7/24/2019 8.BAB IV (1)

1/11

BAB IV

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian

Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian dosis

bertingkat ekstrak umbi keladi tikus ( Typhonium flagelliforme ) dengan

pelarut dichloromethane (DCM) terhadap ekspresi ki-67 sel T47D. Penelitian

ini dilakukan dengan menggunakan sampel sebanyak 4 slide sel kanker

payudara T47D. ampel diinkubasi perlakuan selama !4 "am dan dibagi

men"adi 4 "enis perlakuan. Dosis yang digunakan menga#u pada hasil

penelitian sebelumnya bah$a ekstrak umbi keladi tikus ( Typhonium

flagelliforme ) dengan pelarut dichloromethane (DCM) memiliki %C &' pada

dosis & *&* +g,ml ( rde i !'*4). Dosis & *&* +g,ml ini kemudian

digunakan beserta dosis di ba$ahnya (dosis setengah) yaitu !/ '7&& +g,ml

dan dosis di atasnya (dosis dua kali) yaitu **6 0'! +g,ml dan ditambahkan

lagi satu kelompok sebagai kontrol.

1kspresi ki-67 diukur dari persentase sel yang mengekspresikan

intensitas $arna di tingkatan seluler yang diperiksa dengan #ara

imunostaining. 2arna #oklat pada nukleus bermakna positi3 sedangkan

$arna ungu bermakna negati3. Pengamatan ini dilakukan dengan mikroskop

dengan perbesaran 4'' kali pada lima lapangan pandang tiap *'' sel. asil

pengamatan ekspresi ki-67 sel T47D pada kelompok kontrol adalah yang

tertinggi dengan rata-rata sebesar ' 675 sedangkan di kelompok ekstrak

7/24/2019 8.BAB IV (1)

2/11

umbi keladi tikus !/ '7&& & *&* dan **6 0'! +g,ml masing-masing adalah

4* '5 !4 475 dan *! 675 (Tabel 4.*).

Tabel 4.* 1kspresi i-67antar elompok

8o Dosis 9ata-rata : tandar De iasi (5)* ontrol ' 67 : ' 0*! !/ '7&& +g,ml 4* ' : ' !'0 & *&* +g,ml !4 47 : ' 4!4 **6 0'! +g,ml *! 67 : ' 0*

9ata-rata persentase ekspresi ki-67 antar dosis tersebut menun"ukkan

trend penurunan dari dosis terke#il sampai dengan dosis tertinggi. al ini

dapat dilihat dari gra3ik berikut;

0.010.020.030.040.050.060.070.080.090.0

80.7

41.824.5

12.7

Dosis (g/ml)

% Ekspresi Ki-67

7/24/2019 8.BAB IV (1)

3/11

Tabel 4.! asil >"i 8ormalitas

Dosishapiro-2ilk

tatisti# d3 ig.ontrol ./64 0 .607

!/ '7&& +g,ml *.''' 0 *.'''& *&* +g,ml ./!0 0 .460**6 0'! +g,ml ./64 0 .607

asil u"i homogenitas arians data dengan levene test diperoleh nilai

signi3ikansi sebesar ' &00 ( p = ' '&) sehingga dikatakan arians data

homogen (Tabel 4.0). Dengan demikian syarat pendahuluan yaitu sebaran

data normal dan arian homogen memenuhi syarat untuk bisa dilakukan u"i

one way anova .

Tabel 4.0 asil >"i ?e ene

Levene Statistic df1 df2 Sig.

0,790 3 8 0,533

>"i one way anova diperoleh p sebesar ' ''' ( p @ ' '& a diterima)

atau ada perbedaan rata-rata ekspresi ki-67 yang signi3ikan setidaknya di dua

kelompok dari total empat kelompok u"i. %ni berarti bah$a pemberian serial

dosis ekstrak umbi keladi tikus mempengaruhi ekspresi ki-67sel T47D (Tabel

4.4). Aleh karena perbedaan rata-rata ekspresi ki-67 antar keempat kelompok

signi3ikan maka dapat di#ari pasangan kelompok-kelompok yang

menun"ukkan perbedaan tersebut dengan u"i post hoc LSD (Tabel 4.&).

Tabel 4.4 asil >"i Ane 2ay no a

7/24/2019 8.BAB IV (1)

4/11

F Sig.

26.453,733 0,000

Tabel 4.& asil >"i Post o# ? D

(%) Dosis (B) DosisMean

Di33eren#e(%-B)

5 perbedaan ig. eterangan

ontrol !/ '7&& 0 7 -4 ! ' ''' ermakna & *&* &6 !' -6/ 7 ' ''' ermakna **6 0'! 6 '' - 4 0 ' ''' ermakna!/ '7&& & *&* *7 00 -4* & ' ''' ermakna **6 0'! !/ *0 -6/ 7 ' ''' ermakna& *&* **6 0'! ** ' -4 ! ' ''' ermakna

>"i post ho# ? D pada tabel di atas menun"ukkan kebermaknaan

(signi3ikansi) perbedaan rata-rata ekspresi ki-67 antar dua kelompok.

Perbedaan rata-rata antara kelompok dosis serial ekstrak umbi keladi tikus

dengan kelompok kontrol semuanya bermakna dengan perolehan p sebesar

' ''' ( p @ ' '&). al ini ditun"ukkan dengan ekspresi ki-67 pada dosis

!/ '7&& & *&* dan **6 0'!+g,ml yang masing-masing lebih rendah

dibandingkan dengan kelompok kontrol se#ara berurutan dari dosis terke#il

ke terbesar yaitu sebesar 4 !5 6/ 75 dan 4 05.

Perbedaan rata-rata ekspresi ki-67 di kelompok dosis !/ '7&&+g,ml

dengan & *&* dan **6 0'!+g,m "uga signi3ikan ( p E ' '''). al ini

ditun"ukkan dengan ekspresi ki-67 pada dosis & *&* dan **6 0'!+g,ml yang

masing-masing lebih rendah sebesar 4 05 dan 4* &5 dibandingkan dengan

dosis !/ '7&&+g,ml. Perbedaan rata-rata ekspresi ki-67di dosis ekstrak umbi

keladi tikus & *&* dengan **6 0'!+g,ml "uga signi3ikan ( p E ' ''').

7/24/2019 8.BAB IV (1)

5/11

1kspresi ki-67 pada dosis **6 0'!+g,ml lebih rendah 4 !5 "ika

dibandingkan pada ekspresi ki-67 di kelompok dosis & *&*+g,ml.

asil u"i post ho# ini menun"ukkan bah$a ekspresi ki-67 akan

menurun seiring dengan meningkatnya dosis ekstrak umbi keladi tikus yang

digunakan. 1kstrak keladi tikus dosis **6 0'! +g,ml memberikan e3ek paling

tinggi pada ekspresi ki-67.

4.2 Pembahasan

asil u"i statistik dari penelitian ini menun"ukkan ada pengaruh

pemberian serial dosis ekstrak umbi keladi tikus terhadap ekspresi ki-67

dimana pemberian serial dosis ekstrak umbi keladi tikus ini bere3ek

menurunkan ekspresi ki-67. i-67 adalah protein yang terkait dengan

proli3erasi sel dan di ekspresikan pada semua tahapan siklus sel ( oFue et al .

!''*). i-67 "uga merupakan protein yang diekspresikan oleh sel kanker

yang akti3 dan terus menerus melakukan proli3erasi oleh karenanya protein

ini merupakan salah satu marker yang dapat digunakan sebagai alat u"i untuk

mengetahui tingkat proli3erasi suatu sel kanker baik yang diinduksi oleh

senya$a kimia maupun oleh senya$a alamiah yang bersi3at sitotoksik

( #holGen dan

7/24/2019 8.BAB IV (1)

6/11

Penelitian sebelumnya "uga telah menun"ukkan si3at anti kanker dari

senya$a linoleic acid pada umbi keladi tikus antara lain sel MCH-7 dengan

nilai %C&' 60 ' +g,m? (Putra et al. !'*') "uga pada sel murine p0

leukemia (Choo !''*) dan sel 8C%- !0 non-small cell lung carcinoma cell

line (Choon !'' ). Mekanisme C? hingga mampu mempengaruhi ki-67

adalah dengan #ara menghambat pembentukan D8 adduct dan

mengakti3kan ekspresi gen yang terlibat dalam transkripsi dan transduksi

sinyal menginduksi akti ase #aspa#e dan apoptosis sel pada sel tumor

sehingga dapat menghambat proli3erasi sel ( rit#he sky !''').

sam linoleat terkon"ugasi memiliki beberapa isomer seperti c/ t**-

C? dan t *' c*!-C? yang merupakan Gat poten yang berperan dalam

menghambat proli3erasi sel tumor terutama sel kanker dengan reseptor

estrogen positip (Putra !'**). sam linoleat "uga mampu memodi3ikasi

akti itas enGim-enGim yang berhubungan dengan karsinogenesis seperti

protein kinase C protein yang diperlukan dalam proses transduksi sinyal

melalui second messenger . Pada saat transduksi sinyal ini terganggu

penerusan pesan yang berupa rangsang dari luar melalui menu"u ke inti sel

tidak tersampaikan sehingga ekspresi gen men"adi terhambat (?eu !''!

Meiyanto !''! dan Ian#e !''&).

sam linoleat "uga mampu menginduksi apoptosis melalui "alur

intrisik dengan #ara merusak D8 dan peran protein p&0. Protein p&0

merupakan protein tumor supressor yang diakti asi oleh adanya kerusakan

D8 atau adanya stress tertentu pada sel. sam linoleat mampu menginduksi

7/24/2019 8.BAB IV (1)

7/11

apoptosis dengan #ara upregulasi dari protein pro apoptosis Bax dan

menurunkan regulasi dari protein anti apoptosis Bcl-xL sehingga akti itas

proli3erasi sel dapat dikurangi (Putra !'**). erkurangnya proli3erasi sel ini

dapat dilihat dari rendahnya ekspresi ki-67 ( oFue et al . !''*).

elain asam linoleat "uga terdapat senya$a-senya$a lain yang "uga

ditemukan pada ekstrak umbi keladi tikus 3raksi DCM sebagai Gat poten

dalam menghambat pertumbuhan proli3erasi tumor in itro dan menginduksi

apoptosis seperti h exadeconoid acid, dan -hexadecanoic acid (Putra !'**).

enya$a-senya$a tersebut masih terdapat dalam satu ekstrak dan tidak

diisolasi se#ara terpisah. al ini men"adi keterbatasan dalam penelitian ini

karena tidak dapat mengetahui senya$a mana yang paling kuat e3eknya

terhadap ekspresi i-67.

7/24/2019 8.BAB IV (1)

8/11

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

.1 Kesim!"lan

&.*.* Terdapat pengaruh pemberian ekstrak umbi keladi tikus ( Thyphonium

flagelliforme! terhadap ekspresi i-67 sel kanker payudara.

&.*.! Terdapatpengaruh ekstrak umbi keladi tikus( Typhonium flagelliforme!

terhadap ekpresi i-67 sel kanker payudara dengan dosis!/ '7&&

& *&* dan **6 0'! +g,ml dibandingkan dengan kontrol. Dosis

!/ '7&&+g,ml mampu menurunkan ekspresi i-67 sebesar 4 !5 dari

ekspresi i-67 di kontrol dosis & *&*+g,ml mampu menurunkan

ekspresi i-67 sebesar 6/ 75 dari ekspresi i-67 di kontrol dan dosis

**6 0'! +g,mlmampu menurunkan ekspresi i-67 sebesar 4 05 dari

ekspresi i-67 di kontrol.

.2 Sa#an

Mengingat dalam penelitian ini senya$a-senya$a yang terkandung

dalam ekstrak umbi keladi tikus 3raksi diklorometana tidak diisolasi se#ara

terpisah "adi tidak dapat diketahui apakah senya$a-senya$a tersebut

bersi3at sinergis ataukah antagonis terhadap ekspresi ki-67. >ntuk itu dalam

penelitian di masa mendatangsenya$a-senya$a tersebut perlu diisolasi

terpisah agar dapat diketahui senya$a mana yang paling kuat dan yang

paling lemah e3eknya terhadap ekspresi ki-67.

7/24/2019 8.BAB IV (1)

9/11

Lam!i#an 1. Data Penelitian

Dosis(+g,ml) LP1 LP2 LP3 LP4 LP5

ata!"ata

ata!"ata#ese$%"%&an

0 80 79 75 83 86 80.60 78 78 79 86 84 81.00 79 79 78 83 83 80.4 80.7

29,0755 40 45 46 47 32 42.029,0755 39 43 49 46 32 41.829,0755 42 44 45 42 35 41.6 41.858,151 25 27 22 29 20 24.658,151 20 30 24 22 24 24.0

58,151 19 25 25 28 27 24.8 24.5116,302 15 10 9 13 16 12.6116,302 10 9 15 15 13 12.4116,302 9 12 11 14 19 13.0 12.7

Lam!i#an 2. Hasil U$i Statisti% Des%#i!ti&

Means

Case Processing Summary

Cases

Included Excluded Total

N Percent N Percent N Percent

KI67 * Dosis 12 100.0% 0 .0% 12 100.0%

ReportKI67

Dosis Mean N td. De!iation

"ontrol #0.6667 $ .$0 12&'07 (1.#000 $ .20000

#'1 1 2(.(667 $ .(16$$116'$02 12.6667 $ .$0 1Total $&.&000 12 26.#61(6

7/24/2019 8.BAB IV (1)

10/11

0.010.020.030.040.050.060.070.080.090.0

80.7

41.824.5

12.7

Dosis (g/ml)

% Ekspresi Ki-67

Lam!i#an '. Hasil U$i H(m()enitas Va#ian

Test of Homogeneity of VariancesKI67

)e!ene tatistic d 1 d 2 i+.

.7&0 $ # . $$

Lam!i#an 4. Hasil U$i *ne +a, An(-aANOVA

KI67

u, o -uares d Mean -uare i+.

/et een rou s 7&$6.120 $ 26( .$7$ 26( $.7$$ .0003it4in rou s .#00 # .100

Total 7&$6.&20 11

7/24/2019 8.BAB IV (1)

11/11

Lam!i#an . Hasil U$i P(st H( LSD

Multiple ComparisonsKI67) D

5I Dosis 5 DosisMean Di erence

5I8 td. Error i+.

& % Con idence Inter!al

)o er /ound 9 er /ound

"ontrol 2&'07 $#.#6667 * .2 #20 .000 $#.271$ $&.(621

#'1 1 6.20000 * .2 #20 .000 .60(6 6.7& (

116'$02 6#.00000 * .2 #20 .000 67.(0(6 6#. & (

2&'07 "ontrol 8$#.#6667 * .2 #20 .000 8$&.(621 8$#.271$

#'1 1 17.$$$$$*

.2 #20 .000 16.7$7& 17.&2#7116'$02 2&.1$$$$ * .2 #20 .000 2#. $7& 2&.72#7

#'1 1 "ontrol 8 6.20000 * .2 #20 .000 8 6.7& ( 8 .60(6

2&'07 817.$$$$$ * .2 #20 .000 817.&2#7 816.7$7&

116'$02 11.#0000 * .2 #20 .000 11.20(6 12.$& (

116'$02 "ontrol 86#.00000 * .2 #20 .000 86#. & ( 867.(0(6

2&'07 82&.1$$$$ * .2 #20 .000 82&.72#7 82#. $7&

#'1 1 811.#0000 * .2 #20 .000 812.$& ( 811.20(6

*. T4e ,ean di erence is si+ni icant at t4e 0.0 le!el.