Mejora de cepas de Trichoderma para su empleo como biofungicidas

Manuel Rey1 , Jesús Delgado-Jarana2 , Ana Mª Rincón2 , Mª Carmen Limón2 y Tahía Benítez2

Enfermedades moo´s patogenos

•Bacterias •Nematodos •Hongos

Mayor causa de perdida de producciónCosecha y post-cosecha

Uso de compuestos quimicos

•Elevada eficacia •Rapidez de control

•Elimina organismos fitopatogenos y beneficos

Trichoderma

Antagonistas mas utilizados

•Ubicuidad•Facilidad de ser aisladas y cultivadas•Crecimiento rápido•Crecimiento en gran numero de sustratos•No atacan plantas

Mecanismos de acción

•Competición directa del espacio o nutrientes•Producción de metabolitos antibióticos•Parasitismo directo

Acción sinérgica

Uso de enzimas hidrolíticas de la pared celular

Capacidad saprofita medida por la cantidad de enzimas degradadoras

Quitina Glucanos

Efecto sinérgico con antibióticos

Parasitismo:

Aumento de niveles de enzimas hidrolíticas

Transformación de Trichoderma harzianum con genes de quitinasas y glucanasas

Aumento de la dosis génica

Cotransformación a partir de protoplastos

Aumentar niveles de transcripción de genes EHPC

chit42chit33

bgn16.2bgn13.1

Se obtuvieron 4 genes de EHPC

a) Análisis de patrón de integración

2% glucosa

Modificación de la afinidad a sustrato: Mejora propiedades líticas de la

enzima

Quitinasa 42KDa(mayor nivel actividad)

Fusión dominio de quitina de quitinasa de planta

Sustratos solubles sin diferencia

Sustratos complejos mayor actividad

Rhizoctonia solani

1)Silvestre2y 3) Chit334)Gen acetamidasa5 y 6) β-1,6 glucanasa7)Mutante supersecretor8 y 9) chit 42