55693_ACARA I Revisi

7/24/2019 55693_ACARA I Revisi

1/35

ACARA I

ENZIM

A. Tujuan

Tujuan dari praktikum Acara I Enzim adalah:1. Mengetahui pengaruh pH terhadap aktivitas enzim diastase/amilase.

2. Mengetahui pengaruh knsentrasi terhadap aktivitas enzim diastase/amilase.

!. Mengetahui pengaruh suhu terhadap aktivitas enzim diastase/amilase.". Mengetahui pengujian amilase dari kecam#ah dan #iji kacang hijau.

B. Tinjauan Pustaka

1. Teori

Enzim adalah mlekul prtein $ang #erperan se#agai #ikatalis

dan #er%ungsi untuk mengkatalisis reaksi&reaksi meta#lisme $ang

#erlangsung pada mahkluk hidup. 'ungsi ini dipengaruhi leh %aktr

lingkungann$a seperti temperatur( keasaman )pH*( knsentrasi su#strat(

knsentrasi enzim dan aktivatr. +ada kndisi ptimum( laju reaksi enzimatik

akan #ekerja secara ptimum( sehingga diperleh prduk $ang le#ih #an$ak.

,nsentrasi su#strat adalah salah satu %aktr $ang dapat mempengaruhi

aktivitas enzim amilase. +ada knsentrasi enzim $ang tetap( penam#ahan

knsentrasi su#strat akan menaikkan aktivitas enzim sampai mencapai

#atas maksimum. +ada kndisi terse#ut semua enzim telah jenuh dengan

su#strat( sehingga penam#ahan su#strat sudah tidak akan meningkatkan

aktivitas enzim amilase. +ada temperatur $ang tinggi aktivitas enzim akan

naik( karena mlekul atm mempun$ai energi $ang le#ih #esar dan

mempun$ai kecenderungan untuk #erpindah. ,etika temperatur meningkat(

prses denaturasi juga mulai #erlangsung dan menurunkan aktivitas mlekul

enzim. Terjadin$a penurunan aktivitas ini karena pada temperatur tinggi

struktur enzim akan #eru#ah sehingga sisi akti% enzim akan rusak atau

#eru#ah )-ahri( 212*.-an$ak %aktr $ang mempengaruhi laju reaksi suatu enzim. -e#erapa

%aktr utama $ang mempengaruhi laju reaksi enzim adalah suhu( pH( kekuatan

inik( knsentrasi su#strat( knsentrasi enzim dan adan$a inhi#itr. egala


2/35

sesuatu $ang mempengaruhi struktur tersier prtein enzim akan

mempengaruhi laju reaksi enzim. 0aju reaksi mula&mula akan meningkat pada

#ertam#ahn$a knsentrasi su#strat namun penam#ahan le#ih lanjut

knsentrasi su#strat tidak akan #erpengaruh karena laju maksimum telah

tercapai. 0aju reaksi juga akan meningkat seiring dengan kenaikan suhu(

namun pada suhu terlalu tinggi( enzim kehilangan semua aktivitas jika prtein

terdenaturasi aki#at panas. etiap enzim memiliki pH ptimum $ang

merupakan keadaan dimana enzim dapat #ekerja secara maksimal( dan setiap

enzim memiliki range pH ptimum $ang #er#edaeda. Adan$a inhi#itr juga

dapat mempengaruhi kerja enzim( se#a# inhi#itr adalah agen untuk

mengham#at atau mengurangi laju reaksi enzim )+age( 13*.Amilase adalah enzim $ang dapat menghidrlisis ikatan gliksidik

pada mlekul amilsa dan amilpektin menjadi kmpnen mlekul $ang

kecil( dekstrin( maltsa dan atau gluksa. Amilase secara luas digunakan leh

he4an( tum#uhan dan mikrrganisme untuk mengkatalisis pati menjadi

gluksa $ang digunakan se#agai sum#er energi utama. Amilase juga dapat

dikem#angkan kedalam aplikasi industri lainn$a seperti #iteknlgi( lah

pangan( #idang %armasi( dll. Aktivitas enzim amilase di#e#erapa tanaman

seperti jagung dan gandum( memiliki pH ptimal diantara ".3 & 5.3( serta suhu

ptimal diantara 3 dan 6 )0alknam( 2*.+eru#ahan keakti%an enzim aki#at peru#ahan pH lingkungan

dise#a#kan terjadin$a peru#ahan inisasi enzim( su#strat( atau kimpleks

enzim su#strat. Enzim menunjukkan aktivitas maksimum pada suatu kisaran

pH $ang dise#ut pH ptimum( $ang umumn$a antara pH "(3 sampai (.

uatu enzim tertentu mempun$ai kisaran pH ptimum $ang sangat sempit. 7i

sekitar pH ptimum enzim mempun$ai sta#ilitas $ang tinggi. -e#erapa enzim

$ang mempun$ai pH ptimum $ang sangat ekstrem( misaln$a pepsin pada pH

1( dan arginase pada pH 1( )8inarn( 15*.

Enzim memiliki kekuatan katalitik $ang sangat #esar untuk

mempercepat reaksi dengan mengurangi energi aktivasi se#esar satu juta kali.


3/35

Enzim mudah terdenaturasi dan kehilangan aktivitas katalitikn$a. uhu umum

le#ih tinggi dari " 9 6 dan pH ekstrim harus dihindari setiap saat. Enzim

harus disimpan pada suhu rendah( tetapi tidak harus di#ekukan( karena

pem#ekuan dan pencairan mungkin men$e#a#kan enzim kehilangan aktivitas

)Amutha( 211*.

Amilase adalah enzim hidrlisis $ang #er%ungsi men$e#a#kan

hidrlisis mlekul. 7i #iteknlgi( amilase adalah enzim $ang paling penting

digunakan. +enggunaan utama dari enzim meliputi hidrlisis pati untuk

menghasilkan sirup gluksa( tepung amilase $ang ka$a dan dalam

pem#entukan dekstrin selama pem#akaran dalam industri makanan.elanjutn$a( dalam industri tekstil( amilase digunakan untuk menghilangkan

patisizingdan se#agai #ahan tam#ahan dalam deterjen )erma( 211*.

Enzim dari sum#er mikr#a umumn$a memenuhi permintaan industri

dan le#ih sta#il daripada tanaman dan he4an amilase dan memperleh murah.

Enzim adalah prtein mampu memicu prses #ikimia. -e#erapa mampu

memicu pem#elahan hidrlitik )pencernaan* plimer #ilgis seperti prtein (

kar#hidrat dan lemak. Ini dikenal se#agai hidrlisis. Amilase adalah nama

$ang di#erikan untuk enzim hidrlase gliksida $ang memecah pati menjadi

mlekul gluksa. +a$en dan +ersz adalah $ang pertama untuk men$adari

enzimatik hidrlisis pati di mana mereka menemukan #ah4a ekstrak malt

diknversi pati menjadi gula. Enzim se#agian #esar prtein dengan si%at la#il

dan ada aktivitas katalitik $ang akti% leh agen tertentu seperti suhu( pH(

#ahan kimia( dll $ang mengganggu kn%rmasi asli enzim. +eman%aatan

enzim terutama tergantung pada sta#ilitas perasinal dan pen$impanan. +ati(

$ang merupakan su#strat amilase( adalah #entuk $ang paling #erlimpah

plisakarida pen$impanan $ang signi%ikan $ang #esar di#idang #iteknlgi(

di#er#agai industri penglahan pati. 7alam #e#erapa tahun terakhir ptensi

menggunakan mikrrganisme se#agai sum#er #iteknlgi enzim industri

$ang relevan telah mem#angkitkan minat dalam eksplrasi aktivitas enzimatik


4/35

ekstraseluler dalam #e#erapa mikrrganisme. Amilase memiliki salah satu

$ang paling penting aplikasi industri enzim. Hal ini digunakan dalam

pem#uatan #ir dan %ermentasi industri untuk( dalam industri tekstil( dalam

industri kertas dan industri makanan )Mahajan( 211*.

Amilase merupakan enzim $ang #er%ungsi memecah pati tau glikgen.

en$a4a ini #an$ak terdapat dalam hasil tanaman atau he4an. Amilase dapat

dikelmpkkan menjadi ! glngan enzim( $aitu :a. ;&Amilase( $ang memecah pati secara acak dari tengah atau dari #agian

dalam mlekul( karenan$a dise#ut endamilase.

#. ang kedua( relative sangat lam#at $aitu pem#entukan gluksa dan

maltsa se#agai hasil akhir dan caran$a tidak acak. ,erja enzim ;&amilase

pada mlekul amilpektin akan menghasilkan gluks( maltse( dan #er#agai

jenis ;&limit dextrin)8inarn( 15*.

?ji #enedict digunakan untuk mengidenti%ikasi kar#hidrat melalui

reaksi gula pereduksi. 0arutan alkali dari tem#aga direduksi leh gula $ang

mengandung gugus aldehid atau ketn #e#as( dengan mem#entuk kuprksida

#er4arna. 0arutan #enedict mengandung kupri sul%at( natrium( kar#nat( dan

natrium sitrat. ?ji -enedict dilakukan pada suasana #asa $ang men$e#a#kan

terjadin$a trans%rmasi ismetric. +ada suasana #asa(reduksi in 6u@ dari

6u"leh gula pereduksi akan #erlangsung dengan cepat dan mem#entuk

6u2 $ang merupakan endapan merah #ata. +ereaksi -enedict terdiri dari

lgam 6u dan larutan #asa kuat.


5/35

B 6 H @ 6u2@ 2H B 6 H @ 6u2

Adapun metde dari uji #enedict ialah se#an$ak 3 ml larutan -enedict

dimasukkan kedalam ta#ung reaksi( lalu tam#ahkan tetes #ahan $ang akan

diuji )gluksa( %ruktsa( galaktsa( ara#insa( sukrsa( laktsa( maltsa( dan

pati 1C secara terpisah*. ,emudian( campur dan didihkan selama 2 menit atau

panaskan dalam penangas air selama 3 menit. 7inginkan perlahan dan amati

4arna dan endapan $ang ter#entuk. +eru#ahan 4arna dalam larutan tidak

tidak menunjukkan reaksi psti%. Hal psti% ditunjukkan #ila terdapat

endapan #er4arna hijau( kuning atau merah #ata )-intang( 21*.

+ada perlakuan amilum $ang ditam#ahkan dengan reagen #enedict

menunjukkan hasil negati% terhadap uji #enedict( pada sampel amilum $ang

terdapat dalam pati tidak menunjukkan peru#ahan 4arna )tetap #er4arna #iru*

dan tidak ter#entuk endapan #er4arna merah #ata ketika direaksikan dengan

pereaksi #enedict. Hal terse#ut menunjukkan #ah4a amilum tidak

mengandung gula pereduksi ),us#andari( 213*.

+rinsip dari uji Id adalah larutan pati akan #ereaksi dengan id

mem#entuk 4arna #iru( karena id masuk kedalam kumparan mlekul pati.

en$a4a ini han$a sta#il dalam larutan dingin. +ada pemanasan( 4arna #iru

akan hilang karena mlekul pati meregang( sehingga id lepas dari kumparan

pati( tetapi akan kem#ali menjadi #iru #ila didinginkan. Amilsa akan

mem#erikan 4arna $ang le#ih #iru di#andingkan dengan amilpektin.

edangkan untuk mekanismen$a sendiri dengan meneteskan pati diatas papan

uji atau masukkan 1 m0 larutan pari 1 C lalu tam#ahkan 2 tetes larutan id

2C. 8arna #iru menunjukkan hasil psti% )-intang( 21*.

eperti prtein pada umumn$a( struktur in enzim tergantung pada pH

lingkungann$a. Enzim dapat #er#entuk in psiti%( in negative( atau in

#ermuatan ganda )zwitter ion*. 7engan demikian peru#ahan pH lingkungan

akan #erpengaruh terhadap e%ektivitas #agian akti% enzim dalam mem#entuk


6/35

kmpleks enzim su#strat. 7i samping pengaruh terhadap struktur in pada

enzim( pH rendah atau pH tinggi dapat pula men$e#a#kan terjadin$a prses

denaturasi dan ini akan mengaki#atkan menurunn$a aktivitas enzim

)+edjiadji( 1"*.

Gambar 1.1Hu#ungan antara aktivitas enzim dengan pH

7ari #entuk kurva pada gam#ar terse#ut( tampak #ah4a ada suatu pH

tertentu atau daerah pH $ang dapat men$e#a#kan kecepatan reaksi paling

tinggi. pH terse#ut dinamakan pH ptimim. pH ptimum dari enzim am$lase

misaln$a( dapat diperleh dengan menentukan jumlah milligram gula $ang

ter#entuk dari #e#erapa reaksi $ang menggunakan enzim am$lase pada

#er#agai harga pH dan amilum se#agai su#strat )+edjiadji( 1"*.

6ara kerja dari enzim diastase adalah mengu#ah kar#hidrat kmpleks

atau plisakarida menjadi kar#hidrat dengan rantai kar#n $ang sederhana

atau mnsakarida. Enzim ini #erperan dalam prses %ermentasi madu serta

menghidrlisis pati )kar#hirat*( prtein( dan gliksida. =liksida merupakan

turunan dari mnsakarida( cnthn$a gluksa dan %ruktsa. Aktivitas enzim

diastase dari rentang penelitian pH e%ekti% diastase "& dengan ptimum pada


7/35

5&D* dan diamati #ah4a suhu tampakn$a tidak mempengaruhi nilai pH

ptimum )E$ster( 13*.

7engan idium( glikgen akan mem#entuk 4arna merah. +ada reaksi

hidrlisis parsial( amilum terpecah menjadi mlekul&mlekul kecil $ang

dikenal dengan dekstrin se#elum mem#entuk maltse. -ila dihidrlisis(

amilum dengan larutan idium akan mem#entuk 4arna #iru mem#entuk

amildekstrin $ang dengan idine #er4arna lem#a$ung. 0alu #eru#ah

menjadi eritrdekstrin lalu #er4arna merah dengan idium $ang mem#entuk

akrdekstrin $ang #ila direaksikan dengan idium tidak dapat menghasilkan

4arna )+edjiadi( 1"*.

7engan hasil penggunaan idin untuk me4arnai amilsa menunjukkan

4arna #iru gelap( $ang terjadi karena pem#entukan kmpleks. ,mpleks

terse#ut terjadi aki#at amilsa mem#entuk kumparan heliks disekeliling

mlekul idin. Apa#ila plimer amilsa terputus menjadi le#ih pendek maka

terjadi peru#ahan ikatan kmpleks dengan idin sehingga 4arna menjadi le#ih

muda( merah( atau ckelat )+utri( 212*.

+ati akan mere%leksikan 4arna #iru #ila #erupa plimer gluksa $ang

le#ih #esar dari dua puluh( misaln$a mlekul&mlekul amilsa. -ila

plimern$a kurang dari dua puluh seperti amilpektin( maka akan dapat

dihasilkan 4arna merah. edang desktrin dengan plimer 5( D( dan

mem#entuk 4arna cklat. +limer $ang le#ih kecil dari lima tidak

mem#erikan 4arna dengan idine )8inarn( 2"*.

i%at amilsa dapat larut dalam air. Amilsa mempun$ai struktur rantai

$ang lurus. Apa#ila kadar amilsa tinggi maka pati akan #ersi%at kering(

kurang lekat( dan cenderung meresap air le#ih #an$ak )higriskpis*. +ada

hidrlisis amilsa menghasilkan maltse disamping gluksa dan ligsakarida

lainn$a )Bisn$atiningsih( 211*.

7alam uji $ang dilaksanakan( digunakan " varian sampel $aitu ekstrak

#iji kacang hijau dan tage $ang di#eri lartan #u%%er pH 5 dan $ang tidak


8/35

ditam#ahkan larutan #u%%er pH 5. 0alu keempat sampel terse#ut diinku#asi

pada suhu "6. 7an pada menit ke& dan ke&2 ditetesi larutan Id (1

serta diamati peru#ahan 4arna $ang terjadi pada ekstrak kacang hijau maupun

ekstrak tuge. Terdapat aktivitas enzim amilase pada ekstrak kacang hijau dan

tage( hal terse#ut di#uktikan dengan adan$a 4arna ungu kehitaman ketika

diuji dengan uji id. Enzim ;&amilase #an$ak terdapat pada kecam#ah

kacang&kacangan )uarni dan +atng( 2D*.

2. Bahan

,ecam#ah adalah tum#uhan kecil $ang #aru tum#uh dari #iji kacang&

kacangan $ag disemaikan. edangkan perkecam#ahan adalah serangkaianperisti4a penting $ang terjadi sejak #iji drman sampai menjadi #i#it $ang

sedang tum#uh. ,ecam#ah $ang #erasal dari #iji kacang hijau dise#ut tage.

+erkecam#ahan secara umum dapat meningkatkan karakteristik %ungsinal

dan nilai nutrisi dari kacang&kacangan. 8aktu permulaan perkecam#ahan

$aitu setelah 5 jam Giberellic Acid)=A* mem#entuk enzim ;&amilase. Enzim

terse#ut akan mencerna amilsa dan amilpektin pada pati kecam#ah dalam

12&1 jam perkecam#ahan )Anggrahini( 2D*.

+ereaksi #enedict merupakan pereaksi $ang #erupa larutan $ang

mengandung kuprisul%at( natriumkar#nat dan natriumsitrat. =luksa dapat

mereduksi in 6u@@ dari kuprisul%at menjadi in 6u@ $ang kemudian

mengendap se#agai 6u2. Endapan $ang ter#entuk dapat #er4arna hijau(

kuning atau merah #ata. Adan$a natriumkar#nat dan natriumsitrat mem#uat

pereaksi #enedict #ersi%at #asa lemah. -enedict le#ih #an$ak digunakan untuk

pemeriksaan gluksa dalam urine daripada pereaksi %ehling karena #ersi%at

le#ih peka dan le#ih mudah karena han$a terdiri dari satu larutan

)+edjiadi( 1"*.

Amilum atau $ang sering kita se#ut dengan pati adalah plisakarida

$ang terdapat #an$ak di alam. Amilum terdapat pada um#i( daun( #atang dan

#ijiijian. Amilum terdiri dari dua plisakarida $ang kedua&duan$a adalah

plimer dari gluksa $aitu amilsa dan amilpektin. Mlekul amilpektin


9/35

le#ih #esar daripada mlekul amilsa. -utirutir pati tidak larut dalam air

dingin tetapi apa#ila suspense dalam air dipanaskan( akan terjadi suatu larutan

klidal $ang kental. 0arutan ini apa#ila di#eri larutan idium akan #er4arna

#iru $ang dise#a#kan leh mlekul amilsa $ang mem#entuk sen$a4a .

amilpektin dengan idine akan mem#erikan 4arna ungu atau merah

lem#a$ung )+edjiadi( 1"*.

7iastase adalah nama umum untuk enzim al%a&amilase. 'ungsin$a

adalah pencernaan pati. =the mengusulkan penggunaan jumlah diastase pada

madu se#agai ukuran kualitas( $ang pada saat itu #erarti tidak adan$a

verheating. Hal ini muncul lgis( se#agai enzim( diastase melemah ataudihancurkan leh panas )8hite( 1"*.

Enzim diastase adalah enzim dari le#ah $ang cara kerjan$a adalah

meru#ah kar#hidrat kmpleks atau plisakarida menjadi kar#hidrat dengan

rantai kar#n $ang le#ih sederhana. -erperan dalam prses %ermentasi madu

serta menghidrlisis pati( prtein dan gliksida. Akti% dalam rentang pH "&

dan ptimum pada pH 5&D. 7iastase atau amilase merupakan enzim $ang

diprduksi leh #er#agai makhluk hidup seperti pada tum#uhan $aitu kacang

hijau( temula4ak( pada he4an seperti dari #akteri dan juga terdapat pada

manusia )E$ster( 13*.

=luksa merupakan kar#hidrat $ang paling sederhana $ang juga

dikenal se#agai dekstrsa. =luksa terdapat dalam jumlah $ang #ervariasi

dalam sa$uran( #uahuahan( dan juga dalam darah #inatang. =luksa

#er4ujud padatan #er4arna putih dan meleleh pada suhu 1"56. gluksa

#iasan$a dapat dijumpai dalam #entuk sirup. irup gluksa atau gluksa

kmersial #ukanlah gluksa murni tetapi campuran dari gluksa( sen$a4a

kar#hidrat lain dan air )=aman dan herringtn( 12*.

=likgen adalah plisakarida $ang disimpan dalam tu#uh he4an.

ering dise#ut pati he4an. =likgen merupakan struktur $ang le#ih #erca#ang

dari pada amilpektin dengan rantai residu 11&&;&7&glukpiransa )dengan

ikatan ; F1 "G( ; )1 5*&=luksida. elulsa adalah unsur pem#entuk utama


10/35

kerangka tum#uh&tum#uhan. elulsa tidak mem#eri 4arna dengan $dium

dan tidak larut dalam pelarut #iasa )Martin( 1D*.

C. Metodoo!i

1. Alat

a. +ipet tetes#. +ipet vlume

c. Ta#ung reaksi

d. Bak ta#ung reaksie. =elas ukur

%. =elas #aker

g. 0empeng atau ca4an prselin

h. Waterbath

i. Mrtar j. Tim#angan

k. tp4atchl. +enjepit

m. ,ain saring

n. 8rapo. Test plate

2. -ahan

a. Auades 1 ml#. -iji kacang hijau 1 gram

c. -u%%er pH "( 5(

d. 0arutan idine (1 M dan (1 e. 0arutan diastase%. 0arutan glikgen 1C

g. 0arutan amilum 1C

h. 0arutan dekstrin 1Ci. 0arutan gluksa .1 M( .2 M( .! M

j. 0arutan selulsa 1C

k. Beagen #enedictl. Tauge 1 gram


11/35

milum 1%; 6 ml bufer pH 6,0 + 3 ml lar dekstrin 1%; 6 ml bufer pH 8,0 + 3 ml lar glikogen

dekstrin 1%; 6 ml bufer pH 8,0 + 3 ml lar glikogen 1%

Pengisian pada masing-masing tabung

Penambaan larutan ke masing-masing tabun

1 ml diastase

Penginkubasian pada suu 40 selama !0 men

Pengamatan setiap 3 atau "menit

Pengamatan perubaan #arna

Penambaan pada test plate1 tetes larutan $od 0,01

Pengambilan 1 tetes larutan dan penetesan pada te

Pen&iapan ' tabung reaksi

Penambaan masing-masing tabung1 ml reagen benedi(t

Pemanasan selama 10 menit

Pengamatan perubaan #arna dan endapan

Pemasukan dalam tabung reaksi

! ml lar) benedi(t dan 1 ml lar) *lukosa 0,01 ; 0,0! ; 0,03

Penginkubasian selama "-10 menit

Pengamatan dan pen(atatan

Penambaan pada lempeng porselin

Penetesan pada lempeng porselin

tetes ar selulosa 1%; 1 tetes lar glikogen 1%;1 tetes lar amilum 1%

1 tetes ar $od 0,01

Pengamatan dan pen(atatan perubaan #arna

!. 6ara ,erja )Flowchart*

a. +erc#aan 1: +engaruh pH terhadap Aktivitas Enzim 7iastase/ Amilase

#. ?ji -enedict

c. ?ji Id


12/35

Penginkubasian tabung 3 dan 4 pada suu 100 selama 10 men

Penginkubasian tabung " dan 6 pada suu kamar selama 30 me

1 ml $od 0,01

Pengisian pada tabung reaksi

Penginkubasian tabung 1 dan ! pada suu 40 selama 30 men

Penambaan pada masing-masing tabung

Pengamatan perubaan #arna

! ml amilum 1% + ! ml lar diastase

Pen&iapan 6 tabung reaksi

d. +erc#aan 2: +engaruh suhu terhadap Aktivitas Enzim 7iastase/ Amilase

e.

7isiapkan 5 ta#ung reaksi7isiapkan 5 ta#ung reaksi


13/35

.uades 100 ml

100 gram bi/i ka(ang i/au dan 100 gram taoge

Pengomogenan dengan mortar

Penambaan dan pen&aringan dengan kain saring

Penambaan ke dalam tiap tabung reaksi

Penambaan pada tabung 1 dan !

Penambaan pada tabung 3 dan 4

Penginkubasian pada suu 40

1 tetes $od 0,01

1 ml ekstrak taoge

1 ml ekstrak ka(ang i/au

3 ml amilum 1% dan 6ml lar)bufer pH 6

Penambaan pada lempeng porselin

Pengambilan 1 tetes baan pada menit ke 0 dan ke !

Pen&iapan 4 tabung reaksi

Pen(atatan perubaan #arna &ang ter/adi

Pen(atatan perubaan #arna &ang ter/adi

d. +engujian Amilase pada ,ecam#ah


14/35

". #asi dan Pembahasan

Tabe 1.1.1 Pen!aruh $# Terhada$ Akti%itas En&im "iastase

,el

u#strat

5

ml

0ar.

-u%

%er

+eru#ahan 8arna

Tanpa

penam#aha

n Id

3 1 13 2

1Amilum

1C"

Agak

keruh

range

kecklatan

-ening

kerangean-ening -ening

2Amilum

1C5

+utih agak

keruh-ening -ening -ening -ening

!Amilum

1C

+utih agak

keruh

Merah #ata

pekat

Merah #ata

pekatMerah #ata

Merah

#ata

"Amilum

1C" -ening cklat ,uning ,uning

,uning

muda

3Amilum

1C5 -ening ,uning

,uning

muda

,uning

muda

,uning

muda

5Amilum

1C -ening

-iru

keunguan

-iru

keunguan

-iru

keunguan

-iru

kehitaman

D7ekstrin

1C"

+utih

keruh

-ening

kerangean

-ening

kerangean-ening -ening

7ekstrin

1C5

+utih

keruh-ening -ening -ening -ening

7ekstrin

1C

+utih

keruhrange

-ening

kerangean

range

kecklatan-ening

1=likgen

1C" -ening range range -ening -ening

11=likgen

1C5 -ening range range range -ening

12=likgen

1C -ening range range

range

kecklatanrange

1! 7ekstrin " -ening ,uning ,uning ,uning ,uning


15/35

1C

1"7ekstrin

1C

5 -ening ,uning 6klat,uning

muda

,uning

muda13

7ekstrin

1C -ening range range 6klat muda range

15=likgen

1C" -ening

,uning

muda,uning

,uning

muda,uning

1D=likgen

1C5 -ening ,uning ,uning

,uning

muda

,uning

muda

1=likgen

1C -ening ,uning tua

,uning

mudarange ,uning

um#er : 0apran sementara

+ada praktikum perc#aan 1.1.1 ini #ertujuan untuk mengetahui#agaimana pengaruh pH terhadap aktivitas enzim diastase. Amilase adalah enzim

$ang dapat menghidrlisis ikatan gliksidik pada mlekul amilsa dan

amilpektin menjadi kmpnen mlekul $ang kecil( dekstrin( maltsa dan atau

gluksa. Amilase secara luas digunakan leh he4an( tum#uhan dan

mikrrganisme untuk mengkatalisis pati menjadi gluksa $ang digunakan

se#agai sum#er energi utama. Amilase juga dapat dikem#angkan kedalam

aplikasi industri lainn$a seperti #iteknlgi( lah pangan( #idang %armasi( dll.

Aktivitas enzim amilase di#e#erapa tanaman seperti jagung dan gandum(

memiliki pH ptimal diantara ".3 & 5.3( serta suhu ptimal diantara 3 dan 6

)0alknam( 2*.

ampel $ang digunakan dalam perc#aan terdiri atas larutan amilum 1C(

dekstrin 1C dan glikgen 1C. 7imana 4arna a4al dari larutan amilum 1C

adalah putih agak keruh( larutan dekstrin 1C adalah putih keruh dan larutan

glikgen 1C adalah #ening. us#trat $ang digunakan dalam praktikum adalah

1.3 ml $ang dicampurkan dengan larutan #u%%er ! ml dengan #er#agai macampH( dan ditam#ahkan dengan 1 ml larutan enzim diastase. etelah itu diinku#asi

selama 2 menit dengan suhu "6 dalam waterbathdan setiap 3 menit sekali

diam#il dan diuji dengan menggunakan larutan id. Hasil dari uji id dalam

menit ke&3 adalah larutan amilum 1C dengan pH " #er4arna range( pH 5


16/35

#er4arna #ening( pH #er4arna merah #ata pekat. ?ntuk larutan dekstrin 1C

dengan pH " #er4arna #ening range( pH 5 #er4arna #ening( dan pH #er4arna

range. ?ntuk larutan glikgen 1C dengan pH "& #er4arna range. +ada menit

ke&1 4arna $ang dihasilkan setelah diuji dengan larutan id semakin memudar(

namun dari ! perlakuan pH $ang dilakukan han$a pada pH 5 peru#ahan 4arna

$ang le#ih cepat( $aitu #eru#ah 4arna menjadi #ening. 7an untuk pH " dan

mengalami peru#ahan 4arna setelah diuji dengan larutan id namun han$a

sedikit demi sedikit peru#ahan 4arna menuju 4arna #ening.

+rinsip dari uji Id adalah larutan pati akan #ereaksi dengan id

mem#entuk 4arna #iru( karena id masuk kedalam kumparan mlekul pati.en$a4a ini han$a sta#il dalam larutan dingin. +ada pemanasan( 4arna #iru akan

hilang karena mlekul pati meregang( sehingga id lepas dari kumparan pati(

tetapi akan kem#ali menjadi #iru #ila didinginkan. Amilsa akan mem#erikan

4arna $ang le#ih #iru di#andingkan dengan amilpektin. edangkan untuk

mekanismen$a sendiri dengan meneteskan pati diatas papan uji atau masukkan 1

m0 larutan pari 1 C lalu tam#ahkan 2 tetes larutan id 2C. 8arna #iru

menunjukkan hasil psti% )-intang( 21*.


4arna #iru gelap( $ang terjadi karena pem#entukan kmpleks. ,mpleks terse#ut

terjadi aki#at amilsa mem#entuk kumparan heliks disekeliling mlekul idin.

Apa#ila plimer amilsa terputus menjadi le#ih pendek maka terjadi peru#ahan

ikatan kmpleks dengan idin sehingga 4arna menjadi le#ih muda( merah( atau

ckelat )+utri( 212*.7engan idium( glikgen akan mem#entuk 4arna merah. -ila dihidrlisis(

amilum dengan larutan idum akan mem#entuk 4arna #iru mem#entuk

amildekstrin $ang dengan idine #er4arna lem#a$ung. 0alu #eru#ah menjadi

eritrdekstrin lalu #er4arna merah dengan idium $ang mem#entuk akrdekstrin

$ang #ila direaksikan dengan idium tidak dapat menghasilkan 4arna. +ada

reaksi hidrlisis parsial( amilum terpecah menjadi mlekul&mlekul kecil $ang

dikenal dengan dekstrin. Jadi dekstrin adalah hasil antara pada prses hidrlisis


17/35

se#elum ter#entuk maltsa. Tahap&tahap dalam prses hidrlisis amilum serta

4arna $ang terjadi pada reaksi dengan idium adalah se#agai #erikut :

Tahap hidrlisis amilum 4arna dengan idium #iru

Amilum terlarut #iru

Amildekstrin lem#a$ung

Eritrdekstrin merah

Akrdekstrin tidak #er4arna

matsa

)+edjiadi( 1"*.-erdasarkan teri $ang ada menunjukkan #ah4a peru#ahan 4arna larutan

sampel $ang telah diuji dengan lerutan id menunjukkan hal $ang sama sehingga

pada perc#aan ini sudah sesuai dengan teri. Hal $ang mempengaruhi dalam

perc#aan ini adalah salah satun$a pH $ang digunakan( $ang merupakan salah

satu %actr dalam aktivitas enzim. -erdasrkan praktikum dapat dilihat #ah4a

penggunaan pH 5 adalah pH ptimum enzim diastase. Hal terse#ut dikarenakan

peru#ahan 4arna $ang le#ih cepat terletak pada pH 5. +eru#ahan keakti%an enzim

aki#at peru#ahan pH lingkungan dise#a#kan terjadin$a peru#ahan inisasi

enzim( su#strat( atau kimpleks enzim su#strat. Enzim menunjukkan aktivitas

maksimum pada suatu kisaran pH $ang dise#ut pH ptimum( $ang umumn$a

antara pH "(3 sampai (. uatu enzim tertentu mempun$ai kisaran pH ptimum

$ang sangat sempit. 7i sekitar pH ptimum enzim mempun$ai sta#ilitas $ang

tinggi. -e#erapa enzim $ang mempun$ai pH ptimum $ang sangat ekstrem(

misaln$a pepsin pada pH 1( dan arginase pada pH 1( )8inarn( 15*.

eperti prtein pada umumn$a( struktur in enzim tergantung pada pH

lingkungann$a. Enzim dapat #er#entuk in psiti%( in negative( atau in


18/35

#ermuatan ganda )zwitter ion*. 7engan demikian peru#ahan pH lingkungan akan

#erpengaruh terhadap e%ektivitas #agian akti% enzim dalam mem#entuk kmpleks

enzim su#strat. 7i samping pengaruh terhadap struktur in pada enzim( pH

rendah atau pH tinggi dapat pula men$e#a#kan terjadin$a prses denaturasi dan

ini akan mengaki#atkan menurunn$a aktivitas enzim )+edjiadji( 1"*.

Tabe 1.1.2 'ji Benedi(t

hi%t ,el u#strat-u%%er

)pH*

+eru#ahan 8arna Jumlah

Endapan8arna A4al 8arna Akhir

1

" Amilum 1C " -iru muda -iru tscaTidak ada

endapan

3 Amilum 1C 5 -iru muda range Ada endapan

5 Amilum 1C -iru muda Hijau Ada endapan1! 7ekstrin 1C " -iru muda -iru kuning

Tidak ada

endapan

1" 7ekstrin 1C 5 -iru muda range tua Ada endapan

13 7ekstrin 1C -iru muda range Ada endapan

15 =likgen 1C " -iru muda -iru tscaTidak ada

endapan

1D =likgen 1C 5 -iru muda ,uning tua Ada endapan

1 =likgen 1C -iru muda ,uning Ada endapan

2

1 Amilum 1C " -iru muda Merah #ata

angat

#an$ak

endapan

2 Amilum 1C 5 -iru muda Merah #ata

angat

#an$ak

endapan

! Amilum 1C -iru muda Merah #ata

angat

#an$ak

endapan

D 7ekstrin 1C "-iru muda

keruhMerah #ata

edikit

endapan

7ekstrin 1C 5-iru muda

keruhMerah #ata

-an$ak

endapan

7ekstrin 1C -iru muda

keruhMerah #ata

edikit

endapan

1 =likgen 1C " -iru muda Merah #ata

-an$ak

endapan

11 =likgen 1C 5 -iru muda Merah #ataedikit

endapan

12 =likgen 1C -iru muda Merah #ata-an$ak

endapan

um#er : 0apran sementara


19/35

?ji #enedict digunakan untuk mengidenti%ikasi kar#hidrat melalui reaksi

gula pereduksi. 0arutan alkali dari tem#aga direduksi leh gula $ang

mengandung gugus aldehid atau ketn #e#as( dengan mem#entuk kuprksida

#er4arna. 0arutan #enedict mengandung kupri sul%at( natrium( kar#nat( dan

natrium sitrat. ?ji -enedict dilakukan pada suasana #asa $ang men$e#a#kan

terjadin$a trans%rmasi ismetric. +ada suasana #asa(reduksi in 6u@dari 6u"

leh gula pereduksi akan #erlangsung dengan cepat dan mem#entuk 6u2 $ang

merupakan endapan merah #ata. +ereaksi -enedict terdiri dari lgam 6u dan

larutan #asa kuat.

B 6 H @ 6u2@ 2H B 6 H @ 6u2

Adapun metde dari uji #enedict ialah se#an$ak 3 ml larutan -enedict

dimasukkan kedalam ta#ung reaksi( lalu tam#ahkan tetes #ahan $ang akan diuji

)gluksa( %ruktsa( galaktsa( ara#insa( sukrsa( laktsa( maltsa( dan pati 1C

secara terpisah*. ,emudian( campur dan didihkan selama 2 menit atau panaskan

dalam penangas air selama 3 menit. 7inginkan perlahan dan amati 4arna dan

endapan $ang ter#entuk. +eru#ahan 4arna dalam larutan tidak tidak

menunjukkan reaksi psti%. Hal psti% ditunjukkan #ila terdapat endapan

#er4arna hijau( kuning atau merah #ata )-intang( 21*.

+ada praktikum uji #enedict digunakn sampel $ang telah dipanaskan dalam

waterbath( dengan penam#ahan reagen #enedict 1 ml. 4arna a4al larutan

amilum adalah #iru muda( dekstrin #er4arna #iru muda keruh dan glikgen

#er4arna #iru muda. 7engan pemanasan suhu 6 selama 1 menit maka dapat

dilihat peru#ahan 4arna dan terdapatn$a endapan merah #ata $ang menandakan

adan$a gula pereduksi. 8aktu pemanasan terjadi peru#ahan 4arna $ang a4aln$a

#iru menjadi hijau dan akhirn$a menjadi 4arna merah #ata. Adan$a endapan

merah #ata tese#ut dikarenakan sampel dengan perlakuan a4al terse#ut telah

terhidrlisis mejadi gula sederhana dengan #antuan enzim diastase. 7alam


20/35

perc#aan $ang paling #an$ak mengandung endapan merah #ata adalah larutan

amilum 1C. amun pada data shi%t 1 didapatkan 4arna akhir sampel ada $ang

tidak merah #ata( hal terse#ut dikarenakan tidak sempurnan$a hidrlisis enzim

diastase $ang #ekerja pada sampel terse#ut.

Tabe 1.2 'ji Benedi(t

,elmpk u#strat+eru#ahan 8arna

hi%t 8arna A4al 8arna Akhir

"( 3( 5 =luksa .1 M -iru Hijau

1 1!( 1"( 13 =luksa .2 M -iru Merah #ata

15( 1D( 1 =luksa .! M -iru Merah #ata tua

1( 2( ! =luksa .1 M -iru #ening Hijau keruh

2 D( ( =luksa .2 M -iru #ening Merah kecklatan

1( 11( 12 =luksa .! M -iru #ening Merah #ata

um#er : 0apran ementara?ji #enedict dilakukan untuk menguji ada atau tidakn$a gula pereduksi

pada larutan kar#hidrat. u#strat $ang digunakan dalam perc#aan ini adalah

larutan gluksa .1 M( 2 M( .!M. +erc#aan dilakukan dengan

memasukkan masing&masing su#strat se#an$ak 1 ml dan pereaksi #enedict

se#an$ak 2 ml kedalam ta#ung reaksi( selanjutn$a diinku#asi dalam air mendidih

selama 3&1 menit. +ada shi%t 1 setelah prses pemanasan terjadi peru#ahan

4arna dari 4arna #iru menjadi hijau pada gluksa .1 M( pada gluksa .2 M

peru#ahan 4arna terjadi dari #iru menjadi merah #ata dan pada gluksa .! M

peru#ahan 4arna terjadi dari #iru menjadi merah #ata tua. edangkan hasil dari

perc#aan shi%t 2 setelah prses pemanasan menunjukkan peru#ahan dari 4arna

a4al #iru #ening menjadi hijau keruh pada gluksa .1 M. +ada gluksa .2 M

peru#ahan 4arna terjadi dari #iru #ening menjadi merah keckelatan dan pada

gluksa .! M peru#ahan 4arna terjadi dari #iru #ening menjadi merah #ata.

8arna akhir terse#ut merupakan 4arna endapan $ang ter#entuk.

7ari hasil perc#aan pada shi%t 1 dan shi%t 2( semua sampel menghasilkan

endapan #er4arna hijau dan merah #ata $ang menunjukkan #ah4a semua sampel

mengandung gula pereduksi )8inarn( 2"*( namun endapan paling #an$ak

terdapat pada sampel gluksa .! M( sehingga dapat disimpulkan #ah4a


21/35

semakin tinggi knsentrasi( endapan $ang ter#entuk semakin #an$ak dan 4arna

dari endapan $ang ter#entuk semakin pekat dan mendekati 4arna merah #ata( hal

ini sesuai dengan teri dari +edjiadi )1"* #ah4a semakin tinggi knsentrasi

maka 4arnan$a semakin mendekati merah #ata. +erlakuan $ang sama dilakukan

pada sampel amilum menunjukkan hasil negati% terhadap uji #enedict( pada

sampel amilum $ang terdapat dalam pati tidak menunjukkan peru#ahan 4arna

)tetap #er4arna #iru* dan tidak ter#entuk endapan #er4arna merah #ata ketika

direaksikan dengan pereaksi #enedict. Hal terse#ut menunjukkan #ah4a amilum

tidak mengandung gula pereduksi ),us#andari( 213*.

+ereaksi #enedict merupakan pereaksi $ang #erupa larutan $angmengandung kuprisul%at( natriumkar#nat dan natriumsitrat. =luksa dapat

mereduksi in 6u@@dari kuprisul%at menjadi in 6u@ $ang kemudian mengendap

se#agai 6u2. Endapan $ang ter#entuk dapat #er4arna hijau( kuning atau merah

#ata. 8arna endapan ini tergantung pada knsentrasi kar#hidrat $ang diperiksa.

7alam se#uah perc#aan dengan larutan gluksa 1C( endapan $ang ter#entuk

adalah merah #ata( sedangkan apa#ila menggunakan gluksa (1C endapan $ang

terjadi #er4arna hijau kekuningan. 7engan kata lain semakin tinggi knsentrasi

larutan sampel( maka 4arna endapan $ang ter#entuk akan semakin pekat

mendekati merah #ata )+edjiadi( 1"*.

Tabe 1.) 'ji Iod

hi%

t,el u#strat

+eru#ahan 8arna

8arna A4al 8arna Akhir

1 " elulsa 1C -ening ,uning


22/35

3 elulsa 1C -ening ,uning

5 elulsa 1C -ening ,uning

1! =likgen 1C -ening range1" =likgen 1C -ening range

13 =likgen 1C -ening range

15 Amilum 1C -ening -iru keunguan

1D Amilum 1C -ening -iru keunguan

1 Amilum 1C -ening -iru keunguan

2

1 Amilum 1C +utih agak keruh -iru kehitaman

2 Amilum 1C +utih agak keruh -iru kehitaman

! Amilum 1C +utih agak keruh -iru kehitaman

D =likgen 1C -ening range

=likgen 1C -ening range

=likgen 1C -ening range1 elulsa 1C -ening -ening

11 elulsa 1C -ening -ening

12 elulsa 1C -ening -ening

um#er : lapran sementara

+ada praktikum uji id #ertujuan untuk mengetahui apakah pada sampel

$ang digunakan terdapat plisakaridaatau tidak. ampel $ang digunakan dalam

uji id adalah larutan amilum 1C( glikgen 1C( dan selulsa 1C. ,etiga sampel

terse#ut merupakan plisakarida atau plimer dari mnsakarida. 7alam

pelaksanaann$a( larutan amilum 1C( glikgen 1C( dan selulsa 1C diam#il

dengan pipet dan diteteskan dalam test plate se#an$ak satu tetes( setelah itu

dilanjutkan dengan mem#erikan satu tetes larutan id ).3 id dalam !C ,I*.

etelah ditetesi larutan id( diamati peru#ahan 4arna pada ketiga sempel

terse#ut. 8arna a4al pada larutan amilum 1C adalah putih agak keruh dan

setelah ditetsi larutan id #eru#ah 4arna menjadi #iru kehitaman. +ada larutan

glikgen 1C 4arna a4aln$a adalah #ening dan setelah ditetesi larutan id

#eru#ah 4arna menjadi range( dan untuk larutan selulsa 1C 4arna a4aln$a

adalah #ening dan setelah ditetesi larutan id tidak terdapat peru#ahan 4arna.

+ati $ang #erikatan dengan idine )I2* akan menghasilkan 4arna #iru. i%at

ini dapat digunakan untuk menganalisis adan$a pati. Hal ini dise#a#kan leh

struktur mlekul pati $ang #er#rntuk spiral( sehingga akan mengikat mlekul


23/35

idin dan ter#entuklah 4arna #iru. -ila pati dipanaskan( spiral merenggang(

mlekul&mlekul idine terlepas sehingga 4arna #iru hilang. +ati akan

mere%leksikan 4arna #iru #ila #erupa plimer gluksa $ang le#ih #esar dari dua

puluh( misaln$a mlekul&mlekul amilsa. -ila plimern$a kurang dari dua

puluh seperti amilpektin( maka akan dapat dihasilkan 4arna merah. edang

desktrin dengan plimer 5( D( dan mem#entuk 4arna cklat. +limer $ang le#ih

kecil dari lima tidak mem#erikan 4arna dengan idine )8inarn( 2"*.


4arna #iru gelap( $ang terjadi karena pem#entukan kmpleks. ,mpleks terse#ut

terjadi aki#at amilsa mem#entuk kumparan heliks disekeliling mlekul idin.

Apa#ila plimer amilsa terputus menjadi le#ih pendek maka terjadi peru#ahan

ikatan kmpleks dengan idin sehingga 4arna menjadi le#ih muda( merah( atau

ckelat )+utri( 212*.

7engan idium( glikgen akan mem#entuk 4arna merah kecklatan. +ada

reaksi hidrlisis parsial( amilum terpecah menjadi mlekul&mlekul kecil $ang

dikenal dengan dekstrin se#elum mem#entuk maltse. -ila dihidrlisis( amilum

dengan larutan idum akan mem#entuk 4arna #iru mem#entuk amildekstrin

$ang dengan idine #er4arna lem#a$ung. 0alu #eru#ah menjadi eritrdekstrin

lalu #er4arna merah dengan idium $ang mem#entuk akrdekstrin $ang #ila

direaksikan dengan idium tidak dapat menghasilkan 4arna )+edjiadi( 1"*.

+ada hasil perc#aan didapatkan hasil peru#ahan 4arna dari amilum $ang

semula putih agak keruh menjadi #iru kehitaman setelah di#eri larutan id. Hasil

terse#ut sesuai dengan teri( dimana #erdasarkan teri setelah di#eri larutan id

#er4arna #iru gelap. ?ntuk glikgen $ang semula #er4arna #ening dan setelah

di#eri larutan id #eru#ah 4arna menjadi 4arna range( dimana hal terse#ut

#er#eda dengan teri $ang men$atakan #ah4a glikgen $ang ditam#ahkan

dengan id akan #er4arna merah kecklatan. ?ntuk selulsa $ang ditam#ahkan

dengan larutan id pada praktikum akan #er4arna kuning pada shi%t pertama dan

#er4arna #ening pada shi%t kedua. Menurut Martin )1D*( selulsa adalah unsur


24/35

pem#entuk utama kerangka tum#uh&tum#uhan. elulsa tidak mem#eri 4arna

dengan $dium dan tidak larut dalam pelarut #iasa.

Tabe 1.* Pen!aruh Perubahan +uhu Terhada$ Ati%itas En&im Amiase

hi%t ,elmpk uhu8aktu

Inku#asi

+eru#ahan 8arna

8arna A4al8arna

Akhir

"( 3 "6 ! menit -ening,uning

#ening

15( 1! "6 ! menit -ening

,uning

#ening

1"( 13 16 1 menit -ening ?ngu tua

15( 1D 16 1 menit -ening ?ngu tua

1 uhukamar

! menit -ening ,uningkeruh

1( 2 "6 ! menit -ening,uning

#ening

2!( D "6 ! menit -ening

,uning

#ening

( 16 1 menit -ening-iru

keunguan

1( 11 16 1 menit -ening-iru

keunguan

12uhu

kamar ! menit -ening

,uning

keruhkecklatan

um#er : 0apran ementara

-an$ak %aktr $ang mempengaruhi laju reaksi suatu enzim. -e#erapa

%aktr utama $ang mempengaruhi laju reaksi enzim adalah suhu( pH( kekuatan

inik( knsentrasi su#strat( knsentrasi enzim dan adan$a inhi#itr. egala

sesuatu $ang mempengaruhi struktur tersier prtein enzim akan mempengaruhi

laju reaksi enzim. 0aju reaksi mula&mula akan meningkat pada #ertam#ahn$a

knsentrasi su#strat namun penam#ahan le#ih lanjut knsentrasi su#strat tidak

akan #erpengaruh karena laju maksimum telah tercapai. 0aju reaksi juga akan

meningkat seiring dengan kenaikan suhu( namun pada suhu terlalu tinggi( enzim

kehilangan semua aktivitas jika prtein terdenaturasi aki#at panas. etiap enzim

memiliki pH ptimum $ang merupakan keadaan dimana enzim dapat #ekerja


25/35

secara maksimal( dan setiap enzim memiliki range pH ptimum $ang #er#eda&

#eda. Adan$a inhi#itr juga dapat mempengaruhi kerja enzim( se#a# inhi#itr

adalah agen untuk mengham#at atau mengurangi laju reaksi enzim )+age( 13*.

+ada suhu rendah reaksi kimia akan #erlangsung lam#at( sedangkan pada

suhu $ang le#ih tinggi reaksi akan memiliki laju $ang le#ih cepat. +eningkatan

suhu dapat meningkatkan kecepatan reaksi karena mlekul atm mempun$ai

energi $ang le#ih #esar dan mempun$ai kecenderungan untuk pindah $ang le#ih

#esar sehingga reaksin$a #erlangsung le#ih cepat )-ahri et al( 212*. Hal ini

#erlaku juga pada reaksi $ang dikatalis leh enzim( enzim tidak memiliki

aktivitas $ang maksimal pada suhu $ang terlalu rendah dan juga pada suhu $angterlalu tinggi. +ada temperatur $ang terlalu tinggi enzim akan mengalami

denaturasi sehingga #agian akti% enzim akan terganggu dan dengan demikian

knsentrasi e%ekti% enzim menjadi #erkurang dan kecepatan reaksin$a pun akan

menurun )+edjiadi( 1"*.

+erc#aan untuk mengetahui pengaruh %aktr suhu terhadap kerja enzim

amilase dilakukan dengan menggunakan larutan amilum 1C dan larutan diastase

masing&masing se#an$ak 2 ml $ang dimasukkan kedalam ta#ung reaksi dan

kemudian diinku#asi pada suhu "6( 16( dan pada suhu kamar. Hasil

perc#aan kelmpk $ang melakukan inku#asi pada suhu " 6 selama ! menit

pada shi%t 1 )kelmpk "( 3( 5( 1!* menunjukkan hasil $ang sama dengan shi%t 2

)kelmpk 1( 2( !( D* $aitu peru#ahan 4arna a4al #ening menjadi kuning #ening

setelah dicampurkan dengan 1 ml larutan id .1 . Hasil ini menandakan

#ah4a uji ini negati% terhadap uji id( karena pada suhu "6( enzim diastase

#erada pada kisaran suhu ptimumn$a sehingga enzim ini dapat #ekerja secara

maksimal untuk mengikat su#strat )amilum* dan memecahn$a menjadi gula $ang

le#ih sederhana sehingga tidak menghasilkan 4arna ungu atau #iru saat

penam#ahan larutan id.Hasil perc#aan kelmpk $ang melakukan inku#asi pada suhu 16

selama 1 menit pada shi%t 1 )kelmpk 1"( 13( 15( 1D* menunjukkan peru#ahan

4arna #ening menjadi ungu tua( sedangkan pada shi%t 2 )kelmpk ( ( 1( 11*


26/35

menunjukkan hasil akhir larutan #er4arna #iru keunguan( hal ini menandakan

#ah4a kedua uji ini psiti% terhadap uji id. +ada saat suhu 16( enzim diastase

mengalami penurunan aktivitas dan terdenaturasi sehingga enzim tidak dapat

mengikat su#strat )amilum* men$e#a#kan su#strat masih dalam #entuk

plisakarida sehingga menghasilkan 4arna ungu atau #iru ketika penam#ahan

larutan id.

Hasil perc#aan kelmpk $ang melakukan inku#asi pada suhu ruang

selama ! menit pada shi%t 1 )kelmpk 1* menunjukkan peru#ahan 4arna

#ening menjadi kuning keruh dan pada shi%t 2 )kelmpk 12* menghasilkan

larutan #er4arna kuning keruh keckelatan saat ditam#ahkan larutan id. Hal inimenandakan #ah4a pada suhu ruang sekitar 23&!D6 enzim diastase sudah mulai

#ekerja mengikat amilum namun #elum #erada pada kndisi ptimaln$a

sehingga plisakarida #eru#ah menjadi gula $ang le#ih sederhana dan negati%

terhadap uji id. ecara keseluruhan hasil perc#aan pengaruh suhu terhadap

aktivitas enzim amilase sudah sesuai dengan teri +edjiadi )1"* $ang

men$e#utkan #ah4a enzim amilase memiliki suhu ptimum pada kisaran suhu

"&36. +ada suhu di#a4ah "6 enzim amilase sudah mulai #ekerja namun

#elum secara maksimal dan pada suhu terlalu tinggi enzim amilase akan

terdenaturasi. e#agian enzim mengalami denaturasi pada suhu diatas 5 6. +ada

uji id apa#ila muncul 4arna #iru atau ungu setelah penam#ahan larutan id

maka menunjukkan adan$a pati )plisakarida* dalam sampel )8inarn( 2"*.

Tabe 1., Pen!ujian Amiase dari Tau!e dan -a(an! #ijau

,el ampel

+eru#ahan 4arna

hi%

t8arna

a4al

8arna

menit ke&

8arna

menit ke&2

"( 3( 5

! ml ekstrak kacang

hijau @ 5 ml #u%%er pH 5

@ ! ml amilum 1C

Hijau

keruh

6kelat

mudaMerah

11!( 1"

! ml ekstrak kacang

hijau @ ! ml amilum 1C

Hijau

keruh

-iru

kehitamanMerah #ata

13( 15 ! ml ekstrak tauge @ ! ,eruh Hitam ?ngu


27/35

ml amilum 1C pekat

1D( 1

! ml ekstrak tauge @ 5

ml #u%%er pH 5 @ ! mlamilum 1C

,eruh

-iru

keunguan

-iru

keunguanpekat

1( 2( !

1 ml ekstrak kacang

hijau @ 5 ml #u%%er pH 5

@ ! ml amilum 1C

Agak

keruh

?ngu

pekat

?ngu

kurang

pekat

2

D( 1 ml ekstrak tauge @ !

ml amilum 1C

-eningedikit

keruh

?ngu

pekat

?ngu

kurang

pekat

( 11 ml ekstrak kacang

hijau @ ! ml amilum 1C

angat

keruh

?ngu

pucat?ngu pekat

11( 121 ml ekstrak tauge @ 5ml #u%%er pH 5 @ ! ml

amilum 1C

-eningedikit

keruh

?ngu

pekat

?ngu sangat

pekat

um#er : 0apran ementara

Enzim amilase merupakan enzim $ang mengkatalisis reaksi hidrlisis pati

menjadi gula&gula $ang le#ih sederhana seperti gluksa( maltse dan dekstrin.

ecara alami enzim amilase #an$ak terdapat pada tum#uhan( seperti pada kacang

hijau dan kecam#ahn$a( jagung( dan temula4ak )-ahri et al( 212*. Menurut

)+edjiadi( 1"*( amilase $ang #erasal dari tum#uhan terglng dalam jenis

55693_ACARA I Revisi

Documents

Transcript of 55693_ACARA I Revisi