4/20/2015

1

Mikrobiologi Farmasi 07. Tes Serologi Mikroba

Semester IV

SSSSekolah TTTTinggi TTTTeknologi IIIIndustri & FFFFarmasi

2015

M. Ikhwan Setiawan

1

Cara Deteksi Penyakit Mikroba

2

Penyakit yang disebabkan mikroba patogen dapat

dideteksi melalui:

Komponen sel mikroba

Metabolit mikroba

4/20/2015

2

Kendala kultur mikrobiologi

3

Kendala kultur mikrobiologi:

Mikroba menunjukkan morfologi berbeda pada

medium yang berbeda

Beberapa mikroba tidak dapat dikultur secara

invitro atau sangat lambat

Respon imun

4

Bagian sel mikroba bila maksud ke dalam tubuh

manusia dapat dianggap sebagai senyawa asing

(Antigen) oleh tubuh manusia.

Dapat menginduksi sistem pertahanan tubuh

manusia dimana tubuh mengeluarkan antibodi

sehingga terjadi reaksi antigen-antibodi (disebut

respon imun)

4/20/2015

3

Antigen

5

Antigen = Antibodi Generator

Adalah senyawa yang dapat menginduksi antibodi

Reaksi Antigen-Antibodi

6

Antibodi umumnya terdapat dalam serum darah.

Antigen bereaksi dengan antibodi secara spesifik

Metode analisa/deteksi suatu penyakit dengan

mekansime reaksi antigen-antibodi merupakan

dasar metode SEROLOGI

4/20/2015

4

Contoh tes Reaksi Antigen-Antibodi

7

Tes kulit (tes hipersensitivitas, dll) merupakan salah

satu metode yang melibatkan reaksi antigen-

antibodi

Pemeriksaan Serologi

8

Adalah pengujian yang menggunakan serum

sebagai sampel dengan mekanisme reaksi antigen

antibodi.

4/20/2015

5

Istilah dalam serologi

9

Antigenik

Senyawa yang dapat bereaksi spesifik dengan antibodi

Antitoksin

Adalah antibodi yang dikeluarkan sebagai respon

terhadap keberadaan toksin yang dihasilkan oleh

mikroba.

Reaksi antitioksin dan toksin biasanya berupa

pengendapan (presipitasi)

Antibodi

10

Hasil reaksi hormonal sel B dalam limpa manusia

Bekerja secara spesifik terhadap antigen

Imunoglobulin: IgA, IgD, IgE, IgG, IgM

4/20/2015

6

Cara antibodi bekerja

11

Berbagai jenis Antibodi bekerja dengan berbagai cara

dalam melawan Antigen:

1. Aglutinin: menggumpalkan antigen (aglutinasi). Tejadi

apabila antibodi bersatu dengan sel permukaan bakteri.

2. Presipitin: mengendapkan antigen (presipitasi). Terjadi

bila antibodi bertemu dengan antigen terlarut.

3. Lisin: menghancurkan antigen (lisis).

4. Opsonin: merangsang leukosit (sel darah putih) untuk

menyerang antigen.

Ab dibentuk berdasarkan Ag

yang menginduksinya

12

4/20/2015

7

Fab (Fragment antigen binding): lokasi pada antibodi tempat

berikatan dengan antigen (patogen)

Fc (Fragment christalizable): tidak dapat mengikat antigen

Interaksi Ag-Ab

14

Langsung dapat divisualisasi (tak berlabel)

Aglutinasi

Koagulasi

Presipitasi

Tidak langsung dapat divisualisasi (berlabel)

Diberi penandaan/label untuk pengukurannya:

metode Imunokimia

4/20/2015

8

Senyawa Label

15

Adalah senyawa yang dikonjugasi pada Ag atau Ab untuk

dapat mem-visualisasi reaksi Ag-Ab

Dapat berupa enzim, senyawa berfluoresensi, radioaktif,

dll.

Reaksi amplifikasi dapat dilakukan sehingga dapat

diukur secara fisikokimia.

Contoh Label

16

Enzim: Horse radish peroxidase (HRP), : Horse radish

peroxidase (HRP), Alkaline Phosphatase Alkaline

Phosphatase

Senyawa berfluoresensi: Fluorescein, : Fluorescein,

Umbelliferon, Tetrametil rodhamin

Senyawa luminescence: Luciferin

Partikel: Tanned erythrocyte, Colloidal, microsphere ,

gold, silver

Vesikel: Liposom

4/20/2015

9

Metode Imunokimia

17

EIA/ELISA (Enzym Linkage Immunosorbent Assay)

RIA (Radio Immuno Assay)

IFA (Immuno Fluorescence Assay)

LIA (Luminesence Immuno Assay)

Metode Imunokimia

18

Immunoassay adalah suatu cara pemeriksaan untuk

mengukur derajat imunitas atau kadar antibodi dan

antigen dalam cairan tubuh atau serum seseorang.

4/20/2015

10

Pengamatan Imunokimia

19

ELISA

20

4/20/2015

11

ELISA

21

Keunggulan:

Teknik pengerjaan relatif sederhana

Ekonomis

Sensitivitas cukup tinggi

ELISA

22

Ada 2 jenis:

Competitive Assay

Konjugasi Ag-Enzim

Konjugasi Ab-Enzim

Non-Competitive Assay

dengan 2 Antibodi

Ab ke-2 dikonjugasikan dg Enzim sbg indikator

Sering disebut teknik Sandwich

4/20/2015

12

RIA (Radio Immuno Assay)

23

Versi radioaktif suatu zat, atau isotop dari substansi,

dicampur dengan Ab atau Ag kemudian direaksikan

dengan sampel.

Radioaktivitas memberikan sinyal, yang menunjukkan

apakah Ag atau Ab hadir dalam sampel.

Aplikasi bidang farmasi

24

Diagnosis klinik

Monitoring Obat

Penelitian Kanker

Studi Protein

4/20/2015

13

Tanya donk ??

Bingung ??

Selesai

Download this presentation on:

26