1. Pada cara kerja isolasi protein terdapat berbagai macam bahan kimia yang digunakan antara lain di bawah ini. Jelaskan fungsi dari bahan kimia tersebut.

a. Tween-20

b. PMSF

PMSF (Poly Methyl Sulfonil Fluoride) sebagai antiprotease

c. Etanol absolut

d. Ammonium persulfat/ APS

Fungsi dari APS yaitu untuk menginduksi polimerisasi dari akrilamid dan monomer bisakrilamid.4. Hasil elektroforesis dilakukan di staining dan selanjutnya di destaining. Apakah tujuan saining dan destaining?

Staining atau pewarnaan perlu dilakukan untuk dilakukan untuk membantu dalam pengamatan band protein yang terseparasi. Larutan staining yang digunakan dalam praktikum ini yaitu CBB R-250 (Coomasie Brilliant Blue), CBB ini sensitif terhadap protein yang memiliki ukuran yang beriksar antara 0,5 hingga 20 mikrogram (Heidsamp, 2008). Penggoyangan perlu dilakukan untuk megoptimalkan reaksi staining yang dilakukan oleh CBB. Pencucian dengan aquades berfungsi untuk membilas dan menghilangkan CBB yang mungkin masih tersisa pada gel.

Selanjutnya dilakukan perendaman pada larutan destaining untuk menghilangkan CBB yang tersisa dan memperjelas band protein yang terbentuk serta untuk menghilangkan CBB yang tidak berada pada band protein. Pemberian kertas saring saat perendaman pada larutan destaining bertujuan untuk memaksimalkan pembersihan larutan CBB. Setelah itu dilakukan pencucian lagi dengan aquades untuk menghilangkan sisa larutan destaining dan menghentikan pewarnaan yang dilakukan oleh larutan destaining. Selanjutnya gel dapat discan untuk mendapatkan visualisasi lebih baik untuk analisis selanjutnya.