila engkau

telah selesai (dari suatu urusan), tetaplah bekerja keras (untuk urusan

yang lain), dan hanya kepada Tuhanmulah engkau berharap”

(Q.S Al-insyirah : 6-8)

Kupersembahkan skripsi ini untuk :

Papaku Budi Rachmanto dan Mamaku Nur Sriani, yang telah memberikan kasih sayang,

dukungan moril maupun materi serta do’a yang tiada henti untuk kesuksesan saya, karena

tiada kata seindah lantunan do’a dan tiada do’a yang paling khusuk selain do’a yang terucap

dari orang tua, karena dukungan semangat orang tua yang tak ada hentinya aku bisa

menyelesaikan skripsi ini

Kakakku Yuliana Rachman dan Kakakku Sherly Caterina Rachman, Adikku Aprilia

Rachman

Keluarga besar dan sahabat-sahabatku

Para guru dan dosen yang telah membimbing dan mendidikku

Serta almamaterku sebagai wujud terimakasih

v

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT yang telah

melimpahkan kasih dan sayang-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan

skripsi ini dengan judul : “Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Air Ekstrak Etanol

Daun Cabai Merah Besar (Capsicum annum L.) Dengan Menggunakan Metode

DPPH Serta Identifikasi Flavonoid”.

Skripsi ini penulis susun sebagai salah satu syarat untuk mendapatkan

derajat gelar sarjana farmasi di Universitas Wahid Hasyim Semarang. Selama

menyelesaikan penyusunan skripsi ini penulis ingin menyampaikan ucapan

terimakasih kepada semua pihak yang turut membantu, khususnya :

1. Ibu Aqnes Budiarti, S.F., M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Wahid Hasyim Semarang yang telah memberikan banyak

dukungan dan memberikan kemudahan berbagai administrasi guna

kelancaran penelitian.

2. Ibu Devi Nisa Hidayati, M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing yang banyak

memberikan masukan ilmu, waktu dan semangat kepada penulis dalam

persiapan penelitian, penelitian, hingga penyusunan skripsi ini.

5. Ibu Anita Dwi Puspitasari, S.Si., M.Pd.selaku dosen pembimbing yang

banyak memberikan masukan ilmu, waktu dan semangat kepada penulis

dalam persiapan penelitian, penelitian, hingga penyusunan skripsi ini.

6. Ibu Dewi Andini KM, M.Farm., Apt. selaku dosen penguji yang telah

memberikan saran, masukan dan koreksi terhadap skripsi ini.

vi

7. Bapak Drs. Ibrahim Arifin, M.sc., Apt. selaku dosen penguji yang telah

memberikan saran, masukan dan koreksi terhadap skripsi ini.

8. Seluruh Dosen Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang yang

telah memberikan bekal ilmu dan telah membantu kelancaran penulis dalam

menyelesaikan studi.

9. Pimpinan dan staf Laboratorium Biologi Farmasi Fakultas Farmasi

Universitas Wahid Hasyim Semarang yang telah mengizinkan dan membantu

pelaksanaan penelitian ini.

10. Pimpinan dan staf Laboratorium Kimia Analisa Fakultas Farmasi Universitas

Wahid Hasyim Semarang yang telah mengizinkan dan membantu

pelaksanaan penelitian ini.

11. Staf Laboratorium Ekologi dan Biosistematika Fakultas MIPA Universitas

Diponegoro Semarang yang telah membantu pelaksanaan determinasi

tanaman.

12. Sahabatku yang selalu berbagi keceriaan dan kebersamaan denganku.

13. Erlangga Yudha Husada, Zuhrotul Khoiryah, Irfan Yusuf Perdana sahabat

serta rekan seperjuanganku yang telah melewati penelitian bersamaku.

14. Teman-teman mahasiswa Farmasi angkatan 2013 atas kekompakan dan

ketulusan hatinya berjuang bersama selama ini.

15. Semua pihak yang tidak mungkin disebutkan satu persatu yang telah

memberikan kontribusinya dalam membantu pelaksanaan penelitian dan

penyusunan skripsi ini.

vii

Penulis telah berupaya dengan maksimum namun penulis menyadari

bahwa penyusunan skripsi ini masih banyak terdapat kekurangan dan masih jauh

dari kesempurnaan. Oleh karena itu, penulis sangat mengharapkan masukan, kritik

dan saran yang bersifat membangun ke arah perbaikan dan penyempurnaan skripsi

ini.

Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat dalam

memperkaya khasanah dalam pendidikan.

Semarang, September 2018

Penulis

viii

DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ................................................................................................................ i

PENGESAHAN SKRIPSI .................................................................................. iii

SURAT PERNYATAAN ................................................................................... iv

MOTTO DAN PERSEMBAHAN ...................................................................... v

KATA PENGANTAR ....................................................................................... vi

DAFTAR ISI ....................................................................................................... ix

DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xiii

DAFTAR TABEL .............................................................................................. xiv

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xv

INTISARI .......................................................................................................... xvi

ABSTRACT .........................................................................................................xvii

BAB I. PENDAHULUAN ................................................................................. 1

A. Latar Belakang Masalah ................................................................... 1

B. Perumusan Masalah ......................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian ............................................................................. 3

D. Manfaat Penelitian ........................................................................... 4

E. Tinjauan Pustaka ............................................................................. 4

1. Daun Cabai Merah (Capsicum annum L.) .................................. 4

a. Klasifikasi ............................................................................... 4

b. Morfologi ................................................................................ 5

c. Kandungan Kimia ................................................................... 6

ix

d. Khasiat Tanaman .................................................................... 7

2. Radikal Bebas .............................................................................. 8

3. Antioksidan ................................................................................. 9

4. Simplisia ...................................................................................... 10

5. Metode Ekstraksi ......................................................................... 11

6. Partisi Cair-Cair............................................................................ 12

7. Metode DPPH .............................................................................. 12

8. Vitamin C ..................................................................................... 15

9. Kromatografi Lapis Tipis (KLT).................................................. 16

10. Inhibitor Concentration (IC50) .................................................... 17

F. Landasan Teori ................................................................................ 18

G. Hipotesis .......................................................................................... 18

BAB II. METODE PENELITIAN ..................................................................... 21

A. Desain dan Variabel Penelitian ....................................................... 21

B. Bahan dan Alat Penelitian ............................................................... 21

1. Bahan Penelitian .......................................................................... 21

2. Alat Penelitian ............................................................................. 22

C. Jalannya Penelitian .......................................................................... 22

1. Determinasi Tanaman ................................................................. 22

2. Pembuatan Senyawa Uji .............................................................. 23

a. Pembuatan Serbuk Simplisia .................................................. 23

b. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Cabai Merah Besar ............. 24

c. Pembuatan Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun Cabai .................. 25

x

3. Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun Cabai

Merah Besar ................................................................................ 27

a. Pembuatan Larutan Blanko DPPH .......................................... 27

b. Pembuatan Larutan Stok Vitamin C ........................................ 27

c. Penentuan Panjang Gelombang Vitamin C ............................ 27

d. Penentuan Panjang Gelombang DPPH .................................... 28

e. Penentuan Operating Time ...................................................... 28

f. Pembuatan Seri Konsentrasi Larutan Uji ................................ 28

g. Uji Aktivitas Antioksidan Metode DPPH .............................. 28

h. Identifikasi Senyawa Flavonoid Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun

Cabai Merah Besar Menggunakan Metode KLT .................... 29

D. Skema Jalannya Penelitian ................................................................. 30

E. Analisis Data ...................................................................................... 31

1. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ................................................. 31

2. Uji Aktivitas Antioksidan ............................................................ 31

BAB III. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .................................. 34

A. Determinasi Tanaman ..................................................................... 34

B. Pembuatan Serbuk Daun Cabai Merah Besar ................................. 34

C. Ekstraksi Daun Cabai Merah besar .................................................. 35

D. Pembuatan Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun Cabai Merah Besar .... 36

E. UjiKandungan Flavonoid ................................................................ 36

F. Penentuan Operating Time ............................................................... 37

G. Uji aktivitas Antioksidan Metode DPPH .......................................... 38

xi

H. Inhibitor Concentration (IC50) .......................................................... 41

I. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ...................................................... 42

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................... 45

A. Kesimpulan ...................................................................................... 45

B. Saran ................................................................................................ 45

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 46

LAMPIRAN ....................................................................................................... 50

xii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Tanaman Cabe Merah Besar ........................................................... 6

Gambar 2. Struktur Flavonoid .......................................................................... 7

Gambar 3. Struktur DPPH ................................................................................ 13

Gambar 4. Reaksi Radikal Bebas DPPH dengan Senyawa Antioksidan .......... 15

Gambar 5. Skema Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Cabe Merah Besar .......... 25

Gambar 6. Skema Pembuatan Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun Cabai Merah

Besar ................................................................................................ 26

Gambar 7. Skema Jalannya Penelitian .............................................................. 30

Gambar 8. Hasil Pengukuran Panjang Gelombang Maksimum........................ 37

Gambar 9. Grafik Hubungan Antara Konsentrasi Vitamin C dengan Aktivitas

Antioksidan ..................................................................................... 40

Gambar 10. Grafik Hubungan Antara Konsentrasi Antioksidan dengan Fraksi

Air Ekstrak Etanol Daun Cabai Merah Besar ................................. 41

Gambar 11. Hasil Uji KLT Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun Cabai Merah

Besar ............................................................................................... 42

xiii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel I. Spesifitas Daya Antioksidan .............................................................17

Tabel II. Hasil Penentuan Operating Time .....................................................38

Tabel III. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Vitamin C .......................................39

Tabel IV. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun

Cabai Merah Besar .............................................................................39

Tabel V. Tabel Nilai IC50 Vitamin C dan Fraksi Air Ekstrak Etanol Daun Cabai

Merah Besar ......................................................................................42

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Determinasi Tanaman Cabai Merah Besar(Capsicum annum L.) 50

Lampiran 2. Surat Keterangan Penelitian di LaboratoriumBiologi Farmasi

Universitas Wahid Hasyim .......................................................... 53

Lampiran 3. Surat Keterangan Penelitian di Laboratorium Kimia Farmasi

Universitas Wahid Hasyim .......................................................... 54

Lampiran 4. Perhitungan Rendemen Ekstrak dan Rendemen Fraksi Air ......... 55

Lampiran 5. Perhitungan Larutan Stok dan Seri Konsentrasi .......................... 56

Lampiran 6. Data Perhitungan Aktivitas Antioksidan ...................................... 61

Lampiran 7. Panjang Gelombang DPPH .......................................................... 68

Lampiran 8. Penentuan Operating Time (OT) ................................................... 69

Lampiran 9. Penentuan Persentase Aktivitas Antioksidan Fraksi Air Ekstrak

Etanol Daun Cabai Merah Besar ................................................ 70

Lampiran 10.Penentuan Presentase Aktivitas Antioksidan Vitamin C .............. 73

Lampiran 11.Dokumentasi Penelitian ................................................................ 76

xv

INTISARI

Antioksidan adalah senyawa yang mampu menghilangkan dan

menahan pembentukan radikal bebas dalam tubuh. Daun cabai merah besar

(Capsicum annum L.) mengandung senyawa flavonoid yang berpotensi

sebagai senyawa antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui

potensi aktivitas antioksidan fraksi air ekstrak etanol daun cabe merah

besar serta identifikasi flavonoid. Ekstraksi daun cabai merah besar

dilakukan dengan metode perkolasi menggunakan pelarut etanol 70%,

dilanjutkan fraksinasi bertingkat menggunakan pelarut n-heksan, etil asetat

dan air. Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH

pada seri konsentrasi 6,25; 12,5; 25; 50; 100 dan 200 µg/mL. Vitamin C

pada konsentrasi 2; 4; 6; 8; 10dan12 µg/mL digunakan sebagai

pembanding, analisis data menggunakan perhitungan Regresi Linier (RL)

dengan rumus y = bx + a untuk menentukan nilai IC50. Identifikasi

senyawa flavonoid dilakukan dengan metode Kromatografi Lapis Tipis

(KLT). Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi air ekstrak etanol daun

cabai merah besar mempunyai aktivitas antioksidan dengan nilai IC50

sebesar 56,260 µg/mL (antioksidan kuat) dan vitamin C sebesar 5,806

µg/mL (antioksidan kuat). Hasil KLT menunjukkan adanya golongan

senyawa flavonoid dalam fraksi Air.

Kata Kunci : Antioksidan, DPPH, Flavonoid, IC50, Capsicum annum .L

xvi

ABSTRACT

Antioxidants are compounds which able to eliminate and to resist the

formation of free radicals in the body. The big red chili leaves (Capsicum annum.

L) contain flavonoid compounds which potentially as antioxidant compounds.

This study aims to determine the potential of the big red chilileaves ethanol

extract’s water fractionantioxidant activity and identify the flavonoid compounds.

The extraction of big red chili leaves was done by percolation method using 70%

ethanol solvent and followed by fractionation using water solvent. Testing of

antioxidant activity was carried out by DPPH method in the concentration series

of 6.25; 12.5; 25; 50; 100 and 200 µg / mL. Vitamin C at concentration 2; 4; 6; 8;

10 and 12 µg / mL are used as a comparison, and the data analysis uses Linear

Regression (RL) calculation under the formula y = bx + a to determine the IC50

value. The identification of flavonoid compounds was carried out by using Thin

Layer Chromatography (TLC) method. The results showed that the water fraction

of thebig red chili leavesethanol extract had antioxidant activity with IC50 of

56.260 µg / mL (powerful antioxidant) and the vitamin C of 5.806 µg / mL

(powerful antioxidant). The results of TLC showed the presence of flavonoid

compounds in the water fraction.

Keywords : Antioxidants, DPPH, Flavonoids, IC50, Capsicum annum.L

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN FRAKSI AIR EKSTRAK ETANOL DAUN …eprints.unwahas.ac.id/1846/1/cover.pdf ·...

Documents

Transcript of AKTIVITAS ANTIOKSIDAN FRAKSI AIR EKSTRAK ETANOL DAUN …eprints.unwahas.ac.id/1846/1/cover.pdf ·...