58

LAMPIRAN 1

Bahan untuk media uji

1a. Media padat amilolitik (untuk 100 ml)

MgSO4 0,01 gr

KH2PO4 0,01 gr

NaCl 0,2 gr

Amilum 1,2 gr

Agar powder 1,8 gr

Untuk melihat zona halo setelah inkubasi diuapi dengan kristal I2.

1b. Media Bushnell-Hass (untuk 100 ml)

KH2PO4 0,1 gr

K2HPO4 0,1 gr

NH4NO3 0,1 gr

FeCl3 0,05 gr

MgSO4.7H2O 0,02 gr

CaCl2.2H2O 0,02 gr

1c. Media padat proteolitik (untuk 100 ml)

100 ml media Bushnell-Hass

Skim milk 2 gr

Agar powder 1,8 gr

1d. Media padat lipolitik (untuk 100 ml)

Minyak goreng 600 µl per 20 ml

Tween 20 50 µl per 20 ml

Rhodamin b 40 µl per 20 ml

Agar powder 2 gr

Untuk melihat zona halo dilihat di bawah sinar UV.

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

59

LAMPIRAN 2

Pengelompokan spesies isolat bakteri dominan pada reaktor pengolahan

limbah cair

Tabel 2a. Tingkat kesamaan isolat B dengan berbagai spesies Micrococcus sp.

No. Jenis uji B 1 2 3 4 5 6 7 8 9

1 Motilitas + - - - - - - + - -

2 Oksidase + + + + + + + + + -

3 VP d - - - + - - - - +

4 Pigmentasi Y Y Y C Y O C R R -

5 Glukosa - - + - + d - - d +

6 Sukrosa - - d - + - - - - +

7 Arginin - - - - - - + - - -

8 Nitrat + - + - - + - - + +

Keofisien sebanding (%) 50 38 35 63 48 25 53 46 55

Keterangan:

(Y) yellow, (C) cream, (O) orange, (R) red

(1) Micrococcus luteus; Micrococcus afermentans; Micrococcus lysodeikticus;

Staphylococcus afermentans, (2) Micrococcus varians; Micrococcus lactis;

Staphylococcus lactis, (3) Micrococcus lylae, (4) Micrococcus kristinae, (5)

Micrococcus nishinomiyaensis, (6) Micrococcus sedentarius, (7) Micrococcus

agilis, (8) Micrococcus roseus; Staphyococcus roseus, (9) Stomatococcus

mucilaginosus.

Tabel 2b. Tingkat kesamaan isolat F dengan berbagai spesies Bacillus sp.

Jenis Uji F 1 2 3 4 5 6 7 9 10 11 12 14 16 18 19 22 24

Pewarnaan

gram + + + + + d + + + + + d d d - - d d

Bentuk sel bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt

Sel yang

membentuk

rantai

+ + + + + d d + d d d d d d - - d d

Motilitas + - + - + + + + + + + + + + + + + +

Panjang sel > 3

µm + + + + + - - d - - - + + d d d - -

Bentuk dan

ukuran spora

VT

X

V

X

V

X

V

X

V

X

V

X

V

X

V

X

V

X VX VX

VT

X VX

VT

X VX VX VX

VT

X

Pembengkakan

sel spora d - - - - d d - - - - d + + + + d +

Glucose + + + + + + + + + + + + + + + + + +

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

60

Jenis Uji F 1 2 3 4 5 6 7 9 10 11 12 14 16 18 19 22 24

Cellubiose

(Hydrolysis

selulase)

d - d d d - d + + + + d + + + + d d

Galactose

(Gelatin) - - - d - - d + d + d d d + + + - -

Mannose

(Manitol) - - - - d d + d + + d + d + + + + +

Raffinose - - - - - - - d + d + + + + + + d +

Salicin - - + d d - d + + + + d d + + + d d

Xylose + - - - - - - + d + d d - + + + d -

ONPG - - - d - d + + + + d d d + + + d -

Citrate + - d d + - - + + + d d - - - d - -

Urease + - d d - - + d - d - - d - - - - -

Indole - - - - - - - - - - - - + - - - - -

VP (Voges

Proskauer) d + + + + - - - + d + d + d d + d d

Reduksi nitrate - + + + + + - d + + + d - d + + + d

Oksidase + d d d d - + - - - - - + - + - - -

Hidrolisis

kasein (Protein) + + + + + + - + + + + + + - - + - d

Hidrolisis

tepung

(Amilum)

+ + + + + + + + + + + + + + + + + +

Koefisien

sebanding (%) 65 72 55 57 54 55 48 55 63 51 71 56 68 65 63 63 64

Keterangan:

(T) spora terminal, (V) spora sentral atau subteminal, (X) spora oval,(Y) spora

bulat.

(1) B. anthracis; (2) B. cereus, B. anthracoide; (3) B. mycoides; (4) B.

thuringiensis; (5) B. firmus; (6) B. lentus; (7) B. megaterium; (9) B.subtilis; (10)

B. licheniformis; (11) B. Amyloliquefaciens; (12) B. coagulans; (14) B. alvei; (16)

B.circulans; (18) B. macerans; (19) B.polymyxa; (22) B. stearothermophilus; (24)

B. stearothermophilus

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

61

LAMPIRAN 3

Dokumentasi Penelitian

Tabel 3a. Dokumentasi untuk sampel pada hari ke-7 pada media NA dan

amilolitik

No Sampel NA Amilolitik

1 Inlet

2 K1A - -

3 K1T

4 K1B

5 K2A - -

6 K2T

7 K2B

8 K3A - -

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

62

9 K3T

10 K3B - -

11 K4A - -

12 K4T

13 K4B - -

14 K1.2

15 K2.2

16 K3.2 - -

17 K4.2

18 Outlet 1

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

63

19 Outlet 2

Keterangan :

Reaktor 1

K1 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 1 (Atas, tengah, Bawah )

K2 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 2 (Atas, tengah, Bawah )

K3 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 3 (Atas, tengah, Bawah )

K4 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 4 (Atas, tengah, Bawah )

Reaktor 2

K1.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 1

K2.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 2

K3.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 3

K4.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 4

Tabel 3b. Dokumentasi untuk sampel pada hari ke-7 pada media proteolitik dan

lipolitik

No Sampel Proteolitik Lipolitik

1 Inlet

2 K1A - -

3 K1T

4 K1B

5 K2A - -

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

64

6 K2T

7 K2B

8 K3A - -

9 K3T

10 K3B - -

11 K4A - -

12 K4T

13 K4B

14 K1.2

15 K2.2

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

65

16 K3.2 - -

17 K4.2

18 Outlet 1

19 Outlet 2

Keterangan :

Reaktor 1

K1 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 1 (Atas, tengah, Bawah )

K2 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 2 (Atas, tengah, Bawah )

K3 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 3 (Atas, tengah, Bawah )

K4 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 4 (Atas, tengah, Bawah )

Reaktor 2

K1.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 1

K2.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 2

K3.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 3

K4.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 4

Tabel 3c. Dokumentasi untuk sampel pada hari ke-21 pada media NA dan

amilolitik

No Sampel NA Amilolitik

1 Inlet

2 K1A -

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

66

3 K1T

4 K1B

5 K2A

6 K2T

7 K2B

8 K3A

9 K3T

10 K3B - -

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

67

11 K4A

12 K4T

13 K4B - -

14 K1.2

15 K2.2

16 K3.2 - -

17 K4.2

18 Out1

19 Out2

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

68

Keterangan :

Reaktor 1

K1 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 1 (Atas, tengah, Bawah )

K2 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 2 (Atas, tengah, Bawah )

K3 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 3 (Atas, tengah, Bawah )

K4 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 4 (Atas, tengah, Bawah )

Reaktor 2

K1.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 1

K2.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 2

K3.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 3

K4.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 4

Tabel 3d. Dokumentasi untuk sampel pada hari ke-21 pada media proteolitik dan

lipolitik

No Sampel Proteolitik Lipolitik

1 Inlet

2 K1A -

3 K1T

4 K1B

5 K2A

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

69

6 K2T

7 K2B

8 K3A

9 K3T

10 K3B - -

11 K4A

12 K4T

13 K4B - -

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

70

14 K1.2

15 K2.2

16 K3.2 - -

17 K4.2

18 Out1

19 Out2

Keterangan :

Reaktor 1

K1 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 1 (Atas, tengah, Bawah )

K2 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 2 (Atas, tengah, Bawah )

K3 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 3 (Atas, tengah, Bawah )

K4 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 4 (Atas, tengah, Bawah )

Reaktor 2

K1.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 1

K2.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 2

K3.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 3

K4.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 4

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

71

Tabel 3c. Karakteristik mikroskopik isolat bakteri heterotropik untuk sampel hari

ke-7

Sampel Isolat Gambar Pengamatan

Bentuk sel Gram

Inlet

A

Kokoid (-)

B

Batang (+)

C

Kokoid (-)

D

Kokus (+)

E

Kokus (+)

Outlet 1

F

Kokus (+)

E

Kokus (+)

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

72

G

Batang (+)

Outlet 2

H

Kokoid (-)

I

Kokoid (-)

B

Batang (+)

J

Batang (+)

Tabel 3d. Karakteristik mikroskopik isolat bakteri heterotropik untuk sampel hari

ke-21

Sampel Isolat Gambar Pengamatan

Bentuk sel Gram

Inlet K

Kokoid (-)

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

73

B

Batang (+)

L

Kokus (+)

F

Kokus (+)

Outlet 2

B

Batang (+)

M

Kokoid (-)

Gambar 1. Isolat B setelah dimasukkan Gambar 2. Isolat F setelah dimasukkan

pada kit pada kit

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan

74

Gambar 3. Isolat B setelah 24 jam Gambar 4. Isolat F setelah 24 jam

Gambar 5. Isolat B setelah 48 jam Gambar 6. Isolat F setelah 48 jam

Gambar 7. Hasil uji oksidase isolat B (kanan) Gambar 8. Hasil uji H2O2 isolat B

dan F (kiri) (kanan) dan F (kiri)

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi Kelimpahan Bakteri Indigenous Dekomposer Senyawa Organik Pada Reaktor Pengolahan Limbah Cair

Fitriana Puspitasari Pingkan